l-四氢巴马汀对氯胺酮依赖大鼠海马GFAP及伏隔核ERK磷酸化蛋白表达的影响

目的观察l-四氢巴马汀(l-THP)对氯胺酮依赖大鼠条件位置偏爱(CPP)、海马CA1区神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及伏隔核ERK磷酸化蛋白表达的影响。方法随机将40只大鼠分为空白对照组、氯胺酮模型组(10 mg/kg)、l-THP低剂量(10 mg/kg)干预组、l-THP高剂量干预(20 mg/kg)组,每天大鼠给药及训练,建立条件位置偏爱模型。采用免疫组化法检测海马CA1区GFAP蛋白,Western blot法检测大鼠伏隔核ERK磷酸化蛋白。结果与空白对照组比较,氯胺酮模型组大鼠在伴药箱时间明显增加(P0.05),成功建立氯胺酮依赖大鼠条件位置偏爱模型。与模型组比较,l-THP高剂量干预组可明显减少大鼠在伴药箱中的时间(P0.05)。免疫组化结果显示,与空白对照组比较,氯胺酮模型组GFAP阳性细胞数量明显增多(P0.05);与模型组比较,l-THP低剂量、高剂量干预组GFAP阳性细胞数量明显减少(P0.05)。Western blot结果显示,与空白对照组比较,模型组ERK磷酸化蛋白表达明显增加(P0.05);与模型组比较,l-THP低剂量、高剂量干预组ERK磷酸化蛋白明显降低(P0.05)。结论 l-THP拮抗氯胺酮依赖与伏隔核p-ERK蛋白表达有关,并且l-THP对氯胺酮依赖大鼠神经元损伤具有保护作用。l-THP对氯胺酮成瘾具有调制作用。     

度冷丁慢性依赖和自然戒断大鼠脑神经细胞Bax蛋白的变化

目的探讨度冷丁药物依赖形成机制和法医学鉴定的诊断依据。方法 采用免疫组织化学SP染色法及图像分析技术,观察度冷丁慢性依赖和自然戒断大鼠大脑皮质(CC)、中脑导水管周围灰质(PAG)和中脑腹侧被盖区(VTA)神经细胞Bax的变化。结果 度冷丁慢性依赖时,大鼠表现为跳跃、竖尾等兴奋症状,自然戒断时出现高度激惹、异常姿势、叩齿、咬牙、腹泻等戒断症状和体征。对照组、慢性依赖组和自然戒断组在CC神经细胞Bax的染色灰度分别为146.0±5.92、118.6±6.77和106.0±7.49;在PAG分别为183.2±7.26、112.0±5.52和119.0±5.43;在VTA分别为171.2±9.65、113.6±4.34和93.2±6.06;BaX的表达在慢性依赖和自然戒断组比对照组明显(p<0.05);自然戒断组比慢性依赖组明显(p<0.05)。Bax阳性神经细胞数的变化趋势与Bax染色灰度结果相同。结论度冷丁药物滥用引起的神经细胞Bax明显增加可能与药物依赖的形成机制有关。Bax免疫组织化学变化可作为度冷丁吸毒法医学鉴定的形态学诊断辅助依据。     

海洛因戒断大鼠位置偏爱及海马神经元膜电性质的变化

目的 研究海洛因戒断期大鼠的位置偏爱性和海马CA1区神经元电生理特性,并探讨行为变化与神经元膜电性质变化之间的关系。方法 制作海洛因慢性给药戒断大鼠模型,对大鼠Y型迷宫位置偏爱行为及其海马CA1区神经元膜电特性,以及电镜下海马皮质突触结构的变化进行观察,并与对照组比较。结果 海洛因慢性给药戒断期,大鼠Y型迷宫位置偏爱显著增强(P<0.01),其海马CA1区神经元静息膜电性质,与对照组相比无显著差异(P>0.05),但动作电位(AP)半幅时程和10％-90％衰减时间缩短(P<0.01);兴奋性突触后电位(EPSP)幅值和曲线下面积增大(P<0.01)。电镜下见戒断组动物海马皮质神经突触间隙较对照组变窄,前膜和后膜内电子致密物聚集,密度增高。结论 海洛因慢性给药戒断模型,可引起大鼠明显的位置偏爱,且在不改变静息膜电特性的前提下,海马CA1区神经元AP和EPSP特性及突触结构产生了相应的改变。     

盐酸曲马多在大鼠体内的分布特点

目的观察盐酸曲马多在大鼠体内的分布及其特点。方法大鼠以3倍和6倍LD50228mg/kg剂量盐酸曲马多灌胃染毒致死,取材,薄层色谱法检测其心、肺、肝、脾、肾、大脑和血内盐酸曲马多的浓度。结果3倍LD50剂量组大鼠肾、肺、血、肝、大脑、脾和心组织盐酸曲马多的浓度分别为112±15、59±17、53±31、32±19.7、22±11.5、20±20、16.7±8.3μg/g或μg/ml;6倍LD50剂量组大鼠血、肺、肝、心、肾、大脑和脾中盐酸曲马多的浓度分别为107.6±7.2、26.3±20、11.7±6.6、11.2±7.2、10.3±3.6、6.38±0.2、6.1±0.3μg/g或μg/ml。结论3倍LD50剂量组大鼠,肾、肺、血内盐酸曲马多浓度最高;6倍LD50剂量组大鼠血、肺、肝中盐酸曲马多的浓度最高。盐酸曲马多中毒时,血、肝、肺和肾可以作为法医毒物分析的检材。     

海洛因慢性依赖大鼠神经元一氧化氮合成酶变化

目的 研究海洛因药物滥用致脑神经细胞一氧化氮合成酶(ncNOS)表达的变化及法医学鉴定意义。方法 采用ncNOS免疫组织化学SP法、ncNOS mRNA原位分子杂交及图像分析技术,观察大鼠海洛因慢性依赖和自然戒断大脑皮质、中脑导水管周围灰质和中脑腹侧被盖区神经细胞ncNOS的变化和ncNOSmRNA的表达。结果 实验组神经细胞ncNOS含量和ncNOS mRNA表达比对照组明显增加,阳性细胞数明显增多;自然戒断组较慢性依赖组改变更加明显(P<0.05)。结论 ncNOS在海洛因慢性依赖和戒断中起重要作用,脑神经细胞ncNOS免疫组织化学变化可作为海洛因药物滥用法医学鉴定的形态学依据。     

褪黑素对吗啡依赖大鼠复吸行为的影响

目的 建立大鼠条件性位置偏爱模型(CPP),探讨褪黑素对吗啡依赖大鼠复吸行为的影响。方法连续6d按剂量递增法于大鼠皮下注射吗啡,诱导实验组和吗啡对照组大鼠CPP形成,然后用盐水替代吗啡皮下注射大鼠10d,使CPP逐渐消退后,再用吗啡4mg/kg单次引燃注射激发消退的条件性位置偏爱复燃,3个实验组分别在注射吗啡前30min腹腔注射褪黑素20mg/、40mg/kg和80mg/kg,分别观察各组大鼠行为。结果 经6d吗啡训练后,实验组和吗啡对照组大鼠在伴药箱的停留时间显著延长,吗啡诱导的大鼠CPP形成;停用吗啡后,经10d的生理盐水注射,吗啡诱导的大鼠CPP逐渐消退;吗啡4mg/kg单次引燃注射使大鼠消退的CPP恢复,而实验组可以剂量依赖性地减弱大鼠CPP恢复。结论 吗啡诱导大鼠CPP形成,褪黑素在一定程度抑制吗啡依赖大鼠的复吸行为。     

过敏性休克死亡体内血栓素B_2含量变化的研究

本研究采用非平衡法,对青霉素和血清过敏性休克致死机体的血浆、肺、脾和肾中血栓素B_2(Thromboxane,TXB_2)进行放射免疫分析(RIST)。正常对照组血浆中TXB_2含量是9.63±1.77(ng/ml),实验组休克前是9.264±3.01(mg/ml),两者P>0.05。青霉素休克组30.36±10.72(ng/ml);血清休克组40.10±6.51(ng/ml),与对照及休克前相比均P<0.01。对照、青霉素和血清过敏性休克肺中TXB_2依次为:89.90±6.57、171.96±18.07和187.70±18.89(ng/g)(P<0.01)。脾中依次为:68.334±10.09、137.68±15.97和173.72±18.75(ng/g)(P<0.01)。肾中依次为:73.89±5.05、128.30±19.99和152.15±17.77(ng/g)(P<0.01)。过敏性休克致死的机体置室温6或12h,或冰箱48h后,不明显影响TXB_2的检测。研究者认为:发生过敏性休克时,血栓素系统发生剧烈变化,表现为血和脏器中TXB_2的增加,可为确定过敏性休克死亡提供一个重要的生化指标。     

氯胺酮致小鼠产生类精神分裂症与NRG1、ErbB4 mRNA表达的相关性

目的探讨氯胺酮连续给药致小鼠产生的类似精神分裂症症状,与精神分裂症易感基因神经调节蛋白1（neuregulin-1,NRG1）及其受体ErbB4 mRNA表达的相关性,为研究精神分裂症的可能发病机制提供参考依据。方法50只雄性昆明种小鼠,随机分为生理盐水组、氯胺酮小剂量（25 mg/kg）、中剂量（50 mg/kg）、大剂量（100 mg/kg）组和氯氮平治疗组,腹腔注射给药,1次/d,连续7 d。氯氮平组在连续腹腔注射7d氯胺酮（1次/d,每次100mg/kg）后,再用氯氮平灌胃7d（1次/d,每次20mg/kg）。HE染色观察海马神经元的变化;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测海马中NRG1及ErbB4 mRNA的表达。结果注射7d氯胺酮后,大剂量组海马区NRG1及ErbB4 mRNA的表达显著减少。结论氯胺酮诱导小鼠产生类似精神分裂症的症状,可能与海马区NRG1及ErbB4 mRNA的表达减少相关联。     

藿香正气水中中药成分对大鼠体内乙醇代谢的影响

目的研究服用藿香正气水后,大鼠体内乙醇含量及药代动力学参数的变化。方法将大鼠随机分为3组,分别按3.0 m L/kg剂量灌胃白酒、低浓度中药酒和高浓度中药酒,于给药前(0 min)和给药后5 min、10 min、15 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h、8 h断尾采血,用顶空-气相色谱法测定大鼠血液中的乙醇含量,用DAS 2.0软件计算乙醇的药代动力学参数,SPSS 17.0软件对药代动力学参数进行分析。结果高浓度中药酒组与白酒组最大血药浓度相比,差异有统计学意义(P0.05);其他药代动力学参数在三组间差异均无统计学意义(P0.05)。结论藿香正气水中中药成分对大鼠体内乙醇代谢和消除无明显影响。本研究对涉及饮用藿香正气水导致的交通案(事)件的定性判定和处理以及药物间的相互作用研究具有参考意义。     

环境激发吗啡CPP复燃大鼠杏仁核PSD-95的表达

目的检测吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)复燃大鼠杏仁核突触后致密质-95(PSD-95)的表达,探讨其在吗啡成瘾中对记忆的影响。方法 SD大鼠32只,随机分为吗啡依赖组(MD)、吗啡CPP消退组(ME)、环境激发组(MR)和对照组(N)。建立吗啡CPP模型,自然消退后,通过环境诱发CPP复燃,应用免疫组化和RT-PCR方法,观察检测激发组大鼠杏仁核PSD-95蛋白和mRNA表达,并与依赖组、消退组、对照组进行比较。结果吗啡CPP环境激发组、吗啡CPP消退组和对照组比较,杏仁核PSD-95的表达明显增加,具有高度显著性差异(P<0.01);吗啡依赖组与对照组比较,PSD-95的表达明显降低,具有高度显著性差异(P<0.01)。结论吗啡CPP环境激发组大鼠杏仁核PSD-95表达明显增高,PSD-95可能参与了成瘾记忆。     

大鼠毒鼠强中毒内脏器官Caspase-3与Bcl-2蛋白的表达

目的探讨大鼠毒鼠强中毒的病理机制。方法SD大鼠60只,随机分正常对照组、空白对照组、高剂量中毒死亡组、低剂量中毒组,高剂量中毒死亡组以1.0mg/kg毒鼠强悬浊液灌胃,低剂量中毒组以0.1mg/kg体重毒鼠强悬浊液灌胃。用免疫组织化学技术对中毒大鼠器官检测caspase-3与Bcl-2蛋白的表达,用图像分析技术对检测结果进行分析。结果各器官caspase-3与Bcl-2蛋白的表达变化规律基本相似,即高剂量中毒组大鼠caspase-3与Bcl-2蛋白均呈较强的阳性表达,低剂量中毒组大鼠,Bcl-2与caspase-3于中毒30min后表达不明显,3h时,可见较为明显的阳性信号,Bcl-2在6h～3d达高峰,随后表达下降;caspase-3在24h～5d达峰值,随后下降。Bcl-2峰值早于caspase-3出现。结论Bcl-2与caspase-3参与了毒鼠强中毒的病理生理过程。     

氯胺酮在急性中毒大鼠体内的死后再分布研究

目的探索氯胺酮在大鼠体内的死后再分布变化规律及温度对再分布的影响。方法48只雄性SD大鼠随机分为2个实验组（室温组24只、冷藏组18只）和1个对照组（6只）,实验组大鼠以氯胺酮290mg／kg灌胃,45min后缺氧处死,分别置于室温（24℃）和冷藏（4℃）条件下,于死后不同时间（0、12、24、48h）取心血、外周血、肝、肺、肾、心肌、大脑,检测其中氯胺酮含量;对照组大鼠以生理盐水灌胃,各对应组织器官样品为空白对照。血和组织样品中加入内标物SKF。。后碱化,乙酸乙酯萃取,GC／MS全扫描定性,内标法、工作曲线法气相色谱定量分析。结果室温条件下,大鼠死后48h内随着死亡时间延长,心血、肺、肝中氯胺酮的浓度呈升高趋势（P〈0．05）,肾脏中氯胺酮的浓度先升高后下降（P〈0．05）,外周血、心肌和脑中氯胺酮的浓度无显著性变化（P〉0．05）。冷藏条件下,血液及组织中氯胺酮浓度变化无显著性差异（P〉0．05）,除心肌外,各样本浓度均低于相应时段室温条件保存的样本。结论氯胺酮在大鼠体内存在死后再分布现象。温度对大鼠死后血液及组织中氯胺酮浓度变化有较明显的影响。     

Bone as a biomarker of acute fluoride toxicity

The use of bone as a biomarker for chronic and acute exposure to fluoride salts has been suggested, but there are no data published about its use to evaluate lethal intoxication. One hundred and sixty rats were divided into eight groups that received a single oral intubation dose from 0 (control) to 90 mg F/kg as NaF. The animals' time of death was recorded and their femurs were removed for fluoride analysis. Acid-soluble fluoride was determined in the whole bone and on the surface (periosteal), using an ion specific electrode. The data showed a statistically significant relationship between fluoride dose and the number of deaths (P<0.0001). A statistically significant relationship was also found between fluoride dose and fluoride concentration ([F]) in either the whole femur (P<0.0017), on the surface (P<0.0001) or for the ratio periosteal [F]/whole [F] (P<0.0001). However, the [F] on the femur surface was more closely correlated with mortality than that in the whole bone, showing statistically significant differences among the lethal doses and control (P<0.05). The data suggest that the ratio [F] periosteal bone/[F] whole bone, is a biomarker for acute fluoride toxicity.     

灌服毒鼠强诱导大鼠细胞DNA的损伤研究

目的研究毒鼠强体内染毒后,毒鼠强对大鼠脑细胞、心肌细胞、淋巴细胞DNA的损伤作用。方法选择健康Sprague-Dawley大白鼠20只,分成5组,每组4只,采用灌胃方法使大鼠毒鼠强体内染毒,按0.2,0.1,0.05,0.01mg·kg-1制作大鼠毒鼠强中毒模型,并以灌服生理盐水的健康大鼠为对照,分离实验大鼠的淋巴细胞、心肌细胞和脑细胞,用彗星电泳的方法测定不同浓度毒鼠强中毒后的细胞DNA损伤。结果0.2,0.1,0.05,0.01mg·kg-1剂量组的毒鼠强均可引起大鼠的淋巴细胞、心肌细胞和脑细胞DNA损伤,均与对照组差异有显著性(P<0.01)。结论毒鼠强诱导体内细胞DNA损伤可能是毒鼠强毒性作用机制之一。     

甲基苯丙胺对大鼠外周血中肾上腺素、去甲肾上腺素及肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察甲基苯丙胺（MA）长时间给药对大鼠外周血中肾上腺素（N）、去甲肾上腺素（NE）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法雄性SD大鼠25只随机分成实验组（20只）和对照组（5只）,实验组再分为1、2、4、8周给药组（每组5只）。采用MA（10mg/kg）进行腹膜下注射制作染毒模型,应用放射免疫酶标技术检测大鼠外周血中N和NE;应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血中TNF-α的水平。结果实验组各大鼠饮食量下降及饮水量增加,其外周血中N和NE水平增高,TNF-α表达增强,与对照组比较均有显著性差异（P〈0.05）。结论长时间使用MA可以引起外周血中N和NE增高及TNF-α表达增强,可能是MA引起心脏损害的重要机制之一。     

Tissue distribution of tramadol and metabolites in an overdose fatality

Tramadol (Ultram) is a centrally acting, synthetic analgesic agent. Although it has some affinity for the opiate receptors, tramadol is believed to exert its analgesic effect by inhibiting the re-uptake of norepinephrine and serotonin. There are several published cases of tramadol's involvement in drug-related deaths and impairment. Reports of deaths involving tramadol alone with associated tissue concentrations are rare. This report documents a case in which tramadol overdose was identified as the cause of death. The following tramadol concentrations were found in various tissues: blood, 20 mg/L; urine, 110.2 mg/L; liver, 68.9 mg/kg; and kidney, 37.5 mg/kg. Tissue distributions of the two primary metabolites, N-desmethyl and O-desmethyl tramadol, are also reported. In each tissue or fluid except urine, the tramadol concentration was greater than either metabolite, consistent with other reports of drug-impaired drivers and postmortem cases. The O-desmethyl metabolite concentration was greater than the N-desmethyl metabolite concentration in all tissues; this is in contrast to other postmortem reports, in which the majority of cases report concentrations of O-desmethyl as less than those of N-desmethyl. This may be useful as an indicator of time lapse between ingestion and death.     

急性吗啡中毒大鼠主要器官内吗啡的免疫组化定位研究

一次静脉注射１２．５ｍｇ／ｋｇ。ｂｗ的盐酸吗啡染毒雄性Ｓ－Ｄ大鼠，２小时后处死，取其脑、肾、肝、肺、心组织以２％戊二醛和４％多聚甲醛混合液固定后，常规石蜡切片。运用抗吗啡抗血清及ＳＡＢＣ技术染色。结果显示上述组织切片有不同程度的阳性染色，阳性着色主要见于肾髓质部分肾小管上皮细胞，肝脏中央静脉周围的肝细胞、肺泡上皮细胞及肺内小支气管粘膜上皮细胞、中脑部分神经细胞、室管膜细胞、心肌细胞．以及各器官小血管及毛细血管内皮细胞胞浆、血浆及肾小管腔内尿液。     

云南不明原因猝死地区隐花青鹅膏的毒性研究

目的 探究云南不明原因猝死案件事发当地隐花青鹅膏的毒性及毒理机制.方法 采集事发地的隐花青鹅膏,经基因测序鉴定种属后制成干粉和熬煮物,SD大鼠灌胃染毒,提血清测定肝、肾功能以及心肌酶谱的生化指标.灌胃染毒7次后,取大鼠心肌、肝脏和肾脏组织进行HE染色和透射电镜观察.最后运用SPSS 21.0统计学软件分析数据.结果 高...