丹皮酚非离子表面活性剂囊泡的制备及其体外释放研究

目的 研究非离子表面活性囊泡对丹皮酚的包封作用及其体外释放行为的影响，为丹皮酚体内给药提供一种新的剂型，以期改善丹皮酚水溶性差、稳定性低等缺陷。方法 采用改进的乙醇注入法，利用非离子表面活性剂Span60、胆固醇、PEG- SA为囊材，以丹皮酚为模型药物，制备非离子表面活性剂载药囊泡，通过包封率、粒径和电位的测定等优化出最佳的工艺，采用正交试验确定最佳处方，研究表面活性剂囊泡在模拟体液中的释放行为。结果 表面活性剂囊泡的最佳处方为：Span60 80 mg，胆固醇30 mg，PEG15- SA 30 mg，丹皮酚30 mg，水合介质磷酸盐缓冲液（pH值＝7.4）60 mL。体外释放行为表明，表面活性剂囊泡具有明显的缓释作用。结论 该方法制备的PEG化丹皮酚非离子表面活性剂囊泡具有较高的包封率以及很高的稳定性，PEG化泡囊作为丹皮酚载体有着潜在的应用价值。     

Box-Behnken响应面法优化索拉非尼PLGA-TPGS聚合物纳米粒的处方与工艺

目的 优化索拉非尼聚乳酸-羟基乙酸共聚物［poly（lactic-co-glycolic acid），PLGA］-维生素E-聚乙二醇1000琥珀酸酯（D-ɑ-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate, TPGS）聚合物纳米粒的处方与制备工艺。方法 采用乳化-溶剂挥发法制备纳米粒，以包封率和载药量为评价指标，采用Box-Behnken响应面法考察索拉非尼与PLGA的质量比、有机相与水相的容积比、乳化剂维生素E-聚乙二醇1000琥珀酸酯（TPGS）的浓度因素对制备的影响，得到最优工艺参数，并对最优处方与工艺下纳米粒药物的体外释放、形态和粒径进行考察。 结果 最佳处方为：索拉非尼与PLGA的质量比为1∶11.56；有机相与水相的容积比为1∶5.56；乳化剂TPGS的浓度为0.03%。制备的优化纳米粒形态均一，平均粒径为249.6 nm，包封率为89.78%，载药量为9.41%。体外索拉非尼在含1%吐温-80的磷酸盐缓冲液（pH 5.0、pH 7.4）中呈二相释放，120 h累积释放率分别为80.69%±4.70%和40.67%±3.77%。结论 所优选的索拉非尼PLGA-TPGS纳米粒处方与工艺合理可行，体外实验具有明显的缓释作用，可为后期体内、体外研究提供实验基础。     

益肤乳膏剂制备工艺研究

目的 优选益肤乳膏剂最稳定配方及制备工艺。方法 筛选不同乳剂基质和不同乳化剂；并以外观性状和离心效果为指标，经正交设计试验对益肤乳膏的制备工艺进行优化。结果 益肤乳膏处方中油相比为33.6%，乳化剂选用甘油酯44/14和乳化-OP做混合乳化剂时最为稳定。在制备工艺中，采用水相加入油相、控制乳化温度在80 ℃、乳化时间30 min、搅拌速度750 r/min条件下制得的成品外观色泽佳，皮肤感觉良好，稳定性高。结论 所优选的益肤乳膏剂制备工艺简便、合理，所得制剂稳定，适用于工业化生产。     

蟾皮提取工艺的研究

目的：优选提取蟾皮的制备工艺。方法：采用不同的提取次数、提取时间、加水量，用正交试验法对蟾皮中吲哚类总生物碱的的提取工艺进行优选。结果：优化工艺为水煎煮2次，第1次加10倍量的水浸泡1h，煎煮45min，第2次加8倍量的水，煎煮45min。结论：该工艺合理，蟾皮中吲哚类总生物碱的提取率较高。     

牡丹皮药材规格等级初探

目的 探索牡丹皮中主要活性成分的积累量与根的粗细、根的组织结构之间的相关性，为评价牡丹皮质量及牡丹皮药材规格等级的划分提供科学依据。方法 采集安徽省亳州栽培5年生凤丹根系，将根系中的根依据粗细、长度及部位分别进行划分。同时收集市场常见不同规格的牡丹皮商品。采用高效液相色谱法同时测定各样品中芍药苷和丹皮酚含量。结果 在不同等级中，四等牡丹皮中芍药苷含量最高，一等牡丹皮中丹皮酚含量最高；芍药苷含量在主根中最少，在支根中最多；市场上连丹比刮丹中芍药苷含量高，刮丹比连丹中丹皮酚含量高。结论 细的牡丹皮中芍药苷含量反而高，由此推测芍药苷在周皮中积累量较多。由于芍药苷和丹皮酚积累量的趋势相反，因此牡丹皮质量标准有待进一步研究。     

牡丹皮药材关键质量标准的优化研究

目的 优化牡丹皮药材的关键质量标准。方法 采用薄层色谱法对牡丹皮药材进行研究；采用高效液相色谱法建立牡丹皮药材的特征图谱，对芍药苷和丹皮酚含量进行测定。结果 牡丹皮药材的薄层色谱中与对照品丹皮酚及对照药材色谱相应位置上，显现相同颜色的斑点；建立了高效液相色谱法特征图谱共有模式，检出5个共有峰，生成牡丹皮药材特征图谱；18批药材中芍药苷含量为0.90%~1.70%，丹皮酚含量均符合2015版《中华人民共和国药典》的限量要求。结论 该方法对薄层色谱鉴别法进行优化，建立牡丹皮特征图谱，新增含量限量指标，专属性强，重复性好，简便高效，可更为有效地控制牡丹皮药材的质量。     

牡丹皮中丹皮总苷的提取工艺研究

［摘要］目的 优选牡丹皮中丹皮总苷的最佳提取工艺。方法 以干膏得率和芍药苷的转移率为评价指标，采用正交试验法对提取过程中的溶媒用量、提取时间、提取次数进行考察。结果 最佳的提取工艺为：加8倍水，回流提取3次，每次1 h。结论 优选的提取方法适合牡丹皮中丹皮总苷的提取。     

正交设计优选百蕊草的提取工艺

目的 优选百蕊草的最佳提取工艺。方法 采用正交试验法，以干膏得率及山奈酚含量为指标，考察溶剂浓度、溶剂用量、提取时间以及提取次数的影响，确定最佳提取工艺。结果 最佳提取工艺参数为：加8倍量80%乙醇，提取3次，每次1 h。结论 优选的提取工艺切实可行，可以作为百蕊草的提取工艺。     

新藤黄酸温敏原位凝胶剂的设计与研究

目的 制备注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂。方法 运用星点设计-效应面优化法确定注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂的最佳处方,并采用高效液相法对其体外释放进行含量测定。结果 最佳处方为0.2%新藤黄酸+18.26%泊洛沙姆407（F127）+7.4%泊洛沙姆188（F68）+0.5%苯甲醇,胶凝温度为35.4 ℃。新藤黄酸温敏原位凝胶的体外释放方程为 Y=0.983 5X+4.028, R=0.999 3, 符合零级释药。结论 星点设计-效应面优化法能很好地优化该制剂处方,优化后处方的体外释药稳定,达到预期要求。     

丹皮酚-β-环糊精包合物的制备工艺研究

目的:优选丹皮酚β-环糊精包合物的最佳制备工艺.方法:采用正交试验法,以包合物收率、包合率为评价指标,优选包合时间、包合温度、主客分子投料比,确定最佳包合条件.结果:最佳包合条件为:包合4.5 h,温度为60 ℃,主客投料比为10:1.结论:优选的包合工艺条件可行.     

论累积投票制度在我国现阶段的重构——兼评公司法第106条之规定

公司法立足于保护中小股东利益,借鉴外国的立法例规定了累积投票制度条款。然累积投票制度存废一直存在争议,又公司法采用了许可性累积投票制度,这种立法例是否妥适？立足于中国现状,通过分析累积投票制度的功能,参照各方争论,认为目前我国应当采用区别累积投票制度强制性规范。     

基于STAT-3/NF-κB/ICAM-1通路探讨丹皮酚缓解小鼠结肠炎相关性结直肠癌的作用机制

目的 从STAT-3/NF-κB/ICAM-1信号通路探讨丹皮酚缓解小鼠结肠"炎—癌转化"的机制.方法 构建结肠"炎—癌转化"小鼠模型,ELISA法检测小鼠血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素10(inter-leukin-10,IL-10)水平,Western blot法和免疫组织化学染色法检测小鼠结肠组织内信号转导及转录激活因子3(signal transdncers and activators of transduction-3,STAT-3)、核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)p65和细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)蛋白表达水平.结果 光学显微镜下可见丹皮酚治疗组小鼠结肠的炎症细胞浸润、腺体紊乱等病变明显减轻.丹皮酚可显著降低肿瘤数量、肿瘤质量及脾脏指数(P<0.05),显著降低模型小鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平(P<0.05),显著升高血清IL-10水平(P<0.05),显著降低小鼠结肠STAT-3、NF-κB p65和ICAM-1的表达水平(P<0.05),其中以丹皮酚中剂量组的作用为优(P<0.05).结论 丹皮酚能有效缓解小鼠溃疡性结肠炎的炎症反应,其作用机制与调节STAT-3/NF-κB/ICAM-1信号通路有关.     

黄连水煎液微粒体系对大鼠小肠上皮细胞紧密连接结构与紧密连接蛋白ZO-1表达的影响

目的 观察黄连水煎液微粒体系对大鼠小肠上皮细胞紧密连接结构与紧密连接蛋白-1（zonula occludens-1，ZO-1）表达的影响。方法 通过常规煎煮获得黄连水煎液，经高速离心得黄连水煎液微粒及去微粒水煎液。采用大鼠肠循环灌注模型，分别用空白Kreb-Ringers（K-R）液、黄连水煎液、微粒重悬液和去微粒水煎液对大鼠空肠段进行循环灌注。2 h后取下肠段，以透射电子显微镜观察细胞紧密连接结构的变化，采用免疫组织化学法检测空肠黏膜中ZO-1的表达水平。结果 空白K-R液组与去微粒水煎液组小肠上皮细胞间连接紧密无明显间隙，ZO-1蛋白呈蜂窝或点状聚集于上皮细胞周围；黄连水煎液组与微粒重悬液组小肠上皮细胞间隙增大，且ZO-1表达水平显著降低（P<0.05）。结论 黄连汤剂中活性成分肠吸收与黄连水煎液微粒体系调节小肠紧密连接结构和ZO-1表达水平有关。     

新藤黄酸提取工艺的优化研究

目的:探讨回流提取新藤黄酸的最佳工艺。方法:以新藤黄酸含量为考察指标,采用正交试验法优选提取工艺。结果:溶剂的浓度对提取量有显著影响,其次的影响因素为提取时间、提取次数、溶剂的量。结论:提取新藤黄酸的最佳工艺为:12倍量的甲醇,提取3次,每次3 h。     

正交实验优选赤芍提取工艺研究

目的:优选乙醇提取赤芍工艺.方法:采用正交实验方法,以芍药苷为指标成分,以乙醇浓度、溶剂量、提取时间、提取次数为考察因素,各设置3个水平,对赤芍乙醇提取工艺进行优化.结果:芍药苷的最佳提取工艺条件为:700 ml/L乙醇,8倍量水,提取3次,每次1.5 h.结论:不同条件对赤芍提取物中芍药苷含量有影响.     

脑缺血再灌注大鼠海马区神经营养因子的表达及桃红四物汤的干预

目的 观察脑缺血再灌注后大鼠海马区不同时间神经营养因子表达的变化及桃红四物汤的干预作用。方法 采用大脑中动脉线栓法构建大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，将实验动物随机分为假手术组、模型组、桃红四物汤组和尼莫地平组。采用TTC染色法检测脑梗死体积，酶联免疫吸附法测定大鼠海马区脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor, BDNF）、神经生长因子（nerve growth factor，NGF）、神经营养因子3（neurotrophin-3，NT-3）的表达水平。结果 与假手术组相比，模型组术后12 h、24 h、7 d、14 d脑梗死体积明显增大。与模型组相比，桃红四物汤组在术后7 d和14 d脑梗死体积显著减小，尼莫地平组术后12 h、24 h、7 d和14 d脑梗死体积显著减小。与假手术组相比，模型组术后12 h海马区BNDF表达水平显著提高，术后24 h海马区NGF表达水平显著提高，各时点NT-3表达水平的差异无统计学意义；与模型组比较，术后7 d和14 d，桃红四物汤组、尼莫地平组BDNF表达水平显著提高，术后24 h和7 d，尼莫地平组NGF表达水平显著提高，桃红四物汤组NGF和NT-3各个时间点的表达水平无明显差异。结论 大鼠脑缺血再灌注一定时间后海马区BDNF和NGF的表达水平增高，有利于受损的神经细胞恢复，桃红四物汤通过促进BDNF的表达而保护神经细胞。     

丹皮酚对ox-LDL诱导的大鼠血管内皮细胞黏附功能的抑制作用

目的:研究氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对体外培养的大鼠单核细胞(MC)与大鼠主动脉内皮细胞(RAECs)黏附的影响及丹皮酚(Pae)含药血清对其的抑制作用.方法:制备Pae含药血清并用RP-HPLC测定血清中Pae含量;改良沉淀法分离大鼠血清低密度脂蛋白(LDL),Cu2 氧化制备ox-LDL;组织块预消化贴壁法培养RAECs;大鼠淋巴细胞分离液分离单核细胞;孟加拉玫瑰红活细胞染色法测定MC与RAECs的黏附功能.结果:ox-LDL在25～400 mg/L时呈剂量依赖性地诱导MC与RAECs的黏附,100 mg/L时促MC与RAECs黏附达最大值;ox-LDL与RAECs共育1 h即可明显促进黏附作用,3 h时达最大诱导效应.Pae含药血清在浓度为1.8～4.2 mg/L时,呈剂量依赖性地抑制ox-LDL诱导的黏附作用;4.2 mg/L孵育24 h时抑制作用最明显.结论:Pae对ox-LDL诱导的大鼠MC与RAECs黏附功能有抑制效应,Pae对ox-LDL介导的血管内皮细胞炎症环节的影响是其抗AS的作用机制之一.     

川芎嗪和血塞通对糖尿病肾病患者尿微量白蛋白的作用

目的:观察川芎嗪和三七总皂苷对2型糖尿病肾病患者尿微量白蛋白的影响。方法:44例患者随机分为3组,即川芎嗪组(给予川芎嗪注射液)、三七总皂苷组(给予血塞通注射液,主要成分为三七总皂苷)和对照组(不用川芎嗪、血塞通)。疗程均为2周,3组基础治疗措施相同。治疗前后分别测定24 h尿微量白蛋白排泄率。结果:川芎嗪组和三七总皂苷组,治疗后24 h尿微量白蛋白排泄率明显下降,差异有显著性(P<0.01);对照组治疗前后24 h尿微量白蛋白排泄率比较,差异无显著性。结论:川芎嗪和三七总皂苷能够降低2型糖尿病肾病患者尿微量白蛋白排泄率,延缓糖尿病肾病的发展。     

响应面分析法优化马兰总黄酮提取工艺研究

目的 应用响应面分析法优化马兰总黄酮的提取工艺。方法 以单因素研究为基础,以总黄酮提取量为响应值,以4因素3水平的响应面分析法优化马兰总黄酮的提取工艺。结果 马兰总黄酮的最优提取工艺条件为：乙醇浓度为40%,液料比为〖DK(〗16.5∶1,〖DK)〗提取时间为2 h,提取次数3次,在该条件下,马兰总黄酮提取量预测值为162.538 mg,实际验证值为156.867 mg,并得出各因素对马兰总黄酮提取量的影响大小依次为乙醇浓度、液料比、提取次数、提取时间。结论 响应面分析法可用于优化马兰总黄酮的提取工艺,实验验证值与模型预测值基本相符。