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牛羊赤羽病病毒环介导等温扩增检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立一种能够快速、简便地检测牛、羊赤羽病病毒的分子生物学方法,根据赤羽病病毒特异性S基因的6个特异区域设计了2对引物,首次建立了赤羽病病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法,对LAMP反应条件进行了优化,并将其与普通PCR方法进行比较。结果显示,LAMP检测方法的特异性好,只对赤羽病病毒进行扩增,且操作简便。本研究确定的最佳反应温度为63℃,核酸检测的最低检出限为1.08ng/μL,比普通PCR的灵敏度高2个数量级。该方法为赤羽病病毒的一种最新的快速、简便的检测方法,可用于出入境牛、羊赤羽病的快速检测。 相似文献
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“司法公信力”要县指司法裁判的公正性得到普遍认可,司法权受到广泛尊重和崇敬。在法治社会里,司法的公信力在于公正司法能够为大众所感知和认可,从而获得普遍服从与依赖,直至升华为对司法的信仰。 相似文献
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猪生殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立 总被引:21,自引:0,他引:21
根据GenBank登录的PRRSV保守基因序列设计合成了引物和探针,并对其进行了筛选;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。同时用建立的检测方法对组织病料进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比。结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达5.0×100拷贝/μL,比常规RT-PCR灵敏度高100倍。用该方法对东莞、增城、湛江等地的猪血清和多种组织样品进行了检测。结果,该方法与常规RT-PCR检测方法的阳性符合率为100%。用该方法对3份不同的组织样品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前PRRS的诊断需要。 相似文献
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为准确鉴别不同品种动物源性饲料,防范疯牛病及羊痒病的传播,建立了检测牛、绵羊和山羊组织种间特异的聚合酶链反应(PCR);用Mbo I、Vsp Ⅰ、Rsa Ⅰ分别对从动物饲料中检测得到的牛、绵羊和山羊组织的PCR产物进行酶切分析,酶切图谱与序列结构相符;核酸测序结果表明,3种动物组织的PCR产物序列与基因库中检索到的相应序列相吻合.用3种检测方法检测牛、绵羊和山羊组织无交叉反应,检测猪、鸡、兔和鱼等动物组织均呈阴性.PCR检测的敏感性可达0.25%(质量分数),PCR检测全过程包括样品处理,可在3 h内完成. 相似文献
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沙门菌和副溶血性弧菌双重荧光PCR快速检测方法的建立 总被引:4,自引:1,他引:4
根据沙门菌invA基因和副溶血性弧菌toxR基因的保守序列设计引物和探针,通过优化反应条件与参数,建立了可同时检测沙门菌和副溶血性弧菌的双重荧光PCR方法.结果显示,该方法敏感度高,特异性强,重复性好.对沙门菌和副溶血性弧菌的检测低限均低于每反应体系10CFU,经对29株非目标菌进行检测均呈阴性,而定量检测批内和批间的变异系数均小于2%;应用该方法检测人工染菌样品和实际样品,结果与SN标准方法的检测结果一致;应用该法可在8h内完成对样品中沙门菌和副溶血性弧菌的同步检验. 相似文献