涉及新型合成大麻素ADB-BUTINACA的疑似性侵案1例

正近年来,新型合成大麻素已成为毒品检测报告中最常见的新精神活性物质之一[1],有研究表明其毒性远大于四氢大麻酚,滥用会导致心肌梗死、中风、急性肾损伤、癫痫及各种并发症[2-5],生产者和使用者为了回避法律管控是合成大麻素种类不断出新的重要原因[6, 7]。本案例中检出的合成大麻素N-(1-氨甲酰基-2,2-二甲基丙基)-1-丁基吲唑-3-甲酰胺(ADB-BUTINACA)是一种大麻受体的完全激动剂,     

合成大麻素构效关系与新结构预测

本文介绍了合成大麻素化学结构的规律性,针对已经管控的合成大麻素进行了构效关系的研究,并在此基础上预测了可能出现的新结构类型。同时,介绍了两个合成大麻素鉴定的案例分析。     

合成大麻素类新精神活性物质的代谢物鉴定研究进展

合成大麻素类是目前涵盖物质种类最多、滥用最为严重的一类新精神活性物质,代谢物鉴定研究可以为合成大麻素滥用监测提供基础数据,是目前的研究热点。合成大麻素结构修饰的主要趋势是戊基吲哚或吲唑环戊基末端上的氟原子取代为氢原子,这大大提高了化合物的生物活性,涉及的主要代谢反应包括羟基化、氧化脱氟、酰胺水解、酯水解。液相色谱-高分辨质谱已成为代谢物结构鉴定的首选方法。本文基于合成大麻素的结构和分类,着重对代谢软件预测以及人肝细胞模型、人肝微粒体模型、大鼠体内模型、斑马鱼模型和真菌秀丽线虫模型在代谢物鉴定方面的研究进展进行综述。     

可疑植物制品中合成大麻素5F-EDMB-PICA的鉴定

目的探讨无对照品时可疑植物制品中未知合成大麻素的定性分析策略。方法采用甲醇对植物制品中的合成大麻素进行提取,提取液经旋转蒸发仪浓缩后采用制备液相分离、纯化,得到高纯度合成大麻素制备样品,综合利用气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)、超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight massspectrometry,UPLC-QTOF-MS)、核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)对制备化合物进行结构解析。结果采用制备液相得到10 mg高纯度未知样品,采用GC-MS、UPLC-QTOF-MS和NMR进行分析,通过谱图解析,最终确定未知合成大麻素为2-[1-(5-氟戊基)-1H-吲哚-3-甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酸乙酯,简称5F-EDMB-PICA。结论本研究建立了采用制备液相从低含量植物制品中提取未知合成大麻素的方法,并综合利用GC-MS、UPLC-QTOF-MS、NMR实现了对未知物结构的解析,这些信息将有助于法庭科学实验室在鉴定实践中鉴定该物质或其他具有类似结构的化合物。     

合成大麻素检验方法研究进展

近年合成大麻素类物质(synthetic cannabinoids,SCs)的危害及滥用引起社会广泛关注,它们不仅具有类似天然大麻的致幻性,还有更强的副作用,包括潜在的神经精神毒性,严重影响人类身心健康。因此,国内外研究人员对合成大麻素及其代谢物的检验方法进行了相关研究。本文主要介绍了SCs的生理药理作用、主要分类等,对其检验方法研究进展进行了综述与展望,探讨了各检验方法的应用范围与选择依据,以期为SCs相关案件的检验鉴定提供参考。     

合成大麻素类物质合成方法和制毒物品分析

合成大麻素是数量最多，化学结构多样的一大类新精神活性物质。本文综述了合成大麻素类物质的化学结构和合成方法，分析了合成大麻素类物质相关制毒物品并提出了管控对策，以期从源头上降低合成大麻素类物质的危害。     

可疑电子烟油中5种吲哚或吲唑酰胺类合成大麻素的GC-MS定性和定量分析

目的 建立可疑电子烟油样品中合成大麻素及其主要基质、添加物的GC-MS定性定量分析方法。方法 电子烟油样品用甲醇稀释后进行GC-MS分析,以特征碎片离子和保留时间对电子烟油中的合成大麻素及其主要基质、添加物进行定性分析,在选择离子监测模式下对合成大麻素进行定量分析。结果GC-MS定量方法中各化合物的线性范围为0.025～1 mg/mL,基质加标回收率为94%～103%,日内精密度相对标准偏差小于2.5%,日间精密度相对标准偏差小于4.0%。在25份电子烟油样品中检出了5种吲哚或吲唑酰胺类合成大麻素类物质。电子烟油的基质主要为丙二醇、丙三醇,部分样品中还检出了N,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、三乙酸甘油酯和尼古丁等添加物。25份电子烟油样品中合成大麻素的含量范围为0.05%～2.74%。结论 所建立的电子烟油样品中合成大麻素、基质、添加物的GC-MS方法选择性好、分离度高、检出限低,可用于多组分同时定性和定量分析;所探讨的吲哚或吲唑酰胺类化合物的电子轰击离子源碎片离子碎裂机制有助于鉴定该类物质或其他具有类似结构的化合物。     

全血中4种新型合成大麻素的快速检测

目的建立准确、快速的方法鉴定血液中4种新型合成大麻素(JWH-203、JWH-122、5F-APINACA和AB-CHMINACA)。方法全血样品经乙腈-甲醇提取后,经气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)进行筛选,采用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行确认,采用多反应监测模式进行定量分析。结果 GC-MS法于21 min完成分析,LCMS/MS法于5 min完成分析,AB-CHMINACA、JWH-203、5F-APINACA和JWH-122均采用准分子离子峰作为母离子,定量离子对分别为m/z 357.4→312.2、m/z 340.2→125.0、m/z 384.1→135.1、m/z 356.4→169.2。血液中4种合成大麻素在1～250 ng/mL质量浓度范围内线性良好(r0.99),检出限为0.1～0.5 ng/mL,提取回收率为85.4%～95.2%,精密度小于10.0%,基质效应为80.3%～92.8%。结论本研究得到了4种合成大麻素的GC-MS和LC-MS/MS色谱行为和质谱解析信息,初步讨论了色谱行为差异的可能原因,对判断合成大麻素的发展趋势有提示作用。本方法适用于血液中4种合成大麻素的快速检测,在目前新型合成大麻素滥用激增的情况下,可为此类物质的鉴定提供参考。     

疑似毒品烟丝和烟油中检出新型合成大麻素ADB-BUTINACA

正近几年,新型合成大麻素类毒品在我国广泛传播,目前相关文献已经报道了ADB-FUBINACA、5F-MDMB-PICA、AMB-FUBINACA等诸多新型合成大麻素类毒品案件~([1-4])。截止2021年4月15日,Cayman上已列出合成大麻素类化合物794种,远超芬太尼类毒品的398种。本文利用GC/MS和LC/MS/MS在山东省缴获的疑似毒品烟叶和陕西省缴获的烟油中同时检出一种新型合成大麻素:ADB-BUTINACA。我国已经列管了53种合成大麻素~([5]),     

气相色谱-质谱联用法同时测定8种合成大麻素

目的采用气相色谱质谱联用(GC/MS)法检测8种合成大麻素,并对方法进行评价。方法甲醇提取及超声处理样本后,采用GC/MS法检测JWH-203、JWH-250、RCS-4、JWH-018、JWH-019、JWH-122、AM-2201和JWH-210等8种合成大麻素,并对色谱柱、初始温度、升温速率等条件进行了优化。结果使用中等极性的DB-17MS色谱柱(30m×0.32mm×0.25μm),采用起始温度200℃,以20℃/min速率升温至280℃,以10℃/min速率升温至300℃的条件进行检测。8种合成大麻素能够很好的分离,检测限达到20μg/m L;应用该方法对未知样品进行了检测,并对各类合成大麻可能的质谱碎裂途径进行分析。结论本文方法具有分析简便、快速、灵敏的特点,可以用于实际案件的检测。     

小鼠皮肤切创愈合过程中M_3型乙酰胆碱受体的表达

目的 探讨小鼠皮肤切创愈合过程中损伤区M3受体的表达及其随时间的变化规律.方法 应用免疫组织化学染色和Western印迹技术检测小鼠皮肤切创后不同时间段M3受体的变化情况.结果 正常皮肤组织的表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺、皮肌层等均表达M3受体.伤后6～12h,损伤区M3受体阳性细胞以多形核粒细胞为主;1～3d,M3受体阳性细胞以单个核细胞和成纤维细胞为主;5～14d,M3受体阳性细胞主要为成纤维细胞.阳性细胞率在伤后6～12h逐渐增高,12h达高峰,1～5d略有下降,但保持较高水平,7d阳性细胞率再次达到峰值,随后逐渐降低.通过Westem印迹法检测显示,各个时间段均有M3受体阳性条带,其中12h和7d为M3受体两个表达高峰.结论 多形核粒细胞、单个核细胞和成纤维细胞均表达M3受体,提示其可能在皮肤切创愈合过程中起重要的作用;M3受体表达的规律性变化可用于损伤时间的推断.     

Forensic Potential of MMPs and CC Chemokines for Wound Age Determination

In this study, we investigated time-dependent expression of matrix metalloproteases (MMP)-2, MMP-9, chemokine CC motif ligand (CCL)-2, CCL-3, CCL-5, IL-1β, IL-6, and TNF-α mRNA at the skin injury site and sought their forensic potentials during the skin wound repair process. The tested wound ages in 42 mouse skin wounds were distributed at 0d, 1d, 3d, 5d, 7d, 10d, and 14d, respectively and then followed by real-time polymerase chain reaction. Ultimately, MMP-2 played an important role in the inflammation phase. On the contrary, MMP-9 became involved at a later phase during wound healing. Meanwhile, CCL-2 and CCL-3 were active throughout almost all of the process. However, CCL-5 mRNA had no significance. Collectively, an MMP-9/MMP-2 ratio of over 0.84 indicated that skin wound healing age was strongly 5 days or less. So elevated gene expressions of cytokines and chemokines in different phases of wound ages implied that combined exploration could make wound age determination more accurate and objective.     

皮肤损伤愈合中NOS的表达及NO的作用

皮肤损伤愈合是机体保持组织完整性的一个有组织的过程,需要炎症细胞、生物化学介质之间的复杂作用。一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)是皮肤组织损伤愈合过程中的一个重要因子,合成一氧化氮(nitricoxide),生成的一氧化氮参与损伤愈合的全过程,在炎症介导,细胞的增殖、分化和凋亡及血管形成、基质沉积和损伤后组织重构中均发挥重要作用,而且在某些皮肤疾病中,NO也具有重要作用。本文针对近年来NOS在损伤愈合过程中的研究进展,综述了在皮肤损伤愈合过程中NOS的表达和NO的作用,认为NOS是皮肤损伤愈合机制的一个重要方面,具有深入研究的必要。     

Caspase与皮肤损伤

Caspase家族,目前已知至少由14个成员组成,该家族成员在细胞凋亡过程中发挥着重要作用。实验研究表明,在皮肤损伤及愈合过程中,伴随着Caspase的活化和表达,这可能与Caspase诱导细胞凋亡的发生有关。深入研究Caspase在皮肤损伤及愈合过程中的作用机制,有望为皮肤损伤的治疗和法医学损伤时间的推断提供新的方法。本文综述了Caspase家族的生物学特性以及Caspase在皮肤损伤及愈合过程中的研究进展,认为Caspase在皮肤损伤及愈合过程中发挥重要作用,具有深入研究的必要。     

皮肤烧伤愈合过程中磷酸化JNK的变化

目的观察烧伤后人皮肤磷酸化JNK（p-JNK）的变化特点,初步探讨烧伤后创面愈合的分子机制。方法取12例烧伤后住院植皮患者的烧伤周边区皮肤为烧伤周边皮肤组;另取正常皮肤12例为正常皮肤组。应用免疫组织化学方法和常规HE染色检测p-JNK在皮肤烧伤周边区和正常皮肤组织中的变化情况。结果正常皮肤组织中表皮基底层细胞的胞浆和胞核内有p-JNK阳性着色,阳性细胞率为（8.8±1.3）%。在烧伤周边皮肤组中,p-JNK阳性着色主要定位于表皮细胞和部分炎症细胞中,阳性细胞率上升至（31.2±3.3）%,明显高于正常皮肤组织（P〈0.01）。结论烧伤后人皮肤p-JNK的变化可能与创面愈合有关。     

人皮肤成纤维细胞早期损伤后EDA-FN表达与损伤时间的关系

目的探讨培养的人体皮肤成纤维细胞损伤后纤维连接蛋白EDA片段的表达情况与损伤时间的关系。方法培养人体皮肤成纤维细胞,利用单克隆抗体进行免疫组织化学染色及Western检测。结果培养中的人体成纤维细胞可以微量表达EDA,随损伤时间延长而表达量增加。结论EDA片段表达变化可以作为法医学早期损伤时间推断的比较理想的指标。     

小鼠皮肤切创愈合过程中caspase-3的表达及其活性

目的探讨皮肤切创愈合过程caspase-3的表达、激活情况及其活性的变化规律。方法建立小鼠皮肤切创模型后,应用比色法、Western blotting技术对小鼠皮肤切创愈合过程中不同时间段caspase-3的表达、激活情况及其活性进行研究。结果伤后不同时间的caspase-3活性倍增值、caspase-3酶原表达呈现时间规律性变化,并可见caspase-3的激活片段。结论caspase-3可能在皮肤损伤愈合过程中细胞的凋亡中发挥作用,caspase-3可以成为用于皮肤损伤时间推断的指标。     

IL-33在小鼠皮肤创伤后损伤时间推断中的作用

目的通过观察白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)在皮肤创伤后的时序性变化规律,探讨IL-33在法医学实践中用于损伤时间推断的应用价值。方法利用直径为5mm的圆形锉刀在小鼠背部建造皮肤损伤模型,于伤后1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d、10d取损伤处组织,对照组在与创伤组小鼠相同部位取同等大小的皮肤样本。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察皮肤创伤后愈合过程中的形态学变化,通过Western印迹法、免疫组织化学染色和双重免疫荧光染色法检测皮肤创伤样本IL-33的表达变化。结果Western印迹法结果显示,伤后3h,IL-33蛋白表达稍有下降,6h后IL-33蛋白表达逐渐增加,于伤后3d达峰值,随后逐渐减少。免疫组织化学染色结果显示,在对照组皮肤的表皮、毛囊、皮脂腺及真皮中固有细胞有少量IL-33阳性表达,伤后3h,IL-33阳性细胞率开始增加,伤后3d达到峰值,随后逐渐减少。双重免疫荧光染色结果显示,伤后1~3d,IL-33阳性表达细胞主要为巨噬细胞,伤后5~7d,IL-33阳性表达细胞主要为肌成纤维细胞。HE染色结果显示该皮肤损伤模型创口愈合过程符合炎症的病理学发展规律。结论IL-33有望成为法医学推断皮肤损伤时间的参考指标。     

小鼠皮肤切创愈合过程中iNOS和eNOS表达的免疫组织化学研究

目的观察小鼠皮肤切创愈合过程中,iNOS和eNOS在损伤区及损伤周边区内的表达及其变化规律。方法小鼠背部制作全层切创,应用免疫组织化学技术观察伤后切创组织中iNOS和eNOS的表达,并和无切创的小鼠作为对照。结果损伤区及损伤周边区细胞,伤后3h的损伤皮肤组织中可见少量的多型核细胞表达iNOS和eNOS,伤后6～24h,大部分浸润的中性粒细胞和单核细胞为iNOS和eNOS阳性。随着时间的延长,iNOS和eNOS阳性细胞以单核细胞和成纤维细胞为主。伤后3hiNOS的阳性细胞比率较低,6h～1d持续性增加并于1d达到最高峰,3～7d维持在一个相对稳定的水平直至伤后10d再次达高峰,10～14d开始下降。eNOS的阳性细胞率在伤后1～3h表达较低,6h～3d持续性增高,并在3d达到最高峰,在其后的5d内保持稳定表达,之后开始下降。而且损伤区及损伤周边区、特别是肉芽组织内的新生血管可见iNOS和eNOS不同强度的表达。结论小鼠皮肤切创愈合过程中,iNOS和eNOS在损伤周边区内多型核细胞、单核细胞和成纤维细胞中表达,其时序性变化可望用于皮肤损伤时间的推断。     

小鼠皮肤切创愈合过程中α7nAChR表达与损伤时间关系

目的检测皮肤切创愈合过程中α7nAChR的表达及其时间规律性变化。方法建立小鼠皮肤切创模型,应用免疫组织化学技术及Western blot方法检测切创后不同时间段皮肤中α7nAChR的表达。结果免疫组织化学结果显示,对照组α7nAChR表达于表皮、毛囊、皮脂腺、血管内皮及真皮中少数的成纤维细胞;伤后6～12h切创皮肤损伤区及周边区可见少量多核粒细胞和单核细胞表达α7nAChR,1～3d以单核细胞阳性表达为主,5～14d以成纤维细胞为主。α7nAChR阳性细胞率于伤后1d开始升高,伤后7d达最高峰,随后逐渐下降。经Western blot检测显示,对照组及各实验组均有α7nAChR阳性条带,其中伤后7d为α7nAChR表达高峰。结论α7nAChR在小鼠皮肤切创愈合过程中呈现一定的时序性变化。