基于网络药理学研究止嗽散治疗咳嗽变异性哮喘的分子机制

目的 通过整合药物代谢动力学数据进行多重药物靶点预测,探究止嗽散治疗咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)的作用机制.方法 先利用大规模数据挖掘、文献检索搜集止嗽散方中所有中药的化学成分,再利用药物代谢动力学数据筛选其活性成分并用Swiss Target Prediction、SysDT和TargetNet方法进行靶点预测,并借助GeneCards和OMIM数据库获得CVA的致病基因,并与药物靶点取交集以构建蛋白相互作用网络,对获得的核心靶点进行生物学功能富集分析,最后选取若干核心靶点及其关键的成分进行分子对接验证.结果 共筛出止嗽散治疗CVA的活性成分97个(包括白前苷元C、7,4'-二羟基黄酮、甘草酸、新对叶百部碱和β-谷甾醇)及靶点144个.通过分析蛋白相互作用网络得到MAPK3、TNF、CASP3、EGFR、PTGS2和MMP-9等10个核心靶点.KEGG富集分析得到30条与CVA相关的通路.分子对接验证核心靶点中EGFR、PTGS2和MMP-9与其关键化合物有较好结合力.结论 止嗽散治疗CVA涉及多条信号通路,其分子机制可能是通过止嗽散中主要活性成分对PI3K-Akt、NF-κB和HIF-1等通路的调控,最终达到治疗CVA的效果.     

基于网络药理学研究桃红四物汤干预腰椎间盘突出症的机制

目的 构建桃红四物汤干预腰椎间盘突出症的“药物- 靶基因- 疾病”预测模型,探究桃红四物汤治疗腰椎间盘突出症的核心靶点及作用通路。方法 〖JP3〗通过中药系统药理学数据库与分析平台收集桃红四物汤中有效的化学成分及靶点信息,运用UniProt蛋白质数据库实现基因靶点名称规范化;从GeneCards、疗效靶点数据库、人类孟德尔遗传在线、DRUGBANK数据库中查找腰椎间盘突出症的靶点。构建“成分- 靶点- 疾病”网络,并对蛋白相互作用（protein- protein interaction,PPI）网络进行可视化分析,分析排名前20个靶点的生物过程、分子功能、细胞组成和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）中信号通路。结果 筛选出69个桃红四物汤的有效化学成分,235个潜在基因靶点,其中与腰椎间盘突出症共同的基因靶点有82个。PPI网络分析显示,肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）、表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF)、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）、激活蛋白1（activator protein 1,JUN)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（serine/threonine- protein kinase 1,AKT1）是桃红四物汤干预腰椎间盘突出症的核心靶点。基因本体论的富集分析结果显示,桃红四物汤干预腰椎间盘突出症的过程涉及对DNA结合转录因子活性的调节、细胞对生物刺激的反应、氧化应激反应以及对脂多糖、细菌来源分子的调节;KEGG的通路富集分析结果显示,丝裂原活化蛋白激酶（mitogen- activated protein kinase,MAPK）通路、晚期糖基化终末产物（advanced glycation end product,AGE)- AGE受体（receptor for AGE,RAGE）通路、TNF通路的差异蛋白表达水平较高。结论 桃红四物汤可能是通过抗炎、提高免疫、调控激素、延缓细胞凋亡等作用多靶点、多通路调控腰椎间盘突出症。     

化浊解毒方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织TGF-β1、α-SMA、HGF蛋白及其mRNA表达的影响

目的 探究化浊解毒方治疗慢性肾功能衰竭（chronic renal failure,CRF）的机制。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、尿毒清组、氯沙坦钾组、化浊解毒组，采用5/6肾切除术复制CRF模型。模型复制后连续干预12周，苏木精-伊红染色后光学显微镜下观察肾脏组织形态学变化，分别采用Western blot法、RT-PCR法检测肾组织转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin, α-SMA）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）蛋白及其mRNA的表达水平。结果 与对照组比较，模型组大鼠血清肌酐（serum creatinine,SCr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）和肾组织TGF-β1、HGF、α-SMA蛋白及其mRNA表达水平明显升高（P＜0.05）；与模型组比较，尿毒清组、氯沙坦钾组、化浊解毒组大鼠SCr、BUN及肾组织TGF-β1、α-SMA蛋白及其mRNA表达水平明显降低（P＜0.05），肾组织HGF蛋白及其mRNA表达水平明显升高（P＜0.05）。尿毒清组、氯沙坦钾组、化浊解毒组大鼠肾脏纤维化水平有不同程度改善。结论 化浊解毒方可有效改善CRF大鼠肾功能，其机制可能与抑制CRF大鼠肾脏组织中TGF-β1的表达并上调HGF的表达，从而抑制α-SMA的表达有关。     

补肾安胎冲剂对复发性流产患者血清血管内皮生长因子及其可溶性受体-1的影响

目的 探讨补肾安胎冲剂治疗复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）的机制。方法 采用酶联免疫吸附法检测30例RSA患者治疗前后及30例正常早孕妇女血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及其受体——可溶性fms样酪氨酸激酶-1(soluble fms like tyrosine kinase 1，sFlt-1)的水平。结果 治疗组妊娠成功率为80.0％；与对照组比较，治疗组治疗前血清VEGF显著降低（P<0.01），sFlt-1显著增高（P<0.01）；治疗组治疗后与治疗前比较，VEGF显著升高(P<0.01)，sFlt-1显著降低(P<0.01)；保胎治疗无效者与保胎治疗成功者比较，血清VEGF水平显著降低（P<0.01），血清sFlt-1水平显著增高（P<0.05）。结论 补肾安胎冲剂治疗RSA的机制可能与提高血清VEGF水平，降低血清sFlt-1水平，从而促进胎盘绒毛血管的形成有关。     

基于网络药理学和分子对接验证技术探讨贯叶金丝桃抗阿尔茨海默病的作用机制

目的 利用网络药理学及分子对接技术研究贯叶金丝桃治疗阿尔茨海默病（Alzheimers disease,AD）的潜在作用机制。方法 在TCMSP及TCM Database@Taiwan数据库查找贯叶金丝桃的化学成分并进行活性成分筛选;利用化源网、PubChem、SwissTargetPrediction及ChEMBL数据库获取活性成分的作用靶点,检索GeneCards、OMIM、DrugBank和DisGeNET数据库,结合文献检索获取AD的疾病靶点。取两者交集靶点,利用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络。采用Metascape平台对靶点进行GO富集分析和KEGG富集分析,通过Cytoscape 3.10.0软件构建“化合物-靶点-通路”网络并进行拓扑学分析,并采用AutoDock Vina 1.1.2进行分子对接验证。结果 贯叶金丝桃防治痴呆的关键化合物是贯叶金丝桃素金、丝桃素及金丝桃苷等,其对应的关键靶点为APP、PIK3R1、PIK3CA、AKT1、EGFR、GSK3B等,分子对接验证结果显示其主要活性成分与核心靶点均具备潜在活性。所涉及的主要分子过程及通路为激酶活性的正调控、神经活性配体-受体相互作用及激酶活性调节等,关键通路为AD通路和PI3K-Akt信号通路。结论 贯叶金丝桃治疗AD的机制可能与减少β-淀粉样蛋白的产生及tau蛋白形成,调节神经炎症相关。     

温肺化痰方对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者外周血中性粒细胞弹性蛋白酶、表皮生长因子受体表达的影响

目的 观察温肺化痰方药对痰湿蕴肺证慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）急性加重期患者外周血中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophil elastase,NE）和表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor,EGFR）表达的影响。方法 将60例COPD急性加重期痰湿蕴肺证患者随机分为治疗组和对照组各30例。两组患者均接受西医基础治疗,治疗组加用温肺化痰方药,对照组加用氨溴索针剂,10 d为1个疗程。观察并比较两组临床疗效,治疗前后分别检测两组患者血清NE、EGFR水平。结果 两组临床疗效的分布比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）,治疗组优于对照组;与治疗前比较,两组治疗后血清NE和EGFR均显著降低（P<0.05）;治疗组血清EGFR降低值显著小于对照组（P<0.05）。结论温肺化痰方药可能通过调节NE、EGFR的表达,改善COPD急性加重期患者的气道黏液高分泌状态。     

基于网络药理学和分子对接技术探究小柴胡汤治疗三阴性乳腺癌的作用机制

目的 通过生物信息学分析和整合药物代谢动力学数据进行多重药物靶点预测，探究小柴胡汤治疗三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）的作用机制。方法 基于药理学数据库获取小柴胡汤的活性成分与对应靶点；采用加权基因共表达网络分析方法识别乳腺癌高通量测序数据中肿瘤发生发展的关键基因；采用GO功能与KEGG通路富集分析进行生物功能与通路注释；通过Cytoscape软件进行核心基因鉴定；利用分子对接方法模拟关键生物标志物与小柴胡汤核心活性成分的对接模式。结果 在对小柴胡汤进行数据挖掘后获得242个有效成分和265个对应靶点，通过加权分析方法得到乳腺癌密切相关的563个疾病关键靶点，小柴胡汤与TNBC共有13个交集靶点。小柴胡汤成分靶点网络构建得到槲皮素、山柰酚、异鼠李亭素、木犀草素、豆甾醇、β-豆甾醇、牵牛花色素等主要成分。PPI网络构建后通过筛选得到3个核心靶点（CCNA2、CCNB1、CHEK1）与2个关键化学成分（槲皮素、山柰酚）。GO富集获得15个生物过程、45个细胞组分、16个分子功能，其中主要与细胞器裂变和细胞核分裂等细胞增殖过程，浓缩染色体和中心区核染色体，单链DNA结合ATP依赖活性等相关。KEGG通路富集得到了37条通路，主要富集在精氨酸等代谢通路上。分子对接模拟显示核心蛋白靶点与重要活性成分具有良好的结合活性。结论 小柴胡汤主要通过CCNA2、CCNB1、CHEK1等靶点，槲皮素、山柰酚等主要活性成分及细胞调亡、成纤维细胞形成和肿瘤细胞增殖及炎症进程达到干预TNBC的作用。     

电针预处理不同原络配穴对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1蛋白表达的影响

目的 观察电针预处理不同原络配穴对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症因子表达的影响，初步探讨其保护心肌的作用机制。方法 采用冠状动脉左前降支结扎再灌注法复制急性心肌缺血再灌注损伤模型，将模型大鼠随机分为模型对照组、神门支正组、神门通里组、大陵内关组、大陵外关组，每组6只，另取6只大鼠设为假手术组。电针预处理组分别选取神门、支正、通里、内关、大陵和外关穴位，用电针仪进行电针刺激，刺激电压1 V，频率为2 Hz，每日1次，每次20 min。模型复制前共刺激14 d。假手术组、模型组不给予电针刺激。监测大鼠心电图，分析ST段位移情况；采用免疫组织化学法检测心肌组织肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）、细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2, COX-2）表达水平。采用Wester blot 法检测心肌组织COX-2蛋白相对表达水平。结果 电针预处理不同原络配穴均可显著降低急性心肌缺血再灌注损伤模型大鼠升高的ST段电压(P<0.05)，以神门支正组的效应最显著。免疫组织化学法检测结果显示，电针预处理不同原络配穴均可显著降低模型大鼠心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1表达水平(P<0.05)， 以神门支正组的效应最显著。Western blot法检测结果显示，各组心肌组织COX-2蛋白表达水平与免疫组织化学法检测结果相一致。结论 电针预处理减轻急性心肌缺血再灌注损伤的机制与调节心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1表达水平有关，电针神门、支正穴的效应最为显著。     

千金藤碱抑制非小细胞肺癌A549细胞生长和转移以及对血红素加氧酶-1和表皮生长因子受体基因表达的影响

目的 探讨千金藤碱抑制肺癌细胞A549生长、迁移和侵袭的作用以及对血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）和表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）基因表达的影响。方法 甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT) 比色法检测千金藤碱对肺癌细胞的细胞毒性,观察其对A549细胞生长的抑制作用,并用倒置显微镜观察千金藤碱处理不同时间内A549细胞的形态变化;Transwell和侵袭实验检测A549细胞迁移和侵袭能力;RT-PCR和Western blot法分别检测A549细胞内HO-1和EGFR基因的mRNA和蛋白表达水平。结果 千金藤碱能够抑制肺癌细胞A549细胞的生长,细胞活力随着作用浓度的增加和时间的延长明显降低;10 g/ml千金藤碱处理24 h后,A549细胞发生体积变小、皱缩变圆和染色体固缩等现象;与对照组相比,千金藤碱（>5.0 g/ml）可使穿过隔膜和穿过基质胶的A549细胞数明显减少（P<0.05）。10.0 g/ml千金藤碱明显降低A549细胞中HO-1和EGFR基因的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论 千金藤碱可抑制肺癌细胞的增殖,降低A549细胞的迁移和侵袭能力,下调A549细胞的HO-1和EGFR基因的表达水平,且作用效果具有一定的时间和浓度依赖性。     

半夏泻心汤辅治功能性消化不良42例

目的 观察半夏泻心汤辅助治疗功能性消化不良的临床疗效及其对血浆胃动素的影响.方法 将82例确诊为功能性消化不良的患者随机分为治疗组42例和对照组40例,对照组按西医功能性消化不良治疗方案进行抑酸、清除幽门螺杆菌及使用胃动力药,必要时给予心理疏导及抗抑郁药治疗.治疗组在西医治疗基础上加用中药半夏泻心汤治疗,观察两组治疗4...     

参芪扶正注射液联合化学疗法治疗晚期胃癌25例

目的 评价参芪扶正注射液联合化学疗法治疗晚期胃癌的临床疗效。方法 将50例晚期胃癌患者按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组25例。对照组予以化学治疗,观察组在对照组治疗方案基础上加用参芪扶正注射液进行联合治疗。比较两组患者临床疗效,治疗前后血清糖类抗原125（carbohydrate antigen 125, CA125）、癌胚抗原（carcinoma embryo antigen, CEA）水平,中医证候积分,卡氏功能状态（Karnofsky performance status, KPS）评分,癌因性疲乏(cancer related fatigue, CRF)评分,生活质量核心量表- 30（quality of life questionnare- core 30, QLQ- C30）评分以及不良反应发生情况。结果 两组患者近期肿瘤疗效比较,差异无统计学意义（P>0.05）。与治疗前比较,两组患者治疗后血清CA125、CEA水平明显下降（P＜0.05）,且观察组患者治疗后血清CA125、CEA水平降低程度显著大于对照组（P＜0.05）。与治疗前比较,两组患者治疗后中医证候积分显著下降（P＜0.05）,KPS评分显著升高（P＜0.05）;与对照组比较,观察组中医证候积分、KPS评分改善更显著（P＜0.05）。与治疗前比较,观察组患者治疗后CRF总分及行为、躯体、认知评分均显著降低（P＜0.05）,而对照组患者治疗后躯体评分显著增加（P＜0.05）。两组基于QLQ- C30评分的疗效比较,差异有统计学意义（P<0.05）,观察组疗效显著优于对照组。与对照组比较,观察组患者血小板减少、血红蛋白下降、白细胞减少、恶心呕吐、乏力的不良反应发生率均显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 参芪扶正注射液联合化学治疗能够显著提高晚期胃癌患者的疗效,降低化学治疗药物的不良反应,改善患者生存质量。     

疏肝健脾中药治疗功能性消化不良临床研究

目的 观察疏肝健脾中药治疗功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)的疗效并探讨其作用机制.方法 将100例FD患者随机分为对照组和治疗组,分别采用多潘立酮和疏肝健脾中药治疗,观察并比较两组临床疗效.检测FD肝郁脾虚证患者治疗前后血浆血管活性肠肽(vasoactive intestinal pep...     

芪归糖痛宁颗粒对大鼠糖尿病周围神经病变的影响

目的 观察芪归糖痛宁颗粒对大鼠糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)的疗效，并探讨其作用机制。方法 以链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)一次性腹腔注射复制DPN大鼠模型。于模型复制第3天起，各治疗组分别灌胃给予相应的受试药物，正常组和模型组灌胃给予等容量溶媒，疗程8周。实验结束后，测定大鼠热痛阈值、血液流变学指标、血清神经生长因子(nerve growth factor, NGF)、髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)的含量，同时取固定部位坐骨神经，用苏木精 伊红染色观察坐骨神经组织病理学变化。结果 与模型组比较，芪归糖痛宁颗粒组能明显改善DPN大鼠坐骨神经病理组织学损伤程度，同时降低大鼠热痛阈（P＜0.05），降低大鼠全血黏度低切、中切、高切，血浆黏度，红细胞聚集指数及MBP含量（P＜0.05，或P＜0.01），升高血清NGF含量（P<0.05）。结论 芪归糖痛宁颗粒对大鼠DPN具有一定的治疗作用。     

“重建中气”中药复方对进展期胃癌患者生存预后影响的队列研究

目的 观察“重建中气”中药复方对进展期胃癌术后及辅助化学治疗后患者生存期的影响。方法 回顾分析62例进展期胃癌患者的临床资料，根据是否服用“重建中气”中药复方将其分为中药暴露、无中药暴露两个队列。中药暴露组以“香砂六君子汤”为主方辨证加减。观察性别、年龄、首次就诊体质量和体质量指数（body mass index，BMI）、卡氏功能状态（Karnorfsky performance status，KPS）评分、复发或转移、中药暴露等因素对进展期胃癌生存期的影响。结果 对62例患者随访2年，与无中药暴露组比较，中药暴露组患者体质量和BMI显著升高（P<0.05），复发或转移率显著降低（P<0.05）；Kaplan-Meier单因素生存分析结果显示，中药暴露、基线KPS评分、复发或转移、基线BMI是生存期的影响因素（P＜0.05）；COX多因素回归分析显示，KPS评分是总生存期的独立影响因素。结论 进展期胃癌术后患者为口服中药的优势人群，“重建中气”中药复方可增加或稳定进展期胃癌患者的体质量，提高患者生存质量，改善预后生存。     

电针结合饮食和运动疗法治疗胃肠实热型单纯性肥胖症临床研究

目的 观察电针结合饮食和运动疗法对胃肠实热型单纯性肥胖症的临床疗效,并探索其作用机制.方法 采用随机对照的方法,分别设立针灸饮食运动组(治疗组)35例和饮食运动组(对照组)37例.观察两组临床疗效、主要症状疗效,治疗前后观察两组体质量、体质量指数(body mass index,BMI)、腰围的变化,检测治疗组治疗前后及健康对照者的空腹血糖(fasting blood sugar,FBS)、餐后2 h血糖(postprandial two lours plasma glucose,2hPG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)和餐后2 h空腹胰岛素(postprandial two bours fasting insulin,2hFlNS)水平.结果 治疗组临床总有效率显著高于对照组(P<0.01),多食易饥、畏热多汗、口千舌燥和大便秘结的总有效率显著高于对照组(P<0.05,或P<0.01);治疗组体质量、BMI及腰围下降值显著高于对照纽(P<0.01);治疗组FINS及2hFINS水平较治疗前显著下降(P<0.01).结论 电针结合饮食运动疗法治疗胃肠实热型单纯性肥胖症疗效显著,并可同时改善其胰岛素抵抗状况.     

枳黄方对酒精性肝损伤大鼠肝、胃脂质过氧化水平和血清ALT活性的影响

目的：探讨枳黄方（ZHF）防治酒精性肝损伤的机制.方法：通过ZHF保护性试验和ZHF治疗性试验,记录大鼠醉酒时间,采用分光光度法和血清生化法检测肝组织和胃黏膜超氧化物歧化酶（SOD）活力和脂质过氧化产物丙二醛（MDA）水平,以及血清丙氨酸转氨酶（ALT）的活性.结果：在ZHF保护性试验中,ZHF能缩短大鼠醉酒时间（P〈0.05）,显著降低肝脏和胃黏膜MDA含量（P〈0.05或P〈0.01）,显著提高肝脏和胃黏膜中SOD活力（P〈0.01）,使酒精性肝损伤大鼠血清中ALT活性显著降低（P〈0.01）.在ZHF治疗性试验中,ZHF对大鼠醉酒时间无影响,但使大鼠肝脏MDA含量和血清ALT含量显著下降（P〈0.01）,显著提高肝脏SOD活力（P〈0.01）.结论：ZHF能对抗酒精性肝损伤大鼠肝脏脂质过氧化,保护肝功能.ZHF保护性用药可防治酒精性肝损伤.