使用细胞培养单层分离猪流行性腹泻病毒

1971年,在英国的猪群中首次发现猪流行性腹泻(PED),直至1978年,英国和比利时才证实,引起PED的病原体为冠状病毒PED和猪传染性胃肠炎(TGE)是由不同血清型的冠状病毒引起危害以消化器官为主的两个类似的猪的传染病。因此,单靠临床症状和组织病理学检查来作出鉴别诊断是比较困难的,必须借助于血清学和病原学的检验。但是,由于在细胞培养物中使用胎牛血清会起到抑制冠状病毒吸收进入细胞膜受体的作用,使PED病毒在细胞培养物中生长繁殖受阻,从而对PED病毒的应用研究带来了一定的困难。据报道,     

应用~(60)Co照射制备无病原体犊牛血清的试验

犊牛血清是细胞培养中最重要的培养基成分之一，但在犊牛血清中常含有某些微生物，包括支原体和病毒，其中大部分血清中存在牛腹泻病毒（B──VDV），而用常规过滤方法难以清除，影响细胞培养。因此，研究制备无病原体血清的简易方法，满足细胞培养的需要，特别是保存种子传代细胞不被污染具有重要意义。美国Hyclone试验有限公司用照射处理组织培养的动物血清灭活其中存在的病毒，但具体方法未见报道。我们利用(60)~Co源的γ──射线照射的方法制备无病原体犊牛血清,现将初步结果报道如下。（一）(60)~Co源及照射剂量利用华南农业大学广…     

细胞冻存时缓慢降温的简易方法

细胞冻存的妥当与否,会直接影响所冻存的细胞的活力,甚至关系到能否将细胞保留下来的问题。当前一般采用液氮冻存细胞,其基本原则是慢冻速融,特别是从0～-20℃间冷冻速度要缓慢,要控制好。我们国内目前还没有生产诸如CRY-MED型那种程序控制的冷冻器,一般采用经验的方法:冻存细胞的安瓿先放入冰箱,再放低温冰箱,再经液氮罐口氮气熏蒸,逐步下降至液氮内。此法虽然可用,只是操作烦琐,不易掌握好。在此,我们介绍一种简易而有效的缓慢降温的方法,便于细胞冻存。(一)方法与结果     

应用聚合酶链反应鉴别诊断马立克氏病病毒及免疫效果监测

应用３对引物建立了３套聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测体系。用该技术分别检测马立克氏病病毒（ＭＤＶ）１型、３型毒株，并能鉴别１型致癌性强毒株和非致癌性弱毒株；可从强毒感染发病鸡病变脏器和弱毒免疫的ＳＰＦ雏鸡不同时期采集的羽髓中检测到ＭＤＶ１型病毒的ＤＮＡ；可鉴别强毒发病鸡羽髓和弱毒免疫鸡羽髓。以羽髓为检测材料，应用上述ＰＣＲ技术可对ＭＤＶ１型弱毒疫苗免疫鸡群进行免疫效果监测。