绵羊肺腺瘤病毒内蒙古株的分离与观察

以内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺组织 4例和 3月龄绵羊胎肺 2例作为材料 ,对胎肺细胞进行了原代培养并接种绵羊肺腺瘤病毒悬液 ,进行了绵羊肺腺瘤病毒 (JSRV)的分离 ,同时采用电镜负染色技术和超薄切片透射电镜技术对上述样品进行了观察。结果表明 ,自然感染绵羊肺腺瘤病的 4例病肺组织中都有散在的病毒粒子 ,其直径为 10 0～ 12 5nm ,接种病毒悬液的胎肺细胞从第 2代到第 9代均出现细胞病变 ,但对绵羊胎肺培养的病毒悬液电镜负染色观察未发现典型的病毒粒子 ,而超薄切片透射电镜观察发现了病毒样粒子     

人工感染IBDV雏鸡法氏囊动态变化研究

本试验应用石蜡切片、超薄切片、电镜超微结构观察、血清学等技术,对IBD人工发病鸡的法氏囊病变进行了动态观察,揭示了IBD病毒可使鸡群对各种疫苗接种免疫效果降低,并对其他疫病易感性增高的机理,提示用高免抗体被动免疫治疗本病效果优于疫苗紧急接种。此外明确了琼脂扩散试验(AGP)检测病鸡法氏囊内IBD病毒抗原方法可用于IBD早期诊断。     

山羊遗传性甲状腺肿组织的病理学观察

山羊遗传性甲状腺肿病(简称“遗甲”)是一种遗传性代谢病。我国山羊“遗甲”是梅文辉等于1979年发现,并通过一系列研究初步证实为隐性“遗甲”病,其发病机理尚未完全阐明,超微结构变化还未见报道。(一)材料与方法 测交实验得到4只甲状腺肿羔羊,产下后数分钟或数小时内死亡。濒死前速取甲状腺肿组织一份,经2.5％戊二醛和1％四氧化锇双重固定,丙酮系列脱水,Epon812包埋剂包埋,LKB-5型超薄切片机切片,醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色,LMZ—5型透射电镜观察。另一份经10％中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,切片H.E染色,光镜观察。     

毁灭泰泽球虫卵囊孢子化过程的超微结构观察

毁灭泰泽球虫(Tyzzeria perniciosa)属于复顶亚门孢子虫纲球虫目艾美耳科,是家鸭的一种致病球虫。刚从鸭粪排出的新鲜卵囊没有孢子化。孢子化后,卵囊内便形成8个子孢子,但无孢子囊。由于制备卵囊超薄切片的困难,球虫卵囊孢子化过程的超微结构研究被阻碍了许多年,直到1976年Andersen等研制出一种卵囊双切片技术,才成功地解决了这一难题。目前,已有布氏艾美耳球虫和龚地弓形虫卵囊孢子化过程的研究报道,毁灭泰泽球虫卵囊孢子化的细微结构尚无记载。故此,作者对该种卵囊孢子化过程的详细结构进行了研究。(一)材料与方法 实验所用卵囊是以纯种毁灭泰泽球虫卵囊接种无球虫小鸭,从收集的粪便分离得到。取新鲜卵囊在26℃条件下分别孢子化0、6、12和24小时,然后每份材料按照Andersen介绍的方法制作卵囊的超薄切片,染色后,在JEM100s电镜下观察。     

人工感染猪囊尾蚴的组织结构观察

为了解成熟猪囊尾蚴的组织结构,进一步研究其特异性抗原定位,对猪带绦虫病患者用槟榔、南瓜子驱虫,采集虫卵,人工感染猪,收集新鲜猪囊尾蚴,石蜡切片,HE染色后进行了光镜观察,并用胆汁法翻出头节,超薄切片,进行了透射电镜观察.光镜观察表明,囊尾蚴有2个囊腔,较小的囊腔包括头节和颈节,较大的囊腔包括囊壁和囊液,囊壁外层具有绒毛,并有宿主结缔组织的成分;电镜观察表明,翻出头节的囊尾蚴除与已报道的未翻出头节的囊尾蚴结构相同外,最突出的特点是神经索和排泄管并行,石灰小体呈板层状.     

人工感染白斑综合征病毒的克氏原螯虾的病理学试验

用从发病中国对虾体内提取的白斑综合征病毒 (WSSV )人工感染克氏原螯虾 ,被感染克氏原螯虾均发病死亡。光学显微镜下观察病螯虾的组织切片 ,发现其胃、鳃等的上皮组织以及结缔组织的细胞核明显肿大和嗜伊红染色 ;电镜观察超薄组织切片 ,发现病螯虾的胃部、鳃部组织的细胞核内有大量的杆状病毒样病毒粒子 ,该病毒粒子有囊膜 ;斑点杂交检测发病螯虾 ,阳性率为 10 0 % ;人工感染克氏原螯虾的角化上皮、胃上皮、肝胰腺上皮、疏松结缔组织、肌肉、造血组织和鳃 ,经原位杂交检测呈阳性。     

绵羊肺炎支原体免疫组织化学及间接免疫荧光检测方法的建立

以病理组织学观察为基础,建立检测绵羊肺炎支原体的间接免疫组织化学和间接免疫荧光方法,以绵羊肺炎支原体标准血清为一抗,分别以家兔抗山羊Ig G-HRP和家兔抗山羊Ig G-FITC为二抗,对绵羊肺炎支原体阳性肺组织切片及阴性对照组切片进行HE染色、免疫组织化学染色及间接免疫荧光染色,并优化染色条件,以确保组织切片在最佳的条件下进行鉴定。结果显示,本试验所建立的免疫组织化学方法与PCR方法对病样的检出率相符,且高于传统的分离培养法。结果表明,本试验建立的间接免疫组织化学方法和间接免疫荧光方法可用于对临床病例的组织样本检测,具有很强的特异性和可靠性,可直观地观察和探究该病原在机体内的定位、动态分布以及致病机理,以期为临床诊断提供更可靠的方法。     

断奶仔猪多系统衰竭综合征淋巴结与脾损伤的病理学观察

对通过临床特征与PCR确诊为断奶仔猪多系统衰竭综合征的8例自然病例进行剖检取材,常规石蜡切片与超薄切片,HE染色及醋酸铀一柠檬酸铅染色,观察了淋巴结与脾的病理学变化.肉眼观察可见淋巴结肿大,特别是腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结与肺门淋巴结明显肿大;脾萎缩或中度肿大.组织学观察显示,淋巴结与脾淋巴细胞坏死,数量明显减少,网状内皮细胞增生与巨噬细胞浸润,在一些网状内皮细胞与巨噬细胞的胞浆内见嗜碱性包涵体.超微结构观察显示,淋巴结与脾淋巴细胞线粒体肿胀,内质网扩张,核浓缩,边集,甚至形成凋亡小体;在巨噬细胞与网状内皮细胞核和胞浆内均可见包涵体,包涵体为大小不等,圆形、椭圆形或不规则形的均质或颗粒状2种类型,胞浆包涵体常见于肿胀的线粒体与扩张的内质网附近.表明断奶仔猪患多系统衰竭综合征可致淋巴结与脾淋巴细胞坏死、凋亡,淋巴细胞数量减少.     

小鼠附植前胚胎超薄切片的琼脂糖预包埋制备方法

将小鼠附植前胚胎分别经戊二醛-锇酸固定后,采取琼脂糖预包埋法使胚胎凝聚成团,然后对含胚胎的琼脂糖块进行脱水、渗透和包埋.结果显示,Epon812包埋块中的胚胎排列紧密,半薄切片胚胎的整体形态完整,胚胎超微结构保存良好.说明琼脂糖预包埋法是制备小鼠附植前胚胎超薄切片的有效方法.     

兔脑炎原虫病快速诊断的临床病理学研究

为了在临床上能快速检出兔脑炎原虫,尽快诊断兔脑炎原虫病,对病兔进行了尿沉渣涂片的特殊染色、尿沉渣透射电镜的负染色、肾触片的特殊染色和肾病理组织学切片的比较观察。就尿沉渣涂片和肾触片的特殊染色而言,经光学显微镜检查,可从涂片和触片上的肾小管上皮细胞内检出兔脑炎原虫及其假囊,据此可对兔脑炎原虫病做出快速诊断。而对尿沉渣透射电镜的负染色和肾病理组织切片的检查,可与尿沉渣涂片检查结果相互印证,使临床诊断更加准确。结果表明,尿沉渣涂片和肾触片的特殊染色是临床上用于诊断兔脑炎原虫病的一种快速、准确和简便的新方法。     

病毒电镜负染色条件试验

近年来,电镜负染色技术广泛应用于病毒学研究,对于观察病毒的形态结构和病毒性疾病的临床诊断有重要意义。为改善负染色方法制备样品的稳定性,提高成像效果,我们在应用电镜负染色法观察病毒的过程中对影响负染色效果的诸因素进行了试验。     

犬猫肺乳头状腺癌的病理学诊断

犬和猫的肺乳头状腺癌作为犬和猫肺腺癌的一种病理亚型,目前还缺乏相关病理学诊断依据。采用2015版WHO肺肿瘤组织学分类方法,对临床犬和猫的肺癌进行病理学诊断。本次研究以患病犬类和猫类为样本,通过多取材,细观察,精确选取肿瘤组织样品,制备石蜡切片,然后石蜡切片经HE染色及免疫组织化学方法进行组织学鉴定。观察比较肿瘤组织和正常组织的病理形态,观察病理切片的细胞异型性,以此对犬和猫的肺乳头状腺癌进行病理学诊断,得出了4例病犬和病猫的病理学检查结果,均为肺乳头状腺瘤。     

柯氏伪裸头绦虫卵的电镜观察

柯氏伪裸头绦虫(Pseudanoplocephala cr-awfordi)寄生于猪体内,也可寄生于人体及鼠类。本文首次报道用扫描电镜和透射电镜对该绦虫虫卵超微结构的观察结果。(一)材料和方法 把采自猪体的柯氏伪裸头绦虫的孕卵节片洗净污物,放在盛有生理盐水的平皿中撕碎并充分搅拌,使虫卵释出;除去节片碎片,用生理盐水反复清洗;将净化的虫卵用4％戍二醛溶液固定;取经戍二醛固定的虫卵,用0.2mol PBS浸洗数次,再用1％锇酸固定,上述PBS浸洗,供制备扫描电镜和透射电镜标本用。制备扫描电镜标本时,依次用梯度乙醇逐级脱水和梯度乙腈置换后,在CO_2真空干燥器内干燥,镀膜仪内喷金后,送入日立—S50扫描电镜观察。制备透射电镜虫卵标本时,依次用梯度乙醇逐级脱水和梯度丙酮置换,环氧树脂“618”包埋,LKB—8800Ⅲ型超薄切片机切片,醋酸双氧铀及枸橼酸铅染色后,送入DXA4—10型透射电镜进行观察。     

马类动物气喘病的肺超微病理研究

对6例气喘病自然病例的肺组织作了超薄切片和电镜观察,发现主要的超微变化是巨噬细胞的增殖积聚,并吞噬了大量由于密度很高的结晶等多形态尘粒。微区元素分析证实,尘粒的主要成分是硅(Si)、铝(A1),还有少量的铅(Pb),硫(S)、钾(K)等,从而进一步证实无机尘是该病的重要原因之一。     

犬肝细胞肝癌和猫胆管型肝癌的病理组织学诊断

采用2015版W H O肝癌组织学分类方法,对临床上犬和猫的肝癌进行病理学分析。通过石蜡切片的常规染色(HE染色)及免疫组织化学方法进行组织学鉴定。犬的病理学检查结果为肝脏组织的外部多处坏死出血与肝硬化。我们进一步应用HE染色的方法对肝组织进行染色,观察到其病理改变为细胞有异型,3层的细胞排列成柱状,梁索状和腺泡状,细胞异型性明显,核仁显著,最后确诊为为肝细胞癌。猫的病理学检查结果为胆管上的肥大部分,胆管的纤维组织显著增加,是狭窄胆管胞膛,黏膜红色。在狭窄的部位,胆管扩张。胆管上皮增生管状腺,纤维增加,淋巴细胞浸润。胃、十二指肠、结肠黏膜固有层淋巴细胞浸润,纤维分生固有层淋巴细胞浸润。最后确诊为肝胆管癌。     

猪水泡病病毒与口蹄疫病毒引起寄主细胞(组织培养的肾细胞)病理过程的超微结构研究

据报导,近年在意大利和英国流行的一种新的猪水泡病病原体,认为是一种属于肠道类的病毒。对提纯病毒的电子显微镜观察说明,是直径为30～32毫微米的球状病毒(1、2)。我们用超薄切片技术,对国内某地流行的猪水泡病病毒在寄主细胞内的分布,晶格排列与形态也进行了电子显微镜观察,是直径为22～23毫微米的近似球形的病毒(3)。在前一阶段工作的基础上,我们继续研究了猪水泡病病毒引起寄主细胞(组织培养的肾上皮细胞)病理过     

黄淮白山羊蹄部形态结构的观察

为观察黄淮白山羊蹄部的解剖及组织结构特征,应用大体解剖学及组织学研究方法,将10只成年黄淮白山羊麻醉后处死,取其中2只的蹄供解剖学观察,另外8只分别取蹄底、蹄壁和蹄球部组织,经4%多聚甲醛固定,软化液软化后脱水、透明、浸蜡及包埋后切片,通过HE、Weigert-VG和Sacpic染色,显微观察并摄影。结果,黄淮白山羊蹄匣包括蹄缘、蹄冠、蹄壁、蹄底和蹄球等结构;蹄底、蹄壁主要包括角质层、透明层、颗粒层、棘细胞层、乳头层和网状层结构,但蹄底无透明层,蹄底皮下组织中含丰富的动静脉吻合,蹄壁角质小叶和真皮小叶交替嵌合结构明显,可使蹄匣与肉蹄牢固的结合在一起。蹄球中含丰富的脂肪组织和弹性纤维,此结构特征是分散蹄部承受外力的结构基础。上述研究结果为进一步研究黄淮白山羊蹄部的组织学结构提供了形态学资料。     

山羊传染性胸膜肺炎病理学观察

多年来,在陇东地区华池县的山羊和绵羊中,于秋末至翌年春初期间,常散发一种肺炎疾病,死亡率较高,其残活羊只亦极瘦弱,原因迄今尚未查明。1987年4月,在调查本病时,解剖了正在发病期的成年山羊17只,都进行了尸体剖检观察,其中12只羊采取心、肺,肝、脾、肾等实质器官小块组织,用10％福尔马林液固定、苏木素、伊红染色,部分肺组织切片用姬姆萨染色,显微镜观察。     

电镜样品的快速包埋方法

我们认为目前所采用的超薄切片样品制备仍不够完美,如生物材料制备的整个工序竟长达3～4天,有的甚至需1周,太费时间,因而对科研急用材料的处理远不能满足要求。为了更好地为科研和生产服务,用国产环氧树脂和进口Epon 812等研制出了适用于口岸动物检疫和临床快速诊断病毒的快速包埋方法,操作过程如下:     

犬睾丸肿瘤组织中肿瘤标志物Lin28a和OCT4及P53的表达

睾丸肿瘤细胞起源于生殖细胞和非生殖细胞,生殖细胞来源者主要为成熟的畸胎瘤,非生殖细胞瘤主要包括支持细胞瘤和间质细胞瘤。本研究将贵宾犬的睾丸肿瘤样组织制成石蜡切片,通过HE染色以及免疫组化染色的方法,镜检观察睾丸肿瘤组织的细胞形态以及P53、Lin28a和OCT4等肿瘤发生相关蛋白的表达水平。结果,通过病理切片HE染色显示睾丸肿瘤组织细胞异常增生,导致正常的睾丸管腔结构消失;肿瘤免疫组化检测显示在睾丸曲细精管的支持细胞内OCT4、Lin28a以及P53等肿瘤发生相关蛋白表达呈阴性,而在曲细精管内的生精细胞表达均呈阳性。该结果对于临床上辅助诊断犬的睾丸肿瘤具有一定的参考价值。