鸡血型系统对马立克氏病抗性标记的研究

鸡血型系统对马立克氏病抗性标记的研究１）马吉飞陈万芳陈萍徐文忠（南京农业大学动物医学院２１００９５）董淑珍（河北农业技术师范学院）鸡马立克氏病（ＭＤ）是由马立克氏病病毒（ＭＤＶ）引起的鸡肿瘤性疾病，尽管已有预防本病的疫苗并广泛应用，但世界各国ＭＤ的发...     

应用聚合酶链反应鉴别诊断马立克氏病病毒及免疫效果监测

应用３对引物建立了３套聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测体系。用该技术分别检测马立克氏病病毒（ＭＤＶ）１型、３型毒株，并能鉴别１型致癌性强毒株和非致癌性弱毒株；可从强毒感染发病鸡病变脏器和弱毒免疫的ＳＰＦ雏鸡不同时期采集的羽髓中检测到ＭＤＶ１型病毒的ＤＮＡ；可鉴别强毒发病鸡羽髓和弱毒免疫鸡羽髓。以羽髓为检测材料，应用上述ＰＣＲ技术可对ＭＤＶ１型弱毒疫苗免疫鸡群进行免疫效果监测。     

鸡马立克氏病单价活疫苗免疫效力比较试验

用农业部南京药械厂和三家外国动物保健品公司生产的４种火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）冻干苗、实验室制备的ＣＶＩ９８８细胞结合苗和ＨＶＴ细胞结合苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）单价活疫苗免疫１日龄ＳＰＦ白来航鸡，８日龄时用鸡马立克氏病强毒（ｖＭＤＶ）ＧＡ株攻击，同时以Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗作对照，进行免疫效力比较试验。结果表明，６种ＭＤ单价活疫苗均能使免疫鸡群获得对ｖＭＤＶ攻击的免疫保护力，免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８，ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗；国产ＨＶＴ冻干苗的免疫效力不低于三家外国公司生产的ＨＶＴ冻干苗；Ｚ４＋ＦＣ１２６双价苗的免疫效力显著高于各种ＭＤ单价苗     

地高辛核酸探针用于马立克氏病病毒分型鉴定

地高辛核酸探针用于马立克氏病病毒分型鉴定李光富，陈溥言，蔡宝祥，张林元，邓小昭，刁振宇（南京军区军事医学研究所２１０００２）马立克氏病毒（ＭＤＶ）不同毒株在毒力和产生组织病变方面有明显差异。最早是英国的Ｂｉｇｇｓ根据ＭＤＶ对鸡的致病和致瘤特性将的ＤＶ...     

用狄高辛标记DNA探针检测鸡马立克氏病病毒

用狄高辛标记ＤＮＡ探针检测鸡马立克氏病病毒白安斌，蒋玉雯，黄安国，盘宝进，姚瑞英，陈西宁，郑儒标，冯军（广西兽医研究所南宁５３０００１）三黄鸡是广西地方良种之一，对马立克氏病（ＭＤ）较外来鸡种敏感。尽管接种了疫苗，仍有ＭＤ发生。笔者用狄高辛标记ＤＮＡ...     

鸡马立克氏病的胚胎免疫研究

鸡马立克氏病的胚胎免疫研究陈西宁黄安国蒋玉雯白安斌盘宝进姚瑞英郑儒标冯军（广西兽医研究所南宁５３０００１）鸡马立克氏病（ＭＤ）是鸡的一种传染性肿瘤病，以淋巴组织的增生和肿瘤的形成为特征，是威胁养鸡业最大的传染病之一。自ＨＶＴ疫苗问世以来，有效地控制了...     

牛传染性鼻气管炎病毒TK基因缺失株与野毒株PCR鉴别诊断方法的研究

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒（ＩＢＲＶ）ＴＫ基因和ｇＢ基因序列,应用Ｏｌｉｇｏ４．１程序设计两对引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２及ＰＢ１和ＰＢ２,分别对已构建的ＴＫ基因缺失（ＴＫ－）ＩＢＲＶ以及ＩＢＲＶＬＡ株、洛精、美精、ＢａｒｔｈａＮｕ／６７株、Ｂ７株、云南１和云南２分离株进行了ＰＣＲ扩增。结果显示７株ＩＢＲＶＤＮＡ用引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２扩增均产生４５７ｂｐ的特异性片段,而ＴＫ－ＩＢＲＶ只出现１１０ｂｐ片段;用引物ＰＢ１和ＰＢ２对７株ＩＢＲＶＤＮＡ及ＴＫ－ＩＢＲＶＤＮＡ进行扩增均产生３３９ｂｐ的特异性片段;用此引物对其同属的伪狂犬病毒（ＰＲＶ）、马立克氏病毒（ＭＤＶ）、鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）进行扩增,均未见特异性条带,从而证明该引物是特异的;ＰＣＲ的敏感性检测表明,该法可检测出３ｐｇ的病毒ＤＮＡ。所建立的方法可以鉴别野毒与ＴＫ－ＩＢＲＶ疫苗毒的感染。     

鸡马立克氏病疫苗生产和接种技术探讨

鸡马立克氏病疫苗生产和接种技术探讨贾满民李子峰田连信陈兴芳马爱荣李平谭晓东赵智勇（农业部兰州生物药厂７３００４６）鸡马立克氏病（ＭＤ）是危害养鸡业的重要传染病之一，且日趋严重。目前用于预防ＭＤ的疫苗，其品种、数量和使用效果尚有不尽人意的地方，本文仅对...     

甘肃省1998年鸡病流行现状与对策

根据我省疫情资料,１９９８年鸡新城疫（ＮＤ）、鸡马立克氏病（ＭＤ）、鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）、鸡白痢（ＰＤ）是本年度危害我省养鸡业的主要疫病。另外,少数地方还发生了禽霍乱（ＦＣ）、鸡传染性支气管炎（ＩＢ）、鸡传染性喉气管炎（ＩＬＴ）和鸡瘟（ＦＰ）。...     

用鸡胚监测火鸡疱疹病毒疫苗的效力试验

目前防制鸡马立克氏病 (ＭＤ)的措施主要是接种疫苗 ,但免疫失败时有发生 ,造成免疫失败的诸多因素中 ,最主要的就是疫苗蚀斑形成单位 (ＰＦＵ)的损失。为检测疫苗的效力和提高鸡群的免疫效果 ,笔者把火鸡疱疹病毒 (ＨＶＴ)疫苗接种于鸡胚卵黄囊 ,检查绒毛尿囊膜 (ＣＡＭ)上病毒痘斑生长情况 ,以此作为ＨＶＴ疫苗免疫前效力监测的手段 ,获得了满意效果。1　材料与方法1.1　疫苗　用国产和进口ＨＶＴ疫苗 3 0批次 ,分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 3个组进行试验。1.2　鸡胚　经隔离饲养、血清学检验 (ＡＧＰ)无ＭＤ抗体的种鸡所产蛋孵育的 4～ 5日龄健康鸡胚…     

MDV_2在MD防制中的应用研究进展

ＭＤＶ２在ＭＤ防制中的应用研究进展马云燕白侠徐宜为（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所１５０００１）众所周知，鸡马立克氏病（ＭＤ）是鸡的主要疫病之一，尚无理想的防制方法。在７０年代，全世界最广泛使用的是火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗。８０年代初，随着ＨＶＴ疫...     

鸡IB弱毒疫苗对鸡ND弱毒疫苗免疫干扰的试验观察

鸡ＩＢ弱毒疫苗对鸡ＮＤ弱毒疫苗免疫干扰的试验观察郑厚旌邓纪英１）张健林陈桂霞（河南农业大学牧医工程学院郑州４５０００２）据报道，应用鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）与新城疫病毒（ＮＤＶ）分别先后接种ＳＰＦ鸡胚，两种病毒之间存在干扰现象，被干扰的ＮＤＶ毒...     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立

将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ、病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭｃＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ_（２ａ），后２株属于ＩｇＧ_１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均能稳定分泌特异性ＭｃＡｂ。     

胶乳凝集试验在鸡传染性法氏囊病诊断中的应用

应用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体（ＩＢＤＶ－ＭｃＡｂ）致敏的聚苯乙稀胶乳，建立了检测ＩＢＤＶ抗原和抗体的胶乳凝集（ＬＰＡ）和胶乳凝集抑制（ＬＰＡＩ）试验。ＬＰＡ可检测出６ｍｇ／Ｌ的ＩＢＤＶ蛋白。比较了ＬＰＡ、直接萤光抗体试验（ＤＦＡ）和琼脂扩散沉淀试验（ＡＧＰ）三种方法检测ＩＢＤＶ抗原的特异性、敏感性和相关性，明确了ＬＰＡ和ＤＦＡ的检出率高于ＡＧＰ，ＬＰＡ和ＤＦＡ检测结果的符合率为８６％。     

提纯的马立克氏病肿瘤相关表面抗原在鸡体内的免疫应答

应用木瓜蛋白酶消化法，从马立克氏病病毒（ＭＤＶ）人工感染鸡的淋巴细胞瘤表面提取马立克氏病相关肿瘤表面抗原（ＭＡＴＳＡ）。所获得的抗原与从肿瘤细胞表面洗脱的抗ＭＡＴＳＡ抗体在ＥＬＩＳＡ中呈阳性反应。将这种抗原与白油佐剂乳化，给２０日龄鸡肌注免疫３次。应用间接ＥＬＩＳＡ对被免疫鸡的ＭＡＴＳＡ抗体进行了监测。结果表明：免疫前正常鸡的血清中无ＭＡＴＳＡ抗体存在，而用这种抗原免疫后１０天即可形成抗体应答，ＥＬＩＳＡ的ＯＤ值（Ｘ）为０．２３，至第３次免疫后１０天，ＯＤ值（Ｘ）为０．４４。这表明从鸡ＭＤ肿瘤细胞提取的ＭＡＴＳＡ，再好鸡免疫接种后可出现明显的抗体应答。木研究结果为ＭＤ肿瘤疫苗的研制提供了重要的参考依据。     

人工感染鸡传染性法氏囊病病毒死亡鸡各脏器病原的含量测定

人工感染鸡传染性法氏囊病病毒死亡鸡各脏器病原的含量测定朱瑞良，张绍学，牛钟相（山东农业大学动物科技学院泰安２７１０１８）鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）感染雏鸡后，各组织器官的含毒量均不相同，我们通过琼脂扩散反应（ＡＧＰ）检测了人工感染ＩＢＤＶ死亡的...     

马立克氏病胚胎免疫的保护力试验

马立克氏病胚胎免疫的保护力试验鲍恩东陈万芳（南京农业大学动物医学院２１００９５）张贤（宁夏农学院）张白银（江苏省句容农校）环境中广泛存在的马立克氏病病毒（ＭＤＶ），常使免疫雏鸡在产生免疫力之前感染而导致免疫失败以及火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗免疫力下降...     

鸡传染性法氏囊病的快速诊断

应用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＦＭ＿１４）及其荧光标记物（ＦＭ＿１４－ＦＩＴＣ），对接种ＩＢＤ疫苗、强毒感染和自然病例鸡组织进行直接荧光抗体试验（ＤＦＡ）、斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳ－Ａ）和琼脂扩散试验（ＡＧＰ）三种检测方法的比较。结果表明，鸡接种疫苗后１０天内ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ均呈阳性反应，而ＡＧＰ只在接种后６～８天的样品中检出抗原。２２例人工感染鸡和４０例自然发病鸡组织的检测结果表明，ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的敏感性基本一致，且高于ＡＧＰ，它们的整鸡阳性率分别为９６．８％、９５．２％和３８．７％；所有的ＡＧＰ阳性标本Ｄｏｔ－ＥＬＩ－ＳＡ和ＤＦＡ均为阳性，后两种方法的符合率为８７％。９６批次（被检鸡群达３８７００头份）野外送检病例之脾、肺、肾和法氏囊组织切片ＤＦＡ阳性率分别为４０％，１１％、１０％和８８％，而总阳性率则为９５％。     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的鸡传染性贫血特征性的临床症状和病理变化；用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片，可见特异的核内荧光。分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清所中和；５周龄ＳＰＦ鸡接种分离细胞毒可产生ＣＡＶ抗体；电子显微镜观察，分离毒株ＭＳＢ１细胞培养物中有大量２０ｎｍ左右的病毒粒子。应用特异性ＰＣＲ引物可扩增到预计长度的病毒核酸片段，进一步证实分离株为ＣＡＶ。     

用聚合酶链反应及核酸探针从新城疫病鸡体内检出传染性法氏囊病病毒

用鸡传染性法氏党病病毒（ＩＢＤＶ）逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和地高辛（ＤＩＧ）标记的ｃＤＮＡ探针组织印迹杂交试验，从某鸡场爆发新城疫（ＮＤ）的病鸡脾及法氏囊组织中检测到了ＩＢＤＶ，证明该ＮＤ病鸡存在ＩＢＤＶ的亚临床鸡鸡感染。进而分析了该疫情的爆发原因，并对鸡传染性法氏囊病的亚临床型感染和免疫程序进行了研究。