DHFRP2,FIBRA和ACTBP2位点的法科学应用研究

用 PCR－ STR、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术，对 DHFRP2、 FIBRA和 ACTBP2三个 STR位点的法科学应用进行探讨，显示三个位点的扩增效率高， DNA降解至 400 bp以下时也可扩增成功，可用于法医学个人识别。三个位点的基因型偶合率为 7.6× 10－ 5，累积非父排除率达 96.81％，将此三个位点用于法科学亲子鉴定和个人识别，均获得满意结果。种属研究发现， 9种常见动物 DNA样本 (兔、鸡、鼠、牛、猪、蛙、猫、鱼和蛇 )中，兔、鸡 DNA在 DHFRP2位点有一长度为 179 bp的扩增片段；兔、牛、猪、鸡、鱼 DNA在 FIBRA位点出现一长度为 207 bp的扩增片段； 9种动物 DNA在 ACTBP2位点均无扩增产物出现。     

三个单位点DNA杂交联合应用的研究

本文从一些多态位点中筛选出在中国人群中，对于同一种限制酶HaeⅢ酶解都能检出良好多态性的三个单位点探针（PMLJ14、PYNH24、α－globin－3’HVR）。对这三个位点的等位基因频率进行了调查．用DNA指纹自动识别系统进行了数据处理，各位点的数据如下：PMLJ14、杂合度94％，等位基因频率分布0．002～0．051；PYNH24：杂合度89％，等位基因频率分布0．003～0．152；α－globin-3’HVR：杂合度78％，等位基因频率分布0．003～0．077。分析15个家系，未见到变异发生，符合孟德尔遗传规律。这三个位点个人识别中的累加机率是：1．7×10-5～2．1×10-14。     

中国北方汉族与维吾尔族群体8个STR位点的遗传多态性

目的调查中国北方汉族与维吾尔族群体8个STR位点的遗传多态性。方法应用荧光标记引物试剂盒及基因扫描技术检测vWA、TH01、TPOX、CSF1PO、D5S818、D13S317、D7S820、D16S539位点等位基因。结果100例汉族群体共检出62个等位基因,累计非父排除率为0.9975;50例维吾尔族群体共检出52个等位基因,累计非父排除率为0.9973。2群体总个人识别机率均超过0.9999。基因频率分布2群体间存在显著性差异。结论8个STR位点在汉族与维吾尔族群体中具有较高的遗传多态性,频率分布有民族差别。     

成都汉族、甘肃东乡族群体D10S1432和D10S1213 位点的遗传多态性分析

目的本研究的目的是了解人类基因组中D10S1432及D10S1213两个STR位点在成都汉族和甘肃东乡族群体中的遗传多态性分布及两个群体之间的关系。方法采用PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术,共调查了209例样本。结果在D10S1432位点上观察到5个等位基因,15种基因型。在D10S1213位点上观察到9个等位基因,31种基因型。两位点的基因型频率在调查的两个群体中的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（P>0.05）。经统计,D10S1432在这两个群体中的杂合度为0.664和0.737,个人识别几率为0.827和0.820。D10S1213的杂合度为0.664和0.657,个人识别几率为0.836和0.882。结论结果表明,D10S1432和D10S1213两个位点在法医学个人识别和亲子鉴定中有较高应用价值。     

联合应用多个DNA位点鉴定一宗三命碎尸案

l案例某年3月14日上午9时，在某市一码头水域发现一男性头颅．此后，又先后在10个不同地方发现成人盆部、上臂、小腿、成年女性头颅、右足、幼儿头颅等共15块碎尸块，初步认定碎尸块来自三个不同个体．经分析初步认为首次发现的碎尸块约在死亡后1周左右，成年男、女均在30岁左右，幼儿1、5岁左右．由于碎尸块分布地方相距较远，尸块腐败程度有显著差异，急需做DNA检验确定有关尸块向一认定、幼儿碎尸性别、碎尸块之间有无亲缘关系等问题．2检验过程2．l有关尸块个体识别及亲缘关系鉴定选择本室建立的方法进行腐败肌肉DNA提取，并扩增HUM…     

无关个体双亲亲缘关系16个位点不排除1例

1案例2007年5月20日,陆某(男,31岁)因故意伤害案件被拘留,采其血样,送检DNA实验室,以确定以前是否犯有其他案件。用Chelex-100法提取陆某血样的DNA,应用Identifiler试剂盒进行扩增,     

PCR扩增及银染法检测 STR位点的注意事项

STR（短串联重复序列）是人类基因组中具有高度多态性的遗传标记,它以 3～ 7个 bp为基本单元,在同一位点上因重复数的不同而形成不同的等位基因。 STR位点因其序列短,对部分降解及微量检材具有特殊价值。 STR位点扩增后的检测通常有三种形式：放射性同位素、银染、荧光检测。其中银染检测法因仪器及试剂价廉,将成为基层的首选方法。现将银染法在实际检案中的应用小结如下。     

运用变性PAGE和荧光检测技术对广州汉族人群六个STR位点的研究

运用ＳＴＲ－ＰＣＲ、变性聚丙烯酰胺凝胸电泳结合荧光ＤＮＡ自动检测技术对广州汉族人群６个ＳＴＲ位一基因频率和基因型频率进行了调查,并与其它人群的等位基因频率进行了对比。所有位点的结果均符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｈｅｒｇ平衡,且各位闰基因间无相关性。本方法可靠、灵敏、所得的等位基因频率等数据可为汉族人群法医个人识别、亲子鉴定及遗传学研究提供基础数据。     

Identifiler^TM系统在亲子鉴定中的突变观察和分析

目的观察和分析IdentifilerTM系统15个短串联重复序列(STR)位点在亲子鉴定中的突变现象。方法用IdentifilerTM试剂盒检测2712例亲子鉴定案例。结果在2362例认定亲子关系的案例中,观察到51例中有1个STR位点发生突变。突变的位点包括D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO、D3S1358、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、vWA、D18S51、D5S818和FGA。其中以D21S11位点突变率最高(0.369%);突变的等位基因来自父亲36次,来自母亲7次,无法确定9次。结论STR位点突变是较为常见的现象,采用IdentifilerTM系统进行亲子鉴定,遇到1～2个STR位点不符合遗传规律时,有必要增加突变率低、稳定性好的STR位点进行复核。     

PCR扩增STR位点在强奸案中的应用

利用Chelcx－100、PK、SDS、DTT对精液和阴道液、精液和血液混合班进行处理，除去女性阴道上皮细胞和血细胞获得精于细胞，提取DNA，经扩增STR位点[1]，获得高度多态性l‘ISTR位点分型图，与同一个体血液DNA的STR位点分型比较计算其概率，达到个体认定的作用．对强奸致孕案，由于STh位点等位基因按孟德尔遗传规律由亲代向子代传递，在母亲是肯定的情况下，可把STR位点分型与嫌疑父亲进行对比，计算其RCP父权相对机会）值认定嫌疑父亲为生物学父亲．通过对多起强奸案混合斑和强奸致孕案的实际应用，成功地排除或认定了罪犯，现…     

紫外线不同时间照射对血斑STR位点检验的影响

用PCR技术检验STR位点，已成为常规法医生物检验技术。随着该技术的广泛应用，防止及消除检验过程中的污染是检验成功与否的非常重要的环节犤１犦。紫外线照射是最常采用的防止及消除PCR污染的方法之一，其作用是，在相邻的嘧啶碱基之间形成环丁烷环，从而抑制了聚合酶介导的链延伸反应犤２，３犦。本文将５份血斑检材在相同条件紫外线下照射不同时间，观察紫外线对血斑STR位点检验的影响。１材料２００１年２月份收集的５份血斑检材，均匀涂于洁净滤纸上，阴干后室温保存。紫外线灯管。２方法２．１紫外线照射分别剪取适量上述１～５…     

同步分型16个STR位点及法医学应用研究

为提高法医学鉴定中单次检测信息量,探讨建立了同步检测16个STR位点方法.应用同步扩增、同—PAC板电泳分离银染,同时完成16个STR位点分型.16个位点的累计非父排除率0.99999878,平均匹配概率4.30×10~(-18).收集亲子鉴定328例,个人识别62例,均获较满意的结论.对同步分型16个STR位点的方法、法医学应用特点等作了讨论.     

pYNZ22位点扩增片段长度多态性法医应用的研究

对120名中国人进行pYNZ22位点扩增、银染检测，已找到11个等位基因，频率分布于0.4～30.4％，片段长170bp～870bp，相邻等位基因长度相差70bp，杂合度为73％，DP值为0．938。分析了五个家系均符合孟德尔定律。同一个体的血液、血斑、精液、混合斑中分离出的精子、毛囊、唾液及其它有核细胞组织的DNA多次进行pYNZ22位点扩增，得到一致的结果。灵敏度达到0．5ng核DNA。     

wizard clean up在混合斑DNA检验中的应用

目的建立一种快速、简单、有效的混合斑DNA检验方法。方法在100例检案中,利用wizardcleanup直接对精子消化液进行纯化浓缩。采用profilerplus试剂盒进行复合扩增,产物经ABI310基因分析仪检测。结果从混合斑中成功获得精斑10个STR位点的DNA分型。结论wizardcleanup处理混合斑,能有效去除女性成份,得到精斑DNA进行分型。     

肋软骨和趾甲在碎尸案中的STR位点检验2例

在碎尸案件中,由于尸块不全及经常高度腐败,使STR位点检验存在一定难度。肋软骨和趾(指)甲并不是目前DNA鉴定的常规检材,为了提高高度腐败尸块DNA鉴定的成功率,对高度腐败尸块的肋软骨和指趾甲的STR位点检验方法进行了研究,总结出了一套成功率高同时比较简便的检验方法,并且在实际检案中得到了可行性结果。1案例例1:在某小河中发现一用塑料布包裹的尸块,经法医检验,为腰以上躯干段尸块,表面皮肤肌肉被凶手用刀割除,高度腐败,推断死亡时间近一个月。例2:在一只旅行包中发现双下肢,经法医检验,股骨自上三分之一处横断,高度腐败,法医推断…     

应用多个Y-STR位点鉴定兄弟关系1例

1案例某日,在东莞市一水域发现一具腐败尸体,怀疑是一周前广州增城某单位失踪人员林某。因尸体高度腐败肿胀,无法辨别身份。将死者肋软骨与林某的哥哥血纱送检做DNA。经荧光标记引物扩增Y染色体DYS390、DYS19、DYS385、DYS389Ⅰ/Ⅱ、A10、C4位点,3100全自动遗传分析仪检测分型,结果显示二者由上述8个Y-STR位点组成的单倍型相同(见表1),支持二者具有兄弟关系。表1案例8个Y-STR基因座的检验结果检材DYS19DYS390DYS389I/IIDYS385A10C4死者15229/2512-121213林兄15229/2512-1212132讨论STR基因座的分型技术简单、快速,适用于…     

自动荧光分析法检验陈旧骨骼和牙齿的vWA和LPL位点

为鉴定陈旧骨骼和牙齿的尸源 ,对DNA的提取方法进行了研究,并建立了vWA和LPL位点的自动荧光分析技术,该法简便、快速、有效、可对存放2、3、4、7年的陈旧骨骼和牙齿成功地进行检验,在检验中能直接确定样品的等位基因     

中国汉族人群 8个 STR位点荧光标记同步检测及其频率分布

目的 对血液等微量生物学检材进行 8个 STR多态性位点及一个性别鉴定位点的复合检测 ,并调查了 350名中国汉族无关个体上述基因位点等位基因分布情况。方法 所选位点为 vWA、 TH01、 TPOX、 CSF1PO、 D5S818、 D13S317、 D7S820、 D16S539及性别鉴定位点 Amelogenin,应用荧光染料标记引物,利用 PE－ 377 DNA片段分析仪对扩增产物进行基因分型。结果 共检出 63个等位基因及两个性别决定基因 ,总鉴别机率（ TDP）值达 99.999 999 98％,对法医学常见极微量生物学检材的检测获得成功, DNA模板需要量为 0.5～ 1.0ng,通过家系调查,证明上述位点遗传稳定,符合孟德尔遗传规律。结论 上述 8个 STR多态性位点具备了个体认定能力 ,是对微量生物学检材进行个体识别鉴定的理想方法。     

江西汉族人群15个常染色体STR位点的遗传多态性

本文采用Amp FISTR~?Identifiler试剂盒对3500例江西九江地区无血缘关系汉族个体检测15个常染色体STR位点的遗传多态性。实验发现15个STR位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡,DP值介于0.9671(D2S1338)~0.7873(TPOX),PE值介于0.7326(D2S1338)~0.3022(TPOX),He介于0.8690(D2S1338)~0.6093(TPOX),在法医学个体识别和亲缘鉴定中具有较高的应用价值。     

JL-02多位点探针DNA指纹的法医学应用研究

以自制的JL－02探针进行了DNA指纹分析，对北京地区无关个体进行了调查，计算出任意两无关个体的偶合机率为6．6×10－15；家系分析表明，谱带在亲代与子代间的传递符合孟德尔遗传规律；同一个体不同组织的DNA指纹图相同；混合斑精子DNA指纹图与相应男性血液DNA指纹图完全相同；该探针对0．5μg的基因组DNA杂交，可获得清晰可辩的DNA指纹图。证明了新探针适用于法医物证检验中的个人同一认定及亲子鉴定。