实验性病毒性心肌炎纤维连接蛋白的免疫组化研究

探索轻度病毒性心肌炎的法医病理学诊断方法。以适量coxsackieB3病毒感染Balb/c小鼠 ,造成小鼠轻度病毒性心肌炎 ,对病鼠的心肌进行纤维连接蛋白的LSAB免疫组化染色。结果发现 ,心肌炎鼠心肌组织内Fn大量沉积 ,部分心肌细胞内Fn阳性。Fn -LSAB染色可显示病毒性心肌炎轻度的心肌损害 ,Fn沉积是心肌组织存在炎症性病理变化的可靠标志之一。     

病毒性心肌炎心肌碱性成纤维生长因子的实验研究

用 8只小鼠接种柯萨奇 B3病毒（ Coxsackie B3 viral CVB3）,形成病毒性心肌炎动物模型。用免疫组织化学方法对心肌碱性成纤维生长因子（ basic Fibroblast Growth Factor:bFGF）的变化进行了研究。目的是观察 CVB3对心肌的损害。结果发现小鼠感染病毒第 3天病变心肌中即有 bFGF阳性表达,并且随病程的延长其阳性程度随之增加。常规 HE染色通常在感染病毒 5天后才出现明显的镜下改变。本研究提示 bFGF可以为病毒性心肌炎早期轻微病变的判定提供帮助。     

Fn免疫组化染色在人病毒性心肌炎死后诊断中的应用

目的研究纤维连接蛋白(Fn)免疫组化染色对轻度病毒性心肌炎的病理学诊断价值。方法运用兔抗人Fn多克隆抗体对人类心肌炎心肌标本进行Fn-LSAB免疫组化研究。结果发现心肌炎心肌组织内Fn大量沉积,部分心肌细胞内Fn阳性。结论Fn-LSAB染色可显示轻度病毒性心肌炎的心肌损害,Fn沉积是心肌组织存在炎症性病理变化的可靠标志之一。     

病毒性心肌炎肌动蛋白的免疫组化观察

对１０例尸检心脏标本进行了肌动蛋白（Ａｃｔｉｎ,Ａｔ）的免疫组化观察。依据Ｄａｌｓ标准的明确或界限性病毒性心肌炎５例,心肌组织内Ａｔ含量减损,呈局灶性或弥漫性淡染,偶见小灶性单个心肌细胞内Ａｔ缺失。心肌梗死２例,心肌组织内Ａｔ大片缺失;非心性死亡对照组３例,心肌组织内Ａｔ呈均匀一致的强阳性染色。结果表明,心肌组织内Ａｔ的免疫组化观察可望提高对不典型病毒性心肌炎诊断的敏感性,同时对区分轻度缺血性与炎症性心肌细胞损伤有参考价值     

病毒性心肌炎猝死心肌MMP-9和TGF-β1表达与心肌纤维化的关系

目的研究病毒性心肌炎心肌MMP-9、TGF-β1表达与心肌纤维化的关系,探讨其在病毒性心肌炎猝死鉴定中的作用。方法筛选30例病毒性心肌炎作为实验组（18例为明确性心肌炎组,12例为界限性心肌炎组）,另选10例非病毒性心肌炎作为对照组。Masson染色观察病毒性心肌炎心肌胶原增生的情况;免疫组化法检测MMP-9、TGF-β1的蛋白表达和组织定位,并用图像分析系统及统计学方法进行定量分析。结果病毒性心肌炎组心肌胶原纤维较对照组明显增多;MMP-9、TGF-β1的表达水平明显增高,MMP-9、TGF-β1的表达与心肌胶原纤维增生呈正相关。结论MMP-9、TGF-β1可能在病毒性心肌炎心肌纤维化过程中起重要作用,可以作为病毒性心肌炎猝死的辅助诊断的指标。     

CAR在病毒性心肌炎和扩张型心肌病心肌中的表达

目的探讨病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)和扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)的发病机制及相互关系,从而提高心源性猝死法医学鉴定的可靠性和准确性。方法对VMC组22例、DCM组20例和对照组16例的心肌组织中柯萨奇-腺病毒受体(coxsackie-adenovirus receptor,CAR)的表达进行改良的免疫组织化学研究。结果 VMC组和DCM组心肌组织细胞膜呈现深棕黄色阳性颗粒,有较高水平的CAR表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),对照组染色阴性。结论 VMC和DCM组心肌中CAR的高表达,提示VMC和DCM的发病机制可能与病毒感染有关,病毒感染并破坏心肌细胞导致心肌细胞坏死,心功能受损,使VMC进展为DCM。     

病毒性心肌炎和扩张性心肌病中Dystrophin蛋白的表达

目的探讨病毒性心肌炎和扩张性心肌病的发病机制及相互关系,从而提高心性猝死法医学鉴定的可靠性和准确性。方法对17例对照(包括正常心脏、冠心病、高血压性心脏病等),25例病毒性心肌炎和28例扩张性心肌病的心肌组织进行改良的病理学dystrophin免疫组织化学研究。结果dystrophin蛋白在对照组,病毒性心肌炎组和扩张性心肌病组中阳性表达率分别为100%,88%,57%,三组表达差异有显著性(P<0.05),且在病毒性心肌炎和扩张性心肌病组间表达有显著差异(P<0.05),经Spearman等级相关分析呈显著负相关(r=-0.526)。结论病毒性心肌炎和扩张性心肌病心肌中细胞骨架蛋白均有破坏,且随着由病毒性心肌炎进展为扩张性心肌病,dystrophin蛋白表达逐渐降低,说明在病毒性心肌炎和扩张性心肌病的发病机制中可能与dystrophin的被破坏有关,病毒感染并破坏心肌细胞骨架蛋白并最终导致心肌细胞坏死,心功能受损,从而使病毒性心肌炎进展为扩张性心肌病。     

柯萨奇病毒和腺病毒受体在VMC和DCM猝死者心肌组织中的表达

目的探讨病毒性心肌炎(VMC)和扩张性心肌病(DCM)的发病机制及相互关系。方法应用改良免疫组化技术检测病毒性心肌炎(28例)、扩张性心肌病(31例)和对照组19例。结果CAR阳性表达为棕色,主要表达于心肌细胞膜。在VMC心肌中均检测到较高水平的CAR表达(免疫组化面积积分为4.3975±0.0365);DCM组26例心肌组织中有较高水平的CAR表达(4.2064±0.0526),有5例几乎无表达(0.0723±0.0014),对照组心肌中几乎未检测到CAR的表达(0.0731±0.0362),VMC组及DCM组与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论VMC和DCM心肌组织中CAR表达明显高于对照组,提示VMC和DCM的发病都有病毒感染的参与,两者可能来自同一个病因。     

Influenza A virus infection complicated by fatal myocarditis

Influenza virus typically causes a febrile respiratory illness, but it can present with a variety of other clinical manifestations. We report a fatal case of myocarditis associated with influenza A infection. A previously healthy 11-year-old girl had malaise and fever for approximately 1 week before a sudden, witnessed fatal collapse at home. Autopsy revealed a pericardial effusion, a mixed lymphocytic and neutrophilic myocarditis, a mild lymphocytic interstitial pneumonia, focal bronchial/bronchiolar mucosal necrosis, and histologic changes consistent with asthma. Infection with influenza A (H3N2) was confirmed by virus isolation from a postmortem nasopharyngeal swab. Attempts to isolate virus from heart and lung tissue were unsuccessful. Immunohistochemical tests directed against influenza A antigens and in situ hybridization for influenza A genetic material demonstrated positive staining in bronchial epithelial cells, whereas heart sections were negative. Sudden death is a rare complication of influenza and may be caused by myocarditis. Forensic pathologists should be aware that postmortem nasopharyngeal swabs for viral culture and immunohistochemical or in situ hybridization procedures on lung tissue might be necessary to achieve a diagnosis. Because neither culturable virus nor influenza viral antigen could be identified in heart tissue, the pathogenesis of influenza myocarditis in this case is unlikely to be the result of direct infection of myocardium by the virus. The risk factors for developing myocarditis during an influenza infection are unknown.     

早期心肌缺血猝死心肌Ⅰ型胶原的表达

目的探讨Ⅰ型胶原蛋白在心肌早期缺血死后诊断中的法医学价值。方法将收集的案例心肌蜡块分为3组：正常对照组、早期心肌缺血组、心肌梗死组,用免疫组织化学技术（S-P法）,观察猝死心肌内Ⅰ型胶原的表达情况,对其结果进行半定量分析。结果早期心肌缺血组和心肌梗死组心肌细胞质以及细胞核染色阳性,且早期心肌缺血组与心肌梗死组表达强度相近,说明早期心肌缺血组在胶原网结构方面已经发生与心肌梗死相同的改变。结论Ⅰ型胶原可以作为早期心肌缺血的一个诊断指标。     

人体冠心病心肌组织cTnI免疫组织化学研究

目的 研究cTnI免疫组织化学法诊断人体急性心肌梗死的法医病理学意义.方法 应用免疫组织化学法检测人体冠心病心肌组织cTnI的变化,进行图像分析,与HE染色法进行比较.结果 人体冠心病心肌组织急性心肌梗死区域心肌细胞内cTnI免疫组化染色缺染、分布失规律性;梗死修复区域纤维间质cTnI免疫组化染色弱阳性:陈旧性心肌梗死瘢痕区域纤维间质cTnI免疫组化染色阴性.失血性休克组近心内膜心肌细胞内cTnI免疫组化染色轻度增强,并见点灶状心肌细胞内cTnI免疫组化染色缺染.结论 cTnI免疫组织化学检测可以应用于人体急性心肌梗死的诊断.     

病毒性心肌炎和扩张型心肌病心肌Fas蛋白表达

目的探讨病毒性心肌炎（viral myoearditis，VMC）和扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）的发病机制及相互关系。方法应用改良的免疫组织化学技术观察VMC、DCM和对照组（各20例）心肌Fas蛋白的表达，并对其阳性反应结果进行Ridit检验。结果与对照组相比，VMC和DCM组Fas蛋白阳性表达明显升高，经Ridit检验，3组阳性结果差异有统计学意义（P〈O．005）；进一步采用两两比较Ridit检验，对照组和其他两组之间差异有统计学意义（P〈O．05），而VMC和DCM组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论VMC和DCM心肌组织中Fas蛋白表达明显高于对照组，提示VMC和DCM的发病都有细胞凋亡的参与：凋亡可能是VMC引起心肌损伤及演变为心肌病的一个发病机制。     

病毒性心肌炎猝死心肌MCP-1表达及其法医学意义

目的探讨单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）在病毒性心肌炎（viral myocarditis,VMC）所致猝死者心肌组织中的表达及其意义。方法运用改良的免疫组织化学方法,观察VMC猝死组和对照组心肌组织中MCP-1的表达情况,应用统计学处理,比较两组间的表达差异。结果20例VMC猝死组中有17例MCP-1染色阳性;而20例非VMC猝死对照组仅4例局部散在MCP-1弱阳性表达,其余均阴性。VMC组MCP-1阳性表达率明显高于对照组（P〈0.01）。结论MCP-1的免疫组织化学检测可作为法医病理学诊断VMC所致猝死较为客观的病理形态学指标之一。     

鼠窒息后缺氧诱导因子1-α在心、肺中的表达

目的研究大鼠机械性窒息死亡后缺氧诱导因子1-α(HIF1-α)在心、肺中的表达变化,探讨其作为窒息死亡诊断指标的可行性。方法制作大鼠缢死模型,分别于窒息死后及正常断颈处死后0、2、6、24h时间段取材,用免疫组织化学、RT-PCR方法测定缢死后HIF1-α在心肌和肺组织中的分布和表达变化。结果HIF1-α在窒息组的心肌和肺组织中表达,窒息组和对照组在各时间段表现出明显差异,对照组仅在死后2、6、24h阳性表达。窒息死亡组可见核阳性表达,而对照组未见核阳性表达。半定量RT-PCR结果显示HIF1-α在0h时各组未见升高,但在2、6、24h窒息组则较对照组升高。结论心和肺组织HIF1-α表达核阳性细胞的出现,可以作为窒息死亡的特征性表现。     

猪高脂血症心肌组织内皮素-1的表达

目的 探讨高脂血症对心肌组织内皮素-1(ET-1)表达的影响。方法 12头猪等分为高脂血症组与正常对照组，复制高脂血症动物模型后，用免疫组化3P法观察心肌组织内ET-1的表达情况，并用图像分析系统进行图像分析。结果 高脂血症组ET-1的表达明显高于正常对照组，差异显著(P＜0.001)。结论 高血脂容易诱导心肌组织ET-1的表达。     

心肌炎猝死者心、脾中柯萨奇 B3病毒基因的检测

目的检测病毒性心肌炎（ viral myocarditis,VMC）猝死者心、脾组织柯萨奇 B3病毒 (CVB3)基因,探索 VMC的病原学诊断方法。方法运用原位逆转录 PCR技术检测实验组（ VMC猝死, 8例）及对照组（非心性死亡, 4例）心、脾组织中的 CVB3基因。结果实验组中, 3例（第 1, 4, 7例）心肌 CVB3基因阳性, 4例（第 2, 4 , 6, 7例）脾组织 CVB3基因阳性;对照组心、脾 CVB3基因均为阴性。结论心、脾组织中 CVB3基因联合阳性可能是 VMC的重要特征;联合检测心、脾中 CVB3基因可提高 VMC的病原学诊断率。     

Fatal parvovirus B19 myocarditis in an 8-year-old boy

A report is given on an 8-year-old boy who suddenly and unexpected died. Autopsy findings point to acute heart failure. Microscopic examination of the heart showed increased interstitial and perivasal fibrosis and myocarditis with macrophage infiltration. Polymerase chain reaction (PCR) analysis for parvovirus B19 was positive in heart samples and in the spleen. Immunostaining for parvoviral surface antigens was negative. Although the virus does not appear to have infected the cardiomyocytes, we speculate that myocarditis arose from immunological cross-reaction to epitopes shared between the virus and the myocardium.     

VEGF在家兔缺血心肌中的表达及其死后稳定性研究

目的观察心肌中VEGF在死后一定时间的稳定性及表达的变化规律，评价其对死后诊断机体早期心肌缺血的作用。方法用冠状动脉结扎法建立家兔急性心肌缺血模型，应用SP法染色、图像分析和统计学处理系统，检测缺血心肌细胞内VEGF阳性表达面积和强度，并对VEGF在死后不同时间的稳定性进行比较。结果VEGF在缺血心肌组织中，见灶性或成片心肌细胞强阳性表达，部分细胞呈阴性或弱阳性表达，血管内皮及平滑肌细胞表达弱阳性，间质表达阴性；在4℃放置，随时间延长，缺血心肌组织VEGF阳性表达有减弱趋势，至10d时缺血心肌组织仍可见VEGF在少许心肌细胞胞浆内呈弱阳性表达。在4℃放置10d以内，缺血心肌和正常心肌标本之间VEGF阳性表达具有极显著性差异。结论VEGF能耐受一定程度自溶及腐败的影响，其免疫组化检测对于判断死后4℃放置10d以内的尸体是否出现过心肌缺血具有一定意义。