10起案件陈旧微量生物检材的DNA检验分析

正作者对濮阳市1992-2002年间未破命案进行了梳理,收集了其中10起命案的生物学检材,进行STR检验,得到较理想的结果,并侦破了4起命案,现报道如下。1材料与方法1.1样本来源10起未破命案检材30份。(1)精斑类检材10份(内衣4份、阴道擦拭物4份、床单2份);(2)血痕类检材11份(木质载体2份、金属载体3份、棉纱载体6份);(3)接触类检材9份(提包1个、手表5只、     

Chelex快速处理法成功检测肛门拭子1例

在实际办案中 ,法医检验精斑多集中于阴棉、内裤、擦拭物 ,而肛门拭子检验较少 ,笔者遇到一例 ,并成功检出犯罪嫌疑人所留精斑的基因型。2 0 0 2年 3月 ,谢某 (女 ,4 2岁 )在中山市东区某出租屋被杀。提取死者谢某阴棉、肛门拭子及嫌疑人曾某、于某、周某等人血纱 ,进行ＰＣＲ检验比对。血痕、混合斑ＤＮＡ提取见文献[1] 。ＤＮＡ扩增 :采用ＰＥ公司Ｐｒｏｆｉｌｅｒｐｌｕｓ试剂盒扩增。电泳采用 310遗传分析议电泳分型。第一次检验事主阴棉中精斑 9个ＳＴＲ位点基因型均与嫌疑人曾某相同 ,偶合概率为 1.3× 10 -12 ,从而认定精斑为曾某所…     

Chelex快速处理法成功检测肛门拭子1例

在实际办案中,法医检验精斑多集中于阴棉、内裤、擦拭物,而肛门拭子检验较少,笔者遇到一例,并成功检出犯罪嫌疑人所留精斑的基因型.     

从口腔擦拭物斑痕中检出人精斑两例

案例1:1989年3月30日夜,某县11岁女孩陈××被人杀死在住处床上,下半身裸体。尸体检验时提取了被害人的阴道内及阴道外口擦拭物共8份,口腔擦拭物1份,其它检材从略。实验室检验,8份阴道内及阴道外口擦拭物浸液对抗人精血清沉淀试验均呈阴性反应,而口腔擦拭物浸液与抗人精血清重叠后仅两分钟便出现白色沉淀环,且愈来愈清晰,15min后白环变宽,并逐渐模糊,40min后消失。参加试验的已知人精斑、人唾液斑、人血痕等对照样本结果均完全正确。经多人次反复     

两起特殊强奸案的DNA检验

1 案件简介 2004年6月7日上午，某市发生一起强奸案，被害人陈某被其公公李某强奸，侦查人员将案件检材送来检验，经检验陈某内裤上未检见人精斑，同时送来的检材还有李某阴茎擦拭物，采用有机法提取该擦拭物上皮细胞DNA，方法如下。     

特殊检材的DNA检验3例

法医物证鉴定中,较常见的生物学检材有现场血痕、精斑、毛发、牙齿、香烟过滤嘴及在抵抗中遗留在当事人指甲缝中的生物成分DNA[1].但在实际工作中,发现提取的生物检材复杂多样,对于一些疑难检材在DNA提取方面便成为难点,而这些特殊检材的成功分析往往对案件的定性和侦破起着至关重要的作用.现将3个案例中4份特殊检材的DNA检验报道如下.     

用特异兔抗人精蛋白抗体间接ELISA法检测人精斑

本文报告利用抗人精血清进一步精制而得的特异兔抗人精蛋白抗体进行间接ELISA试验检测人精斑的方法。经用61例各种常见体液斑检材及多人不同浓度的精液、唾液、乳汁、血液等体液稀释液进行测试,结果正确检出精斑的准确率达100％。对混合多人精液稀释液的最高检出稀释度为1/10000,非精斑检材均不出现阳性反应。该法的特异性完全适合精斑确证检验鉴定的需要,其灵敏度明显高于传统的精斑确证检验方法。本法操作简单,无需特殊仪器设备,使用的抗体来源方便,便于应用。     

PCR-RFLP法检验混合斑中精斑ABO血型及基因型

运用PCR-RFLP检验方法,对21份精斑样品、5份混合斑检材进行了检验,结果表明该方法能够很好地检测混合斑中精斑的ABO血型及基因型,有效地解决了非分泌型精斑的ABO血型及基因型,拓宽了混合斑中精斑的检验范围.     

微量生物检材DNA检验的研究

在日常检案中经常遇到微量的生物检材 ,由于重视不够 ,提取不当 ,检验效果不甚理想。为了充分发挥微量生物检材的作用 ,更好的为侦察破案服务 ,笔者对部分微量生物检材进行了PCR STR检验研究 ,并取得了一定效果。现报道如下 :1　方法和结果实验样品　均由非本实验室的志愿者提供 ,一次性牙刷 10个 ,日常用牙刷 4个 ,头皮屑 2人分 ,一次性纸杯 10个 ,面部擦拭斑迹 5份 ,梳子 2把。另取杀人案件现场嫌疑人遗留的衣服领子 1个 ,盗窃案件现场提取的犯罪嫌疑人饮酒用的瓷碗 1个。试剂与仪器采用 970 0扩增仪 (ABI公司 )及ABI 377测序仪 ,Pr…     

高效价鸡抗人精液血清的制备和应用

本文介绍一种制备高效价鸡抗人精血清的方法。给10只2kg 以上的公鸡同时静脉和肌肉注射5～10％混合人精液7～8次,获得特异性很强,效价达50,000倍左右的抗血清。通过实验和检案证明,对由于腐败污染、水浸或水洗而含微量精斑的检材,均能检出。     

两例强奸案中特殊生物检材的DNA检验

1案例案例1:某日晚11时许,某村发生一起上门抢劫强奸案。案犯在作案时,先将单身在家的被害人蒙面、捆绑住手脚,抢得财物后,又对被害人实施强奸。案犯离开后,被害人挣脱了绳索,但在报案前用水清洗了自己的大腿及会阴部,并洗涤了擦拭物品及床单。作者接案后,对被害人的阴拭、短裤等检材进行了检验,均未检见精子。后经询问了解,案犯在强奸过程中曾有过吮吸被害人两侧乳头的行为。用湿棉签轻轻擦拭被害人两乳后,采用Chelex法提取该擦拭物及被害人血样,用Profiler Plus进行扩增,ABI3100型测序仪电泳,分型结果(表1)表明:被害人两乳擦拭物中均检…     

VNTR-P~(33.6)基因座特殊变异1例

在近期受理的1例亲子鉴定案中,发现P33.6基因座的Amp－FI,P变异,现报道如下,供法医同仁们在实际办案中借鉴。l卖＊摘要1999年3月,某男（56岁,医生）和某女（52岁）协同“女儿”张某（女,33岁,干部）来本室做亲子鉴定。2DNA检验2．l检材可疑父亲某男（l号检材）、可疑女儿张某（2号检材）、可疑母亲某女（3号检材）各3mlEDTA抗凝静脉血。2．2DNA提取用酚、氯仿草取法分别从3份静脉血中提取DNATE溶解备检。2．3DNA检验2．3．IVNTR．PCR取l、2‘3号检材DNA样品,分别扩增pMCT“’、P3’‘、apoB三位点,扩增产物用5％T…     

QIAcube小型工作站在生物接触类检材提取中的应用研究

目的 探讨QIAcube工作站在生物接触类检材中的提取效果。方法 将90份以脱落细胞粘取膜、实物样本(纱线转移)或棉签擦拭物为载体的生物接触类检材,分别采用QIAcube工作站、EZ1工作站和手工硅珠法进行基因组DNA提取、定量并检测15个常染色体基因座的STR分型。结果 利用QIAcube工作站提取的生物接触类检材平均检出率达到44.4%,其中脱落细胞粘取膜组检出率为56.7%,实物纱线转移组检出率为46.7%,棉签擦拭物组检出率为30.0%。脱落细胞粘取膜组和实物样本(纱线转移)组均获得较好的STR分型结果,所得DNA浓度均优于棉签擦拭物组样本。QIAcube工作站组平均检出率为44.4%,手工硅珠法组平均检出率为43.2%,而EZ1工作站组平均检出率为26.9%,前两者平均检出率明显高于EZ1工作站组。QIAcube工作站组与硅珠法组所得DNA浓度无显著差异,但均明显高于EZ1工作站组。QIAcube工作站组与硅珠法组检测得到的STR分型RFU值及峰值均衡性均优于EZ1工作站组,尤其是大片段基因在前两组中均能够被完整检测到。结论 采用QIAcube工作站提取生物接触类检材检出率高,STR分型结果良好,可应用于法医物证实际案件检验。     

利用Y-STR检验直接侦破强奸杀人案1例

1案例资料易某某(女,8岁半),2006年1月27日失踪。3天后被人发现死于该村一废旧房屋内,死者下身赤裸,阴道口扩张,且多处撕裂,阴道口及臀部有大量分泌物,案件性质确定为强奸杀人。提取死者的阴道擦拭物等生物检材和排查出的12名重点犯罪嫌疑人血样,进行DNA检验。经检验从死者阴道擦拭物中检出精斑,但精斑与送检12名重点犯罪嫌疑人的基因型均不一致。进一步行Y-STR检验,结果12位犯罪嫌疑人与精斑的Y-STR基因型仍不一致,12名犯罪嫌疑人连同他们同一父系的所有男性个体均被排除。在进行更大范围的摸排后,再次送检16个父系个体的血样,进行Y-…     

精斑检材的3种提取方法比较

在日常检案中,精斑检材提取,常规应用Chelex-100法和酚/氯仿抽提法获得精子DNA。Chelex-100法耗时短,提取的精子的DNA量多,但所含的杂质也多,常影响扩增结果。酚/氯仿抽提法获得精子的DNA纯度高,但抽提过程中要用到有毒的化学制剂,消化、抽提耗时长,且抽提过程易造成DNA损失。本文直接应用磁珠法裂解提取精子DNA,获得优于Chelex-100法的高纯度的DNA,且把精斑的提取时间从酚/氯仿抽提法的2~3d缩减到7~8h。同时尝试了一步消化后的精斑检材,使用DNA自动工作站进行DNA提取,大大提高了办案效率。1材料与方法1.1精斑检材性犯罪案件中含…     

同胞亲缘关系认定排查犯罪嫌疑人

1案例2005年5月,本市居民冯某(女,48岁)在家中被杀。现场勘查时提取了死者心血(1号检材),死者阴道擦拭纱布(2号检材,经检验确定有精子),床边纸篓内红色卫生纸1张(3号检材,经检验确定有精子),另外还在书橱内提取了1张白色卫生纸,上有少量点状红色斑迹(4号检材,经检验确定为人血)     

混合精斑DNA三种提取方法的比较

在法医物证学上,对于混合斑检材,一般采用Chelex法[1,2]抽提DNA,由于得率和纯度较低,检测存在失败的可能。为了提高成功率,作者对检案过程中抽提DNA的步骤进行了优化,现报道如下。1材料与方法1.1检验材料1号检材为卫生巾,2号检材为卫生纸,3、4号检材均为蓝色内裤,其中3号检材较脏且混有血痕。分别剪取1～4号检材微量,涂片经伊红美兰染色,镜检,1、2、4号检材均检见人精子,3号检材检见大量上皮细胞及少量人精子。1.2仪器与试剂梯度PCR仪(德国,Eppendorf);DYY-Ⅲ-4型稳压稳流电泳仪(北京六一仪器厂);人STR六个双基因座复合扩增银染试剂…     

用斑点ELISA方法检测p30确证人类精斑

作者建立了检测精浆特异性抗原p30的斑点ELISA试验方法,确证人类精斑。p30最小检出量为0.4ng。用该法盲测了室温存放1年的生物性斑痕180例,无一例假阳性和假阴性,证明用此法确证人类精斑的敏感性和特异性均优于传统的方法,具有操作简便、快速,检材用量小,结果准确等优点。     

精斑检验干扰因素的研究

目的研究精斑检验中预试验与确证试验结果的关系,以及取材时间、生活习惯对确证检验结果的干扰。方法取376例阴道拭子,用酸性磷酸酶(ACP)染色法、斑点ELISA法和抗人精PSA金标试纸法检测检测精斑。结果ACP阴性时,可检出P30、精子,性生活后精斑确证检验大部分阳性检出分布在48小时以内样本中,结果经X2检验,P<0.01,差异性显著,而不同的生活习惯对P30检测具有显著性差异。结论研究结果对精斑的检验以及检材的提取具有推广应用和指导性意义。     

无精斑证据性犯罪案件其他物证DNA检验(附6例报告)

在性犯罪中最有效的取得证据的手段之一是对现场遗留的精斑及混合斑进行检验。但由于种种因素的影响 ,在实际检案中有许多性犯罪精斑检验为阴性 ,不能为性犯罪提供有力证据。笔者在性犯罪案件中注意提取与性犯罪有关的其他物证 (如血迹、唾液斑、阴毛等 ) ,通过作ＤＮＡ检验 ,为案件侦破提供了重要证据。现报告如下 :一、材料自我室自 1 997年 1月～ 1 999年 1 2月受理的ＰＣＲ检验强奸案件 6例 ,检材为血痕、唾液斑、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛等。二、方法1 .ＤＮＡ提取 :血痕、唾液、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛采用ｃｈｅｌｅ - 1 0 0…