布鲁氏菌S19号菌苗免疫幼龄牦牛的免疫效果观察

布鲁氏菌Ｓ19号菌苗是一种对牛布鲁氏菌病具有良好免疫效果的生物制剂。鉴于其对成年牛免疫后抗体存留时间长而影响布鲁氏菌病的常规监测 ,故许多国家和地区主要用于幼龄牛 ,并且只用 1次即可获得终生免疫保护力。但截止目前尚未见对4— 8月龄牦牛免疫效果的报道。为了在我省牦牛集中产区推广应用布鲁氏菌Ｓ19号菌苗 ,以控制部分县布鲁氏菌病回升的趋势 ,我们于 1997— 2 0 0 0年在甘肃省张掖地区和甘南藏族自治州的 6个牧业县进行了该菌苗的免疫试验和推广应用。1　材料与方法1.1　布鲁氏菌Ｓ19号菌苗　由新疆生物药品厂提供。1.2　布鲁氏…     

内蒙古新巴尔虎右旗牛羊布鲁氏菌病免疫效果观察

近年来 ,新巴尔虎右旗全面开展了畜间布鲁氏菌病免疫 ,为考核免疫效果 ,进行了流行病学调查 ,免疫羊不同时间和未免疫羔羊血清抗体检测 ,综合分析表明 ,近年全旗开展的布鲁氏菌病免疫获得良好的免疫效果。1　布鲁氏菌病的免疫情况前些年新巴尔虎右旗一直对当年羔羊、犊牛用布鲁氏菌Ｓ2菌苗进行饮水免疫 ,由于免疫密度低 ,保护率较差 ,布鲁氏菌病仍有散发流行。近几年在全旗全面开展布鲁氏菌病畜间免疫 ,对全旗牛、羊改用布鲁氏菌Ｍ 5活菌苗注射和布鲁氏菌 (Ｓ2株 )活菌苗口服免疫 ,1997-1999年累计免疫牛、羊 30 5 .6万头 (只、次 ) ,免疫密…     

布鲁氏菌M-111菌苗免疫绵羊耕牛的效果

布鲁氏菌M-111菌苗是近几年来由中国兽医药品监察所、内蒙古地方病防治研究所选用羊种布氏菌研制成功的一种新菌苗,本菌苗的最大特点是无凝集原性。1990年5月至6月我们应用该菌苗对金塔县耕牛、绵羊进行了免疫试验,其中免疫牛1750头,免疫羊101739只,免疫面达金塔县牛、羊饲养总量的65.25％。     

布氏杆菌猪型二号菌苗对牦牛不同途径免疫效力观察

近年来,国内应用布氏杆菌羊型五号菌苗和猪型二号菌苗预防家畜布氏杆菌病基本控制了羊牛布氏杆菌病的流行。但对牦牛布病免疫进展不大,报道甚少。为此,我们开展了牦牛布病免疫途径的研究,用中国兽药监察所培养的布氏杆菌二号弱毒菌苗,对牦牛进行气雾、注射和口服三种不同途径的免疫效力观察。     

布鲁氏菌无凝集原性M-III活菌苗对山羊免疫效力的观察

应用目前国内的布氏菌猪二号苗和羊五号苗接种山羊后,机体虽能产生抗感染免疫,但同时也产生常规血清学诊断抗体,特别是多次用苗后其血清抗体长期不消失,使得常规血清学诊断方法不能区分畜群中的自然感染病羊与菌苗接种羊,由此给布病的检疫、淘汰病畜造成困难。中国兽药监察所等单位于1982年开始研制布鲁氏菌无凝集原性菌苗,所筛选的制苗菌羊布鲁氏菌粗糙型M-111菌株具有免疫原性好、遗传性稳定、毒力稳定等特性;接种绵羊后保护率达到83.85％～100％(包括口服和肌肉注射免疫);接种动物不产生常规血清学诊断抗体(包括SAT、RBPT,CFT抗体);稳定性和血清学特性明显优于国外的     

牛副伤寒弱毒菌苗的研究

牛副伤寒在我州及全省流行很广,危害严重,不仅造成犊牛的大批死亡,而且成年牛也发病、死亡。其病原以病牛沙门氏菌为主,也有都柏林、肠炎、圣保罗等沙门氏菌。目前试用的氢氧化铝灭活菌苗虽然已经取得了显著的效果,但是它与弱毒菌苗相比较,还有不足之处,如没有明显的交互免疫能力,免疫期较短,而且只能进行注射免疫。为了延长菌苗的免疫期,发挥活菌苗交互免疫的特性,扩大气雾免疫应用范围,我们在1977年11月7日开始了弱毒菌株的培育试验。现已培育738代,菌株毒力下降了99％,免疫性能尚好。气雾免疫试验安全有效,注射免疫在不加氢氧化铝胶的情况下还不安全。     

REV－Ⅰ菌苗对绵羊附睾布鲁氏菌病的免疫预防效果试验

ＲＥＶ－Ⅰ菌苗对绵羊附睾布鲁氏菌病的免疫预防效果试验王明国，赵卫东，哈提拉阎晶华奴尔哈依，李汉民（新疆伊犁州畜牧科学研究所８３５０００）（新疆兽医防疫总站）（新疆巩乃斯种羊场）绵羊传染性附睾炎是公绵羊的一种慢性疾病，由绵羊附睾种布鲁氏菌（简称绵羊种布...     

青海省海北州羊衣原体性流产病原诊断

我州从1971年以来连续用布氏杆菌羊型M_5号弱毒菌苗对羊进行免疫,预防布氏杆菌病的危害,截止1988年对我州     

应用免疫酶组化法检测病料中的布鲁氏菌

目前,在对布鲁氏菌病临床流产材料及其它病理材料中的布鲁氏菌检查、疫情监测方面,尚无一快速、敏感、实用的方法。为此,本文建立了3种免疫酶组化法(直接法,间接法和SPA法)对5个种14个生物型布鲁氏菌进行了检测,并探讨了这3种免疫酶组化法的应用价值。(一)材料和方法1.实验动物:①家兔,2.5～3kg,布鲁氏菌血清学检查阴性;②怀孕30～35天的豚鼠,布鲁氏菌血清学检查阴性;③小白鼠,18～22g。2.菌种:①布鲁氏菌:5个种不同型别的布鲁氏菌共17株,来源于卫生部药品生物制品检定所。②对照菌:共50株,其中大肠杆菌11株,变形杆菌3株,波氏杆菌1株,羊流产沙门氏菌,牛流产沙     

布鲁氏菌无凝集原菌苗的研究

应用改良的生长凝集试验从大量羊种布鲁氏菌菌株中选育出1株理想的无凝集原菌苗菌株(编号M-111)。该菌株为粗糙型,弱毒性,且遗传性状稳定。用M-111菌株制造的活菌苗对绵羊作免疫试验证明,保护率达69.23～100％。实验室和田间试验证明,M-111菌苗接种绵羊不产生常规血清学试验(试管凝集试验、补体结合试验、虎红平板凝集试验)的诊断抗体,因而有可能解决因菌苗接种而干扰对动物的血清学诊断问题。     

抗布鲁氏菌单克隆抗体的研制及cELISA方法的建立

利用杂交瘤技术筛选出3株抗布鲁氏菌的特异性单克隆抗体5C10、4D2和3E4;利用单抗5C10建立了检测血清中布鲁氏菌抗体的竞争ELISA(cELISA)方法。用该方法对320份牛血清样品和147份绵羊血清样品进行了检测,并与商品化布鲁氏菌病试剂盒进行了比较。结果显示,用建立的cELISA方法和商品化布鲁氏菌病试剂盒对320份牛血清样品和147份绵羊血清样品的检测符合率分别为95.6%和92.5%。用补体结合试验(CFT)进一步检测差异结果的样品(25份),证明建立的cELISA与CFT的吻合率更高(21/25),而商品化布鲁氏菌病试剂盒与CFT的吻合率较低(4/25)。结果表明,本研究建立的用于检测布鲁氏菌抗体的cELISA方法更特异敏感,在布鲁氏菌病根除计划中将具有重要的应用价值。     

奶牛副伤寒免疫防治的研究

用从奶牛副伤寒疫区分离到的鼠伤寒沙门氏菌株配以标准菌株，制各鼠伤寒沙门氏茵菌笛，在疫区给临产母牛和青年育成牛免疫接种。共免疫牛１０５０头，均无不良反应。通过攻毒保护试验，接种菌苗的犊牛可抵抗３００亿强毒活菌的攻击，免疫牛血清中抗鼠伤寒沙门氏菌抗体的效价达１：２５６．同时，利用自制的抗鼠伤寒沙门氏菌高免血清对未进行免疫接种的一进行紧急预防和治疗，效果显著。由此表明，利用当地菌株制备菌苗，可有效地预防奶牛副伤寒的发生。     

从流产羔羊骨髓中分离出一株牛I型布氏菌

为考核我区经多年的布氏羊型5号菌苗气雾免疫后的效果,我们曾在酒泉、金塔、玉门、安西、敦煌等5个县(市)开展布氏菌病检菌工作,共收集牛、羊、猪可检材料1557份,其中:流产胎羔582份,在酒泉、安西检出可疑布氏菌8株。对这些可疑菌株进行了菌型鉴定和毒力测定,其结果报告如下:(一)材料与方法1.布氏菌多价诊断血清:为兰州生物制品所生产,批号:9001,效价1:3200。2.M_(104)冻干菌苗:为兰州生药厂生产。3.S_2冻干菌苗::为兰州生药厂生产。4.M_5冻干菌苗:为兰州生药厂生产。5.单因子诊断血清:ARM,系北京流行病研究所生产。6.牛型噬菌体:由北京流行病研究所生产。     

布鲁氏菌免疫磁珠qPCR检测方法的建立及应用

为建立高效、快速和准确检测布鲁氏菌病原的免疫磁珠qPCR方法,本研究根据GenBank已经发表的布鲁氏菌流产株BRS 19 ku外膜蛋白(Omp19)基因组序列来设计qPCR方法所需要的引物和探针,利用免疫磁珠富集浓缩样品中少量的布鲁氏菌病原,建立了布鲁氏菌免疫磁珠qPCR检测方法。采用qPCR方法对免疫磁珠分离的布鲁氏菌的敏感性、特异性、稳定性及临床应用进行了研究。结果显示,免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌的最低检测限为1×10~3CFU/mL。该方法可以扩增不同种型布鲁氏菌,对其他细菌没有发生交叉反应。该方法的批内和批间的变异系数均低于10%,具有较高稳定性。免疫磁珠qPCR方法与常规qPCR的符合率为94.74%,具有良好的吻合性。上述结果表明,本研究建立的免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌具有较高的敏感性、特异性和稳定性,为布鲁氏菌病的准确诊断检测和流行病学调查提供技术支撑。     

牛蓝舌病病毒VP7抗体胶体金试纸条检测方法的建立

为建立一种快速检测牛蓝舌病病毒抗体的免疫层析方法,本研究通过胶体金标记蓝舌病病毒VP7蛋白,以兔抗牛IgG作为检测线,抗蓝舌病毒VP7蛋白单克隆抗体作为质控线,采用间接法制备了胶体金免疫层析试纸条。结果显示,该胶体金试纸条在蓝舌病病毒抗体阳性血清稀释度为1∶64时仍可检出;该试纸条与牛结核病、牛布鲁氏菌病、牛病毒性腹泻、牛巴氏杆菌病、牛地方流行性白血病的阳性血清均无交叉反应;与国外商品化试剂盒相比较,该试纸条检测结果与ELISA检测试剂盒(IDEXX)的符合率为92.7%(51/55)。结果表明,本试验初步建立的牛蓝舌病病毒抗体的胶体金免疫层析检测方法具有较好的特异性和稳定性,整个检测过程可在10 min内完成,能够快速检测样品血清,适用于现场快速检测。     

用反应缸生产牛副伤寒氢氧化铝菌苗的工艺流程改进

经农牧渔业部畜牧局批准,我厂自1982年起试生产牛副伤寒氢氧化铝菌苗(批准文号82农兰生字26914号),结合试产,我们对用反应缸生产该苗的工艺流程做了一些改进。(一)生产概况 1982～1987年,共生产7批牛副伤寒氢氧化铝菌苗1189.5万ml,其中1982年生产的187万ml因使用不安全而报废。1.1982年采用工艺:按《牛副伤寒氢氧化     

鸡败血枝原体灭活菌苗免疫剂量与免疫效力关系的研究

本试验结果表明，鸡败血枝原体灭活菌苗对鸡超低剂量免疫组，抗体持续时间较短，攻毒保护率明显低于正常剂量。进一步证明抗原含量是免疫效力的基础和质量的最根本保证。该苗的乳化技术和水平也是延长免疫期的关键环节。     

倍硫磷与布氏MB_(32)号菌苗同步使用的试验

用内蒙古牙克石兽药厂生产的倍硫磷(批号850724)和青海省兽医生物药厂生产的布氏MB_(32)号菌苗(批号870102)。对有牛皮蝇寄生史的成年牛进行试验。 试验方法 用药前取试验牛20头作健康检查,采血作布病血清学检查(SAT)。分为倍硫磷(6.25mg/kg)与布氏MB_(32)号菌苗(100亿～200亿活菌/头)同时注射试验组和单注布氏MB_(32)号菌苗对照组,每组     

西藏布病山羊与口服布病菌苗山羊T细胞值的比较试验

从布氏杆菌病猪型Ⅱ号冻干菌苗问世以后,国内很多单位即用来免疫山羊,获得了较好的效果。但至今尚未了解服苗后与自然感染布病山羊之间免疫活性细胞的差别。 为了探讨服苗后与自然感染的山羊T淋巴细胞值,1980年5月份我们曾在海拔4500～5000米的达吉岭区和桑桑区用酯酶标记(ANAE)试验检测口服布病菌苗的山羊45例,自然感染布氏菌病山羊10例,健康山羊30例。     

布鲁氏菌血清抗体量子点荧光微球检测试纸条的研制

为研制一种现场快速筛查布鲁氏菌病的免疫层析试纸条,本研究以量子点荧光微球作为示踪物,共价偶联布鲁氏菌外膜蛋白OMP22,并将布鲁氏菌外膜蛋白OMP28和抗OMP22的单克隆抗体喷涂于硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,组装试纸条。结果显示,量子点荧光微球试纸条检测阳性血清的最大稀释度为1∶512,检测布鲁氏菌病阳性血清的敏感性为99%,特异性为98%,与虎红平板凝集试验(RBPT)的符合率为99%。且与结核病、蓝舌病、病毒性腹泻、口蹄疫及小反刍兽疫血清无交叉反应。上述结果表明量子点荧光微球免疫层析试纸条检测速度快、灵敏度高、特异性强且成本低,适用于布鲁氏菌病的现场筛查。