宁夏羔羊腹泻的产肠毒性大肠杆菌的研究

1985～1988年,本试验从腹泻羔羊分离到大肠杆菌共95株,并对其中54株菌株做血清型鉴定,明确了分离菌株,其血清分属O_8,O_(101),O_(78),O_9四类O类型,其中O_8为主要O类型。采用MRHA反应和K_(99)单抗及F_(41)抗血清的直接凝集反应,鉴定出分离菌株表面携带有K_(99)或K_(99):F_(41)粘着素抗原。由此选出H_(8720)、H_(8724)、H_(8729)菌株,用乳鼠胃内投服试验和平板免疫溶血试验,测定出该3株菌具有产生热稳定性肠毒素的特性;且H_(8720)、H_(8724)、H_(8729)对实验动物和初生羔羊有致病作用。其它分离菌株皆能与6株菌株H_(8720)(O_8∶K_(99)∶F_(41))、H_(8724)(O_8∶K_(99)∶F_(41))、H_(8729)(O_9∶K_(99)∶F_(41))、BH_(871)(O_(101)∶K_(99)∶F_(41))、BH_(872)(O_(78)∶K_(99)∶F_(41))、Bj_(877)(O_(101)∶K_(99)∶F_(41))的抗血清发生强烈的凝集性和交叉性反应。上述结果均表明:自腹泻羔羊分离到的菌株是携带有共同抗原成份,即K_(99)或K_(99)∶F_(41)粘着素抗原的产肠毒素性大肠杆菌。     

仔猪大肠杆菌纤毛抗原调查

大肠杆菌纤毛抗原与菌株的肠病原性有着密切的关系。目前已经确认,仔猪致病性大肠杆菌纤毛抗原有4种,即K_(88)、K_(99)、987P和F_(41),它们是蛋白质,不耐热,位于菌体表面,作为一种粘着因素在猪体内发挥作用,使大肠杆菌固着于前部肠道的粘膜绒毛上,产生肠毒素,引起发病。 纤毛抗原免疫母猪,所产生的抗体可通过初乳使仔猪得到被动保护,因而研究纤毛抗原     

埃希氏大肠杆菌菌毛吸附因子与仔猪黄白痢的关系

笔者采用玻板凝集试验的方法,对四川荣昌养猪研究所和新疆一四八团猪场的50份仔猪黄、白痢病料的大肠杆菌分离物进行了血清学检查,发现仔猪黄、白痢中均存在K_(88)、K_(99)、987P阳性的埃希氏大肠杆菌(E·coli),认为K_(88)、K_(99)、987P菌毛吸附因子很可能是仔猪黄、白痢的共同致病因子。     

“敌霸”预防新生猪早发性大肠杆菌性腹泻试验

新生仔猪于出生后24小时口服“敌霸”0.5g,间隔24小时后用K_(88),K_(99),~(987)P,F_(41)四个产肠毒素菌株联合击毒,结果试验组发病率和死亡率比对照组分别减少39.6％和34.1％,发病持续期缩短1.2天。     

仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗制苗株的生物学特性

对仔猪大肠杆菌病K88 ( 为黏附素阳性)、K99 、987P 、F41 制苗株的血凝性、传代稳定性等生物学特性进行了研究。结果表明,K88 株不能凝集绵羊红细胞,但能凝集鸡、猪、豚鼠、兔红细胞,以鸡红细胞凝集价最高;K99 株不能凝集兔红细胞,但能凝集鸡、猪、豚鼠、绵羊红细胞,以绵羊红细胞凝集价最高;F41 株对这5种红细胞均能凝集,以绵羊红细胞凝集价最高;而987P 株对这5种红细胞均不能凝集。传代结果表明,K88 株使用限定代次可达22代,K99 、987P 、F41 至少可达42代。     

新疆羔羊腹泻中大肠埃希氏杆菌的研究

对新疆5个地区分离到的510株大肠埃希氏杆菌用126种O抗血清鉴定,定出O型57种。较集中的O型分别为O_(?)(26株),O_(101)(21株),O_(106)(19株),O_(93)(17株),O_(?)(16株),O_(?)(12株)。用K_(99)、F_(41)抗血清对9个地区的750株菌鉴定,定出K_(99)阳性菌31株,占4.1％;F_(41)阳性菌19,占2.5％。用羔羊肠环结扎和乳鼠灌胃方法测毒,仅K_(99)表达稳定的菌株呈阳性反应。用小白鼠测定不同地区、年份疫区分出的203株茵的毒力,致死率在41.3％～87.5％之间。把不同疫区分出的10株菌单独或混合接种初生羔7只,6只发病。用同一地区健康群分出的菌接 种小白鼠、回归羔羊,其毒力和致病性与疫群菌株基本相同。     

大肠杆菌多价菌苗的研究

根据我国大肠杆菌常见的血清型44563(O_(8:)K_(87)、K_(88)ac:H_(19))、C83903(O_(141:)K_(89)[B]、K_(88)ab[L])、C83907(O_(149:)K_(91)、K_(88)ac)、44820(O_(101:)K_(99:)H~-)菌株研制成多价灭活口服菌苗和提纯K_(38)粘着素抗原、肠毒素与口服菌苗混合制成的注射菌苗。对母猪行两个途径免疫,其所产仔猪经哺乳后用异种血清型的菌株进行强毒攻击。其结果:第一组(口服-肌肉注射组)新生乳猪发病率为2.5％,保护率为97.5％;第二组(后海穴注射组)发病率为10％,两组均无死亡;未进行免疫的对照组发病率为37％。带有K_(88)粘着素和产毒素能力的异种血清型的C83552菌株进行致病力测定,其结果:口服96～120亿活菌量的新生乳猪发病率为100％,死亡率为100％;口服48亿活菌量的发病率为100％,死亡率为25％。我们选定96亿活菌量作为攻毒的活菌数,进一步扩大试验,以期用于生产。     

大肠埃希氏菌血清型鉴定及黏着素抗原的测定

对 95株已鉴定的大肠埃希氏菌 ,采用玻板凝集法进行了O抗原血清型的鉴定 ,确定 46株为O抗原血清型。同时采用免疫荧光技术和D 甘露糖抵抗血凝反应 (MRHA)及其抑制试验测定 ,确定为O抗原血清型的大肠埃希氏菌的黏着素抗原 ,其中 2 3株具有K88、K99、987P 3种黏着素抗原。结果表明 ,同时采用上述 2种方法筛选大肠埃希氏菌的黏着素抗原 ,其准确性和灵敏性更高。     

猪水肿病致病因子的提取及日粮硒、VE对人工复制水肿病影响的研究

猪水肿病是断奶前或断奶后仔猪常见的由某些特定血清型大肠杆菌引起的传染病。根据国内外文献报道,最常见的血清型是:O_(139)K_(82)(B)、O_(38)K_(81)(B)、O_(141)K_(85)(B)。本病的特点是发病快、病程短、死亡率高、呈地方性散发性流行,临床特征是眼睑水肿,后躯(四肢)麻痹,行走困难,叫声嘶哑、惊厥、共济失调。此病在我国东南沿海省份较为常见,目前尚无有效的防制措施,国内一些兽医工作者在临床实践中观察到补硒及VE对预防和治疗猪水肿病有某些效果,为了总结基层的实践经验,探讨硒及VE的作用机理,我们用从猪水肿病血清型大肠杆菌O_(139)K_(82)(B)菌体冻融物中提取的水肿病致病因子(E.D.P),在实验室条件下对补硒及不补硒(低硒)两组猪作了人工复制猪水肿病试验。     

定量产肠毒素性大肠埃希氏菌F41黏附素反向间接血凝试验的建立

利用 F41 单因子血清 IgG 致敏绵羊红细胞,建立了定量产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)F41黏附素的反向间接血凝试验。经致敏的绵羊红细胞能被F41单因子血清特异性地抑制,且不与 ETEC K88、ETEC K99、ETEC 987P、致仔猪水肿病大肠埃希氏菌 O138、鼠伤寒沙门菌和猪链球菌2型菌液出现交叉反应,其敏感性比甘露糖抵抗血凝反应(MRHA)至少高 25 倍。结果表明,该反向间接血凝试验具有很高的特异性和敏感性,可用于生物制品中黏附素含量的定量。     

鉴定猪源性大肠杆菌K_(88)~ 株的三种简便方法

本文报道了我们用玻片凝集、抗甘露糖血凝反应和发酵棉子糖等三种方法,对相同菌株进行试验的结果。证明这三种方法用于签定猪源性大肠杆菌K_(88)~ 株都是简便有效的。它们不但可用于仔猪腹泻病的流行病学调查,而且对这种传染病的免疫预防研究也有一定的意义。 (一)材料和方法 1.菌株:菌株及其来源列在表1。     

临产母猪注射大肠杆菌K_(88)-K_(99)抗原工程苗预防仔猪黄痢

1986～1987年,我们用中科院上海植物生理研究所与上海市嘉定县畜牧兽医站共同协作研制的大肠杆菌K_(88)—K_(99)抗原工程苗,在本场东风机械化养猪场、少平村、立新饲养场进行了预防仔猪黄痢试验,获得了一定的效果。 (一)材料和方法 1.大肠杆菌K_(88)—K_(99)抗原工程苗:中科院上海植生所研制,批号860715、870103;20％氢氧化铝生理盐水,农业部南京药械厂生产,批号8596029。     

吉林省猪源致病性大肠杆菌K_(88)~+株的检测及两种检测方法的比较

病原性大肠杆菌E.coli K_(88)抗原的发现(φrskoy,1961)大大地推动了大肠杆菌病的研究。近年来,国内外学者就K_(88)抗原的多种特性进行了大量的研究工作。现已查明:凡具有K_(88)抗原的E.coli株均能吸附在小肠粘膜的绒毛上,并产生两种肠毒素,即热稳定肠毒素(ST)和热敏肠毒素(LT)而导致仔猪发生腹泻。因此,检测病源性E.coli的K_(88)抗原无疑对流行病学的调查和免疫学的防治研究起着重要作用。     

一株拮抗放线菌发酵液对试验性鸡大肠杆菌病的疗效试验

对一株具有抑菌效果的放线菌发酵液用于治疗鸡大肠杆菌病的疗效进行了研究.采用人工感染诱发鸡大肠杆菌病造模,分别以放线菌发酵液与氟苯尼考进行预防和治疗试验.结果显示,放线菌发酵液治疗组与氟苯尼考低剂量(5 mg/kg)组的大肠杆菌病治疗效果相当,差异不显著;放线菌发酵液预防组与感染对照组在死亡率、治愈率和增重方面差异显著.证实,试验所用的放线菌发酵液可用于治疗和预防人工诱发的O_(89)血清型鸡大肠杆菌病.     

贵州省仔猪大肠杆菌病病原学的调查研究

1996-1999年,对贵州省遵义、安顺、毕节等9个地、县(市)的10个养猪场、16个猪群、934头仔猪进行了大肠杆菌病的流行病学调查,并对部分濒死仔猪进行了病理组织学检查;从265头病仔猪的直肠拭子、十二指肠内容物、肠系膜淋巴结等筛选出214株肠杆菌科细菌,经生化图谱鉴定,其中176株分离物是大肠埃希氏菌(Escherichia coli),并分离出1株O抗原类群、产肠毒素、溶血素的特征、K88菌毛抗原表达、分子量和基因定位及上述毒力因子与仔猪大肠埃希氏菌病的相关关系进行了研究;从现场病例分离出O8、O115、O138、O139、O145和O157仔猪黄痢病原菌型,检出18株大肠埃希氏菌产生热敏肠毒素(LT)和(或)热稳定肠毒素(ST),证实4株大肠埃希氏菌表达K88菌毛抗原.     

河南省鸡埃希氏大肠杆菌血清分型的研究

本文对199O年3月至1992年5月从河南主要养鸡的郑州、焦作、漯河、新乡、洛阳、濮阳、安阳等8地市22个鸡场93个鸡大肠杆菌病发病鸡群分离,经细菌分离培养,生化试验证实为致病性埃希氏大肠杆菌的59株细菌进行了血清分型。结果以血清型O_2为主、有32株,占待检菌数的54.23％,次之为O_1型,有13株,占22.03％,O_(78)型仅6株,占10.16％,O_(74)型3株,占5.08％,未定型5株,占8.47％。按地市分,分离菌数较多的郑州、焦作、漯河、新乡4地市,与所检细菌分型基本一致,郑州市共分离20株,O_1、O_2、O_(78)三型分别为4株、11株、4株,各占20％,55％和20％;焦作市共分离19株,O_1、O_2和O_(74)型分别为4株、10株和3株,各占21.05％,52.63％和15.78％漯河分离8株,O_1、O_2两型分别为2株、6株,各占25％和75％; 新乡市4株,O_1、O_2和O_(78)三型分别为1株、2株和1株,各占25％、50％和25％。但濮阳、洛阳、安阳、周口4地市分离菌数较少,血清型分布差异较大。近几年,针对不同鸡群,以血清型为依据,有针对性制备的单价及多价大肠杆菌灭活苗在发病鸡场应用后,明显的降低了鸡大肠杆菌病发病率,减轻了发病程度,收到了较好的预防效果。     

仔猪黄痢病防治试验报告

仔猪黄痢亦称新生仔猪大肠杆菌病,是肠道致病性大肠埃希氏菌中某些血清型引起初生仔猪发生的一种急性传染病,对乳猪的危害很大。关于本病的预防,国外许多工作者曾进行过大量的研究。英、美等国工作者曾将肠道病原性大肠埃希氏菌中的K_(88)阳性菌株或K_(88)阴性菌     

大肠埃希氏菌耐热性肠毒素的研究进展

产肠毒素性大肠埃希氏菌 (ＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃＥｓ ｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ ,ＥＴＥＣ)是引起幼畜腹泻的主要病原菌。ＥＴＥＣ具有两类致病因子 :一类为肠毒素 ,另一类为黏着素 (或称定居因子 ) ,已知的黏着素有Ｋ88、Ｋ99、Ｆ4 1、Ｆ4 2 和 987Ｐ等。ＥＴＥＣ借助这些黏着素定居于宿主肠道黏膜的上皮细胞上 ,从而大量繁殖 ,产生大量肠毒素 ,由肠毒素造成肠黏膜上皮细胞的病理性变化 ,导致幼畜腹泻[1] 。ＥＴＥＣ产生两种肠毒素 :一种为耐热性肠毒素(ＳＴ) ,根据抗原性及宿主差异 ,ＳＴ又分为ＳＴ1(ＳＴａ)和ＳＴ2 (ＳＴｂ)…     

辽宁省禽大肠埃希氏菌血清型的调查及其致病性试验

通过病原菌分离、血清型鉴定及本动物致病性试验对辽宁省禽大肠埃希氏菌的主要血清型分布与致病性进行了研究。2001～2005年从该省14个市的病死禽和死胚中分离出大肠埃希氏菌226株,血清型鉴定105株,其中O_(78)型占29．52%(31/105),O_(109)型占10．48%(11/105)。结果,O_(78)、O_(109)血清型是流行于该省致病性禽大肠埃希氏菌的优势血清型。随机选取49株分离菌,以每株1×10~7CFU的量于气管内给6只1日龄SPF鸡接种,根据接种后7 d内死亡和病变的情况,确定高致病株、中度致病株和低致病株,它们分别占75．5%、18．4%和6．1%。结果表明,所有分离菌株均有致病性,并在国内首次分离出禽O_(109)型大肠埃希氏菌。     

分泌抗布氏锥虫群共同抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用DEAE-纤维素分离的布氏锥虫伊氏亚种JG克隆株虫体按Segura 氏法制备抗原,常规免疫BALB/c鼠、融合、筛选和克隆。筛选时除使用免疫抗原外,还使用按同法制备的我国不同地区分离的3株布氏锥虫伊氏亚种(JX、ZJ、GY株),1个布氏锥虫马媾疫亚种虫株和培养的1株布氏锥虫指名亚种发育前期型虫体的抗原,以及泰氏锥虫和弓形虫抗原。共获得8个杂交瘤细胞株(4A_(11)、2D_6、5C_8、2E_3、1H_8、1C_9、1F_(11)、4F_6。它们分泌的单克隆抗体与泰氏锥虫、弓形虫抗原均无反应。4A_(11)、2D_6在ELISA和间接免疫荧光试验中只与免疫克隆株抗原反应。其余6株在ELISA中不仅与免疫株抗原反应,而且与其他锥虫虫株抗原呈明显交叉反应,免疫荧光试验则全部阴性。在ID试验中,1C_9、1F_(11)腹水与上述6种抗原呈现明显沉淀线,另6株则均无反应。4A_(11)和2D_6是针对伊氏锥虫群JG克隆株特异抗原,而5C_8、2E_3、1H_8、1C_9、1F_(11)、4F_6则是抗布氏锥虫群共同抗原。