丹皮酚通过miR-21介导的p38 MAPK信号通路下调氧化低密度脂蛋白诱导的大鼠血管内皮细胞肿瘤坏死因子-α释放

目的 观察微RNA-21（microRNA-21，miR-21）对p38丝裂原活化的蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase, p38-MAPK）信号通路的调控作用，探究丹皮酚（paeonol, Pae）抑制血管内皮细胞（vascular endothelial cell, VEC）损伤的机制。方法 组织块预消化贴壁法培养大鼠VEC；氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL）诱导VEC的损伤；用HiPerFect试剂将miR-21模拟物或抑制剂转染进入VEC；免疫印迹法检测p38 MAPK信号通路相关蛋白的表达；酶联免疫吸附试验检测VEC中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的水平。结果 ox-LDL明显提高VEC中Ras、p-MKK3/6、p-p38蛋白表达水平，并诱导VEC分泌TNF-α；miR-21高表达可升高TNF-α水平及Ras、p-MKK3/6、p-p38蛋白表达水平；Pae明显降低损伤的VEC分泌TNF-α水平，且抑制由miR-21高表达引起的TNF-α水平上升及p38 MAPK信号通路的激活。结论 Pae可抑制miR-21介导的p38 MAPK信号通路，减少ox-LDL诱导的VEC中TNF-α的分泌。     

丹皮酚对脂多糖诱导的大鼠血管内皮细胞VCAM-1、TNF-α释放及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的观察丹皮酚(Paeonol,Pae)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)释放血管内皮细胞黏附因子-1(vascular endothelial cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及Toll样受体-4(toll-like receptor,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路的影响,以阐明Pae抑制VECs黏附功能的分子机制。方法组织块预消化贴壁法分离培养VECs,采用LPS诱导VECs炎性损伤;健康大鼠灌胃给予Pae制备含药血清,反相高效液相色谱法测定血清Pae的含量;RT-PCR法检测TLR4mRNA的表达;凝胶迁移试验检测NF-κB蛋白的表达;免疫组织化学检测VCAM-1的表达;放射免疫法检测TNF-α的表达。结果 Pae含药血清(2.5,5,10μg/mL)作用于LPS诱导的VECs 24h,可抑制VECs中TLR4mRNA和NF-κB蛋白表达,以及VCAM-1和TNF-α分泌,呈现一定的剂量依赖性,其中Pae 10μg/mL的抑制作用均具有统计学意义(P0.05)。结论 Pae降低TNF-α的释放和VCAM-1水平,可能是通过下调LPS诱导的TLR4/NF-κB信号通路的活化而实现的。     

艾灸督脉经穴通过p38 MAPK通路抑制血管性痴呆大鼠海马CA1区IL-1β和TNF-α表达

目的 基于p38 MAPK通路探究艾灸督脉“百会”“大椎”“风府”穴治疗血管性痴呆的作用机制。方法 将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、艾灸组、阻滞剂组、艾灸+阻滞剂组。采用双侧颈总动脉永久结扎法复制血管性痴呆大鼠模型。采用Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能,透射电子显微镜观察海马神经细胞超微结构,Western blot法和RT-qPCR法分别检测海马组织中p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1 beta,IL-1β）蛋白及其mRNA表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠平均逃避潜伏期显著延长（P＜0.05）,穿越平台次数显著减少（P＜0.05）;海马CA1区神经细胞核染色体凝集、边集,胞浆内细胞器数量明显减少,胞浆基质完全溶解空泡化,神经纤维变形、溶解、坏死;p38 MAPK、TNF-α、IL-1β蛋白及mRNA表达水平均显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,艾灸组、阻滞剂组平均逃避潜伏期显著缩短（P＜0.05）,穿越平台次数显著增加（P＜0.05）;海马CA1区神经细胞结构有不同程度改善;p38 MAPK、TNF-α、IL-1β蛋白及mRNA表达水平均显著降低（P＜0.05）。艾灸＋阻滞剂组与阻滞剂组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 艾灸对血管性痴呆大鼠的认知功能障碍具有一定的改善作用,其机制可能是通过调控p38 MAPK信号通路减少TNF-α、IL-1β蛋白表达。     

天麻素通过下调ERK1/2-p38信号通路保护谷氨酸损伤的PC12细胞

目的 研究天麻素（gastrodin，Gas）通过调控ERK1/2-p38信号通路保护谷氨酸损伤的PC12细胞。方法 建立谷氨酸损伤的PC12细胞模型；甲基噻唑基四唑比色法测定细胞活力；Hochest 33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态；罗丹明123染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位；Western blot法检测细胞内p38、ERK1/2、p-p38、p-ERK1/2蛋白表达。结果 天麻素明显抑制谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡，在0.1~10 μmol/L剂量范围内呈一定的量效关系；天麻素升高谷氨酸损伤引起的细胞线粒体膜电位的降低，下调p-p38、p-ERK1/2蛋白的表达。结论 天麻素对谷氨酸损伤的PC12细胞具有保护作用，其机制可能与升高线粒体膜电位水平，下调p-p38、p-ERK1/2蛋白表达，抑制细胞凋亡有关。     

参归益智方对阿尔茨海默病大鼠海马组织VEGF、p-p38 MAPK表达的影响

目的 观察参归益智方对阿尔茨海默病（Alzheimers disease，AD）大鼠行为学障碍的改善作用并探究其作用机制。方法 将40只SD大鼠随机分为空白组，模型组，参归益智方低、高剂量组，每组10只。采用β淀粉样蛋白1-42双侧注射大鼠海马区诱导AD模型，通过Morris水迷宫检测AD大鼠行为学改变，采用Western blotting检测大鼠海马组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、p38丝裂原活化蛋白激酶（ p38 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK）及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（phosphorylation of p38 mitogen-activated protein kinase，p-p38 MAPK）的表达水平。结果 给药4周末，参归益智方能够剂量依赖地降低AD大鼠Morris水迷宫试验的逃避潜伏期（P<0.05），显著提高穿越平台次数（P<0.05），剂量依赖地提高AD大鼠海马VEGF表达水平，显著降低AD大鼠海马p-p38 MAPK表达水平。结论 参归益智方改善AD大鼠行为学障碍的作用与其提高海马区VEGF表达，降低p-p38 MAPK表达有关。     

电针夹脊穴通过磷酸化p38 MAPK信号通路对大鼠炎性痛阈的影响

目的 观察电针夹脊穴对炎性疼痛大鼠痛阈的影响,从信号转导的角度探讨针灸镇痛的机制. 方法 采用经典的完全弗氏佐剂性关节炎疼痛模型,观测电针刺激对大鼠痛阈的影响,采用免疫组织化学法测定各组大鼠背根神经节(doral root ganglion, DRG)内磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation-p38 mitogen activated protein kinase, p-p38 MAPK)的含量,采用蛋白印迹法测定DRG内辣椒素受体1(vanilloid receptor 1, VR1)含量. 结果 电针刺激影响大鼠DRG内p-p38 MAPK和VR1含量,并可提高炎性疼痛大鼠的痛阈,降低p38 MAPK受体阻断剂提高后大鼠的痛阈. 结论 电针影响炎性疼痛的机制与p38 MAPK-VR1信号通路密切相关.     

血管软化丸调控miRNA-467b抗动脉粥样硬化的作用与初步机制研究

目的 探讨中药复方血管软化丸通过miRNA-467b靶向脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase，LPL）调控巨噬细胞，减少白细胞介素（interleukin，IL）-6，IL-1β、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）等炎症因子分泌和巨噬细胞脂质蓄积，从而发挥抗动脉粥样硬化的作用与初步机制。方法 将RAW264.7巨噬细胞随机分为5组，即对照组、模型组、miR-467b mimic组、中药高剂量含药血清组、中药低剂量含药血清组；经干预后，采用RT-PCR检测巨噬细胞中pri-miR-467b和LPL mRNA表达；采用高效液相色谱法检测巨噬细胞内胆固醇水平。连续4周高脂饲料（含脂肪21%、胆固醇0.15%）饲养ApoE-/-小鼠复制动脉粥样硬化模型，模型复制成功后，中药高、低剂量组每日分别灌胃血管软化丸86.4、21.6 g/kg，连续给药12周；对照组、模型组每日灌胃0.9%生理盐水86.4 g/kg 。采用免疫组织化学法检测主动脉LPL蛋白表达水平，RT-PCR检测主动脉pri-miR-467b和LPL mRNA表达水平；采用ELISA法检测血清IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1水平。结果 与对照组比较，模型组巨噬细胞pri-miR-467b mRNA表达水平和巨噬细胞内游离胆固醇（free cholesterol，FC）水平均明显降低（P＜0.05），巨噬细胞内LPL mRNA及其蛋白表达水平以及总胆固醇（total cholesterol，TC）、胆固醇酯（cholesterol ester，CE）水平均明显升高（P＜0.05）。血管软化丸能够无剂量依赖性地升高巨噬细胞pri-miR-467b mRNA表达水平和巨噬细胞内FC水平（P＜0.05），降低巨噬细胞中LPL mRNA及其蛋白表达水平以及TC、CE水平（P＜0.05）。血管软化丸能够升高主动脉pri-miR-467b mRNA表达水平（P＜0.05），降低主动脉中LPL mRNA及其蛋白表达水平以及血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、 MCP-1水平（P＜0.05）。结论 血管软化丸抑制动脉粥样硬化斑块形成的作用机制可能与调控miRNA-467b靶向LPL调控巨噬细胞，减少IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1等炎症因子分泌和巨噬细胞脂质蓄积相关。     

桃红四物汤保护2型糖尿病模型大鼠血管损伤的实验研究

目的 观察桃红四物汤对2型糖尿病模型大鼠胸主动脉的保护作用，并探究其作用机制。方法 采用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型，桃红四物汤连续干预模型大鼠8周，观察模型大鼠胸主动脉的病理学变化，Western blot法检测胸主动脉核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）蛋白表达，RT-qPCR技术检测单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein 1，MCP-1）和血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule 1，VCAM-1）mRNA表达，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）的含量。结果 桃红四物汤可显著改善模型大鼠胸主动脉损伤；显著抑制模型大鼠胸主动脉NF-κBp65蛋白和MCP-1、VCAM-1 mRNA的表达（P<0.05），显著降低血清TNF-α、TGF-β1的含量（P<0.05）。结论 桃红四物汤可有效保护模型大鼠胸主动脉病理损伤，其作用机制与干预NF-κB信号通路，抑制MCP-1、VCAM-1、TNF-α和TGF-β1表达有关。     

五味子乙素对脂多糖诱导的脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织病理损伤、炎症反应和核因子-κB表达的影响

目的 观察五味子乙素对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织病理损伤、炎症反应和核因子 -κB （nuclear factor kappa-B，NF-κB）表达的影响。方法 采用气管滴注40 mg/kg LPS制备大鼠急性肺损伤大鼠模型，手术前1 h腹腔注射80 mg/kg 五味子乙素进行干预治疗，测定大鼠肺湿/干质量比，BCA试剂盒测定大鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalceolar lavage fluid，BALF）总蛋白，牛鲍氏计数板计算 BALF中白细胞数，苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织损伤情况，ELISA法检测大鼠肺组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）含量，相关试剂盒检测大鼠肺组织中丙二醛（malondialdehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）含量，蛋白质印迹法检测大鼠肺组织中NF-κB p65、磷酸核因子- κB 抑制蛋白（phosphorylation inhibitor of nuclear factor kappa-B，pIκBα）和Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）的表达水平。结果 与模型组相比，五味子乙素组大鼠肺湿/干质量比、BALF中总蛋白含量及白细胞数均显著减少（P<0.05），病理损伤显著减轻，TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著减少（P<0.05），MDA含量显著下降，SOD活性显著升高（P<0.05），NF-κB p65、pIκBα和TLR4表达水平均显著下调（P<0.05）。结论 五味子乙素能够减轻LPS诱导的脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织的病理损伤，抑制炎症反应和氧化应激反应，抑制NF-κB通路激活。     

灸预处理对乙醇诱导胃黏膜损伤大鼠TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白的影响

目的 观察灸预处理对乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤的影响，探讨灸法对胃黏膜损伤“未病先防”的作用机制。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组和灸预处理组，每组10只，先对灸预处理组大鼠进行艾灸“足三里”“中脘”，再对模型组和灸预处理组大鼠进行乙醇灌胃制备胃黏膜损伤模型。比较各组大鼠胃黏膜溃疡指数（ulcer index,UI）和病理学变化，ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素-6 (interleukin- 6，IL-6)水平，免疫组织化学法和Western blot法检测胃黏膜组织Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）、核转录因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）p65蛋白表达水平。结果 模型组大鼠UI显著高于正常组，灸预处理组UI显著低于模型组（P＜0.05），模型组大鼠胃黏膜上皮结构破坏严重，有出血灶和炎症细胞浸润；灸预处理组大鼠胃黏膜病理损伤低于模型组；与正常组比较，模型组和灸预处理组大鼠血清TNF-α、IL-6水平均显著升高（P＜0.05），胃黏膜组织TLR4、MyD88表达水平均显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，灸预处理组各项指标均显著降低（P＜0.05）。结论 灸预处理对胃黏膜具有保护作用，其机制可能是通过调控TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平实现的。     

消炎祛痘方对痤疮丙酸杆菌诱导的炎症反应抑制作用研究

目的 观察消炎祛痘方对痤疮丙酸杆菌诱导的人急性单核细胞（THP-1细胞）分泌炎症因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白细胞介素-1α（interleukin-1 alpha，IL-1α）、白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）的影响，探讨其调控痤疮丙酸杆菌诱导的炎症反应机制。方法 采用细胞计数试验盒-8检测消炎祛痘方对THP-1细胞活力的影响；采用ELISA法观察消炎祛痘方对THP-1细胞上清中TNF-α、IL-1α、IL-8水平的影响；采用qRT-PCR和Western blot法分别检测Toll样受体2（Toll like receptor 2，TLR2）及核因子-κB p65（nuclear factor-kappa B p65，NF-κB p65）mRNA和蛋白的表达水平。结果 25 μg/mL消炎祛痘方对THP-1细胞活性无明显影响，12.5、25 μg/mL消炎祛痘方均能抑制痤疮丙酸杆菌诱导的TNF-α、IL-1α、IL-8表达水平，但25 μg/mL消炎祛痘方对3种细胞因子表达的抑制作用更强。12.5、25 μg/mL消炎祛痘方均能抑制TLR2 mRNA的表达，并且两组TLR2 mRNA表达水平的差异无统计学意义。消炎祛痘方能有效降低痤疮丙酸杆菌诱导的TLR2表达水平，25 μg/mL消炎祛痘方降低TLR2的作用更明显。25 μg/mL消炎祛痘方能显著抑制NF-κB p65的表达。结论 消炎祛痘方能抑制痤疮丙酸杆菌诱导的THP-1细胞分泌炎症因子，其机制可能与抑制TLR2/NF-κB信号通路有关。     

养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠肾小球足细胞TGF-β1、p27蛋白及其基因表达的影响

目的 从足细胞途径探讨养肝益水颗粒改善高血压肾损害的作用机制。方法 将64只自发性高血压大鼠随机分4组，每组16只，即养肝益水颗粒高、低剂量治疗组，贝那普利组，模型组，并选取16只WKY大鼠作为正常组。检测实验前后各组大鼠的血清肌酐（serum creatinine, SCr）、血尿素氮（blood urea nitrogen, BUN）水平；采用RT- qPCR检测大鼠肾皮质转化生长因子（transforming growth factor beta 1,TGF- β1)、p27 mRNA表达水平；Western blot检测大鼠肾皮质TGF- β1、p27蛋白表达变化。结果 治疗前后各组自发性高血压大鼠SCr、BUN水平显著高于正常组（P＜0.05）；治疗后，养肝益水颗粒高、低剂量组，西药组大鼠SCr、BUN水平均显著降低（P＜0.05），但3组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。模型组肾皮质p27蛋白、p27 mRNA及TGF- β1 mRNA、TGF- β1蛋白表达水平均明显高于正常组（P＜0.05）；治疗后，养肝益水颗粒高、低剂量组相比，高剂量组肾皮质p27蛋白及p27 mRNA表达水平均降低（P＜0.05）；肾皮质TGF- β1 mRNA、TGF- β1蛋白相对表达水平显著降低（P＜0.05）。结论 养肝益水颗粒通过下调TGF- β1、p27的表达，调节足细胞的增殖和凋亡，维持足细胞正常形态和结构，从而达到保护肾脏的目的。     

理筋手法对膝骨关节炎兔软骨Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨理筋手法对膝骨关节炎（knee osteoarthritis, KOA）兔软骨的保护机制。方法 将新西兰兔随机分为正常组、模型组及手法组，每组8只。采用关节腔内注射木瓜蛋白酶水溶液复制KOA模型。手法组每日采用理筋手法治疗，每次10 min，连续治疗21 d；正常组和模型组均不给予干预措施。采用ELISA法测定血清白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)水平；采用苏木精-伊红染色法观察膝关节软骨的组织形态；采用Western blot法和实时荧光定量PCR分别测定软骨组织中Wnt3α、β-catenin、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase 13，MMP-13)蛋白及其mRNA的表达水平。结果 与模型组比较，手法组软骨板厚度增加、软骨剥脱较少，细胞核变性更轻微。与正常组比较，模型组血清IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.05)；与模型组比较，手法组血清IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.05)。模型组软骨组织中Wnt3α、β-catenin、MMP-13蛋白及其mRNA表达水平均较正常组显著升高(P<0.05)，手法组软骨组织中Wnt3α、β-catenin、MMP-13蛋白及其mRNA表达水平均较模型组显著降低(P<0.05)。结论 理筋手法对KOA兔软骨的干预疗效显著，其作用机制可能与阻断Wnt/β-catenin信号通路的活化有关。     

基于网络药理和细胞实验探索芪玉三龙方治疗非小细胞肺癌的机制

目的 采用网络药理学和细胞实验探究芪玉三龙方治疗非小细胞肺癌的潜在作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台和中医药整合数据库检索芪玉三龙方成分筛选靶点，通过美国肿瘤基因组图谱数据库获得肺癌靶点基因。构建蛋白相互作用网络，并采用基因本体数据库和京都基因和基因组百科全书数据库进行富集分析。对核心靶蛋白与化合物进行分子对接分析，并以A549细胞进行实验验证。结果 芪玉三龙方对于非小细胞肺癌的潜在有效靶点162个，蛋白相互作用网络分析得到核心靶点基因20个，主要的生物学过程为对缺氧的反应、MAPK级联、炎症反应，主要的功能通路为钙信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路、细胞周期。分子对接结果表明，MMP9-槲皮素、PPARG-异鼠李素、PTGS2-刺芒柄花素、JUN-刺芒柄花素之间存在有效的结合亲和力。在A549细胞实验中，PCR和Western blot分析结果表明，芪玉三龙方含药血清能够促进PPAR-γ mRNA和蛋白表达（P＜0.05），抑制c-JUN、COX-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达（P＜0.05）。结论 芪玉三龙方通过影响A549肺癌细胞的凋亡、侵袭和肿瘤血管生成及炎症进程达到干预肺癌的作用。     

血管软化丸调控miR-17-5p与PCSK9/VLDLR信号通路抗动脉粥样硬化研究

目的 观察血管软化丸对miR-17-5p及其下游前蛋白转化酶枯草溶菌素（proprotein convertase subtillisin/kexin type 9,PCSK9）/极低密度脂蛋白受体（very low density lipoprotein receptor,VLDLR）信号通路的调控作用,揭示血管软化丸抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的作用机制。方法 细胞实验：通过加入氧化型低密度脂蛋白构建血管平滑肌细胞损伤模型。根据不同干预方法将细胞分为4组：模型组、miR-17-5p抑制剂组、血管软化丸高剂量含药血清组和低剂量含药血清组;干预后检测各组细胞活性以及细胞miR-17-5p、VLDLR和PCSK9 mRNA和蛋白表达水平。动物实验：根据不同干预方法将小鼠分为模型组、miR-17-5p抑制剂组、血管软化丸高剂量组和低剂量组;干预8周后检测小鼠外周血清中白细胞介素-6 （interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平和小鼠主动脉miR-17-5p、VLDLR和PCSK9表达水平,并观察各组小鼠病理学改变情况。结果 细胞实验：与模型组比较,miR-17-5p抑制剂组,血管软化丸高、低剂量含药血清组血管平滑肌细胞活性均明显升高（P<0.05）,血管平滑肌细胞的miR-17-5p和VLDLR mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,血管平滑肌细胞的PCSK9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。动物实验：与模型组比较,miR-17-5p抑制剂组和血管软化丸高、低剂量组外周血清中IL-6、TNF-α水平均明显降低（P<0.05）,血清中IL-10水平均明显升高（P<0.05）,主动脉miR-17-5p和VLDLR mRNA水平均明显降低（P<0.05）,PCSK9 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）;病理学观察发现模型组小鼠主动脉管径厚薄不均匀,内膜不光滑,管腔内可见明显AS斑块形成,斑块内可见浅染无定形物和钙化颗粒物,部分AS斑块截面积大于主动脉截面积。miR-17-5p抑制剂组和血管软化丸高、低剂量组AS病变程度明显较模型组减轻。     

电针心经对急性心肌缺血大鼠海马CA1区氧化应激及BDNF信号通路相关蛋白表达的影响

目的 观察电针心经“神门-通里”段对急性心肌缺血（acute myocardial ischemia，AMI）大鼠海马CA1区超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）、酪氨酸蛋白激酶B（tyrosine protein kinase，TrkB）、蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）、磷酸化Akt（phosphorylated Akt，p-Akt）等变化的影响，分析电针心经改善AMI引发海马神经细胞损伤的机制。方法 将大鼠按照随机数字表法分为伪手术组、模型组、电针组，每组10只。采用冠状动脉左前降支结扎法制备AMI大鼠模型，伪手术组仅穿线不结扎。电针组予以双侧“神门-通里”段电针治疗，电流强度1 mA，频率2 Hz，每次30 min，连续3 d，其余两组不予治疗。用PowerLab 16导生理记录仪采集心电图，并分析ST段电位；苏木精-伊红染色法观察大鼠心肌组织形态；采用ELISA法检测大鼠海马CA1区SOD、MDA含量；尼氏染色法观察大鼠海马CA1区病理形态变化；TUNEL染色法观察大鼠海马CA1区细胞凋亡率；Western blot法检测大鼠海马CA1区BDNF、TrkB、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果 与伪手术组比较，模型组大鼠心电图ST段明显抬高（P＜0.05）；心肌纤维肿胀断裂，间隙扩大；海马CA1区MDA水平增加（P＜0.05）、SOD水平减少（P＜0.05）；神经细胞数量减少，凋亡率增加（P＜0.05）；BDNF、TrkB蛋白表达水平及p-Akt/Akt均显著降低（P＜0.05）。与模型组比较，电针组大鼠心电图ST段明显降低（P＜0.05）；心肌纤维部分扭曲，排列较整齐，病理改变减轻；海马CA1区MDA含量减少（P＜0.05），SOD含量增加（P＜0.05）；神经细胞数量增加，凋亡率降低（P＜0.05）；BDNF、TrkB蛋白表达水平及p-Akt/Akt比值均显著升高（P＜0.05）。大鼠海马CA1区BDNF、TrkB及p-Akt/Akt水平与ST段电位存在显著负相关关系。结论 电针心经能有效改善AMI导致的海马神经细胞损伤，其作用可能与改善氧化应激，激活BDNF信号通路相关蛋白表达有关。     

益气活血通络方对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎性因子表达的影响

目的 研究益气活血通络方含药血清对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)炎性因子白细胞介素-1β（interleukin-1 beta, IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1）及金属基质蛋白酶-1（metal matrix proteinase-1, MMP-1）表达的影响，探讨益气活血通络方对脐静脉内皮细胞的保护作用。方法 选择SD大鼠30只，中药灌胃，制备含药血清。体外培养HUVECs，MTT法检测不同时间点、不同浓度葡萄糖对细胞存活率的影响；将HUVECs随机分为5组，即空白对照组，模型组，益气活血通络方低、中、高浓度组，高糖刺激后，分别加入不同浓度益气活血通络方含药血清干预，收集上清及细胞，ELISA法检测IL-6的表达，Western Blot法测定IL-1β、TNF-α、MCP-1及MMP-1蛋白的表达。结果 细胞培养48 h 后，33.3 mmol/L高糖组（模型组）细胞活力显著降低（P＜0.05）；高糖刺激可引起IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1及MMP-1蛋白的高表达(P＜0.05），益气活血通络方含药血清显著抑制IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1及MMP-1蛋白的高表达（P＜0.05)。结论 益气活血通络方可抑制炎性因子的高表达，对高糖损伤的HUVECs有一定的保护作用。     

当归补血汤调节自噬干预心肌梗死模型大鼠心肌损伤的作用机制

目的 观察当归补血汤对心肌梗死模型大鼠心肌损伤的影响并探究其作用机制。方法 将大鼠随机分为假手术组，模型组，当归补血汤低、高剂量组和地尔硫 组。连续给药7 d后结扎大鼠冠状动脉左前降支复制心肌梗死模型。缺血24 h后，采用TTC染色检测心肌梗死面积，苏木精-伊红染色检测心肌的组织形态，微板法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH)水平，ELISA法检测肌酸激酶心肌型同工酶(creatine kinase-myocardial band，CK-MB)水平，Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（phosphorylate phosphatidylinositol 3-kinase，p-PI3K），磷酸化蛋白激酶B（phosphorylate protein kinase B,p-AKT），磷酸化雷帕霉素靶蛋白（phosphorylate mammalian target of rapamycin,p-mTOR）及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1及p62蛋白的表达水平。结果 当归补血汤能明显减少心肌梗死面积（P＜0.05），降低血清CK-MB、LDH水平（P＜0.05），减轻心肌组织的病理损伤，对心肌梗死具有明显的保护作用；Western blot结果显示，当归补血汤能降低自噬通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT及p-mTOR的表达水平（P＜0.05），升高自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1的表达水平（P＜0.05），降低p62的表达水平（P＜0.05）。结论 当归补血汤可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路，激活自噬，改善心肌梗死模型大鼠的心肌损伤。     

高生物利用度姜黄素对肿瘤坏死因子-α致人脐静脉内皮细胞炎症损伤模型的保护作用

目的 观察纳米制姜黄素（PURCUMIN ）与普通姜黄素（Curcumin 95%）的体内药物代谢动力学特征及体外抗炎作用。方法 分别灌胃给予200 mg/kg的PURCUMIN 和Curcumin 95%,观察两者在SD大鼠体内的药物代谢动力学参数,并计算相对生物利用度以评价PURCUMIN 的制剂优势。利用肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）刺激人脐静脉内皮细胞,在体外模拟炎症诱导的内皮细胞损伤模型。以关键炎症因子水平、关键炎症因子的基因表达水平及核因子-κB抑制蛋白（inhibitor of nuclear factor-κB,IκB）/核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）信号通路中关键蛋白的表达水平,评价两种姜黄素制剂在不同给药浓度和不同作用时间下对内皮细胞的保护作用。结果 在相同给药剂量（200 mg/kg）下,PURCUMIN 相较于Curcumin 95%在大鼠体内的暴露量增加了17.5倍。姜黄素能有效抑制TNF-α刺激引起的内皮细胞炎症,且PURCUMIN 的抗炎效果更为显著。在相同干预时间下,低浓度（1 μmol/L）的PURCUMIN 即可显著降低细胞培养上清中前列腺素E2、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）的水平（P＜0.05）,抑制环氧合酶-2、MCP-1 mRNA表达（P＜0.05）,抑制IκB/NF-κB信号通路的激活（P＜0.05）,其药理作用与高浓度（10 μmol/L）Curcumin 95%相当;在相同干预浓度下,PURCUMIN 在2 h时即可显著降低上述炎症因子水平,抑制IκB/NF-κB信号通路激活（P＜0.05）,其药理作用与Curcumin 95%干预4 h时相当。结论 PURCUMIN 在较低浓度、较短时间即可发挥较好的抗炎作用,这可能与其显著提升的生物利用度有关。     

补肺活血胶囊对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道重塑的干预作用及机制研究

目的 基于转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）/Smads信号通路及蛋白酶与抗蛋白酶系统，探讨补肺活血胶囊对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease, COPD）模型大鼠气道重塑的作用机制。方法 将40只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、补肺活血组和茶碱组。采用香烟烟雾暴露复合气道内滴注脂多糖的方法复制COPD动物模型；实验自第21天起，补肺活血组予补肺活血胶囊0.42 g/kg，茶碱组予茶碱缓释片0.02 g/kg，连续给药40 d。实验第61天取血后处死大鼠，取肺组织制作病理切片观察其病理学改变及气道胶原沉积情况，检测肺组织TGF-β1、Smad2/3、Smad4、Smad7蛋白和嗜中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophil elastase ，NE）、α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1-AT）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase 9, MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinases 1，TIMP-1）的表达水平。结果 与正常对照组比较，模型组大鼠气道上皮增厚，炎症细胞浸润，细胞外基质沉积，基底膜增厚，肺泡结构破坏，肺泡融合，肺泡间隔增厚，胶原纤维沉积明显；肺组织TGF-β1、Smad2/3、Smad4、NE、α1-AT、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平升高（P＜0.05），Smad7表达水平降低（P＜0.05）。与模型组比较，补肺活血组与茶碱组炎症细胞浸润减轻，胶原纤维沉积显著减少；肺组织TGF-β1、Smad2/3、Smad4、NE、α1-AT、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平降低（P＜0.05），Smad7表达水平升高（P＜0.05）。与茶碱组比较，补肺活血组各指标均未见显著差异（P＞0.05）。结论 补肺活血胶囊可以通过调节TGF-β1/Smads信号通路、蛋白酶与抗蛋白酶平衡干预COPD模型大鼠气道重塑。