应用酶联免疫吸附试验检测实验感染绵羊进行性肺炎病毒的山羊血清抗体

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）在接种绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）的山羊血清中可测到ＯＰＰＶ抗体。抗体的最早检出时间是接毒后的第１５ｄ，且４只接毒山羊都呈阳性反应。检测结果表明，ＯＰＰＶ可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应。试验所用的ＥＬＩＳＡ除可用于ＯＰＰＶ通过山羊体的传代研究之外，还可应用于绵羊进行性肺炎（ＯＰＰ）的诊断     

斑点ELISA检测鸡IBD抗体方法的建立及其应用

鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）是幼龄鸡的一种高度接触性传染病,是威胁养鸡业发展的主要传染病之一。ＩＢＤ抗体测定最初采用琼脂扩散试验（ＡＧＤ）,后来用中和试验（ＳＮ）。近年来酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）作为一种敏感、定量的诊断方法用于鸡群ＩＢＤ抗体的检测...     

鸡白痢沙门氏菌脂多糖的免疫效果观察

鸡白痢沙门氏菌脂多糖的免疫效果观察１）李肇增李凤华阎红霞韩菊英奥奕平张春莲（内蒙古畜牧科学院动物医学研究所呼和浩特０１００３０）笔者应用酸性α醋酸萘酯酶（ＡＮＡＥ）染色和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＳＰＦ雏鸡Ｔ淋巴细胞及抗脂多糖（ＬＰＳ）抗体...     

酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究

建立的检测猪生殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），其抗原包被浓度为１．７ｍｇ／Ｌ，血清的最适稀释度为１∶１００，酶标兔抗猪ＩｇＧ的工作浓度为１∶２０００。比较试验表明，ＥＬＩＳＡ的敏感性优于间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）。用ＥＬＩＳＡ检测１９９１年从美国进口猪的血清７６份，阳性率为零；１９９５年从加拿大进口猪的血清１６３份，阳性率为５．５２％；北京地区甲猪场的血清１２１份，阳性率为４７．１％；北京地区乙猪场的血清４３份，阳性率为４１．８％     

斑点酶联免疫吸附试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体方法的建立

首次建立了斑点－酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ，美洲株）抗体的方法。特异性鉴定表明，ＰＲＲＳＶ不与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒阳性血清反应；与美国进口的ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒检测结果比较，３５份猪血清的阴、阳性检出总符合率为８２．９％（２９／３５），其中Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性检出率略高于进口试剂盒的检出率     

现地马传贫琼扩阴性酶联免疫法阳性病马血清的特异性试验

在内蒙古牙克石市图里河镇非马传贫注苗区，用琼脂扩散试验（ＩＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）两种方法对６４匹马进行了对比检查，检出ＩＤ、ＥＬＩＳＡ双阳性马４匹、ＥＬＩＳＡ单阳性马３匹。对３匹ＩＤ阴性，ＥＬＩＳＡ阳性马血清用不同浓度琼扩抗原重复检测结果均为阴性，而用不同批次的ＥＬＩＳＡ抗原包被板及酶标抗体检测结果均为阳性，用马传贫病毒抗原对３匹单阳性马血清中和后，再进行ＥＬＩＳＡ测定，ＯＤ值均降低５０％以上。     

绵羊肺炎霉形体单克隆抗体的研制及初步应用

用绵羊肺炎霉形体（ＭＯ）抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，融合其脾细胞和ＳＰ２／Ｏ骨髓瘤细胞，筛选出６株分泌抗ＭＯ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系。用间接ＥＬＩＳＡ法对３株ＭｃＡｂ做特异性分析，该ＭｃＡｂ只特异地与ＭＯ抗原发生反应，而不与猪肺炎霉形体、山羊无乳症霉形体抗原发生反应。用检测ＭＯ抗体的间接ＥＬＩＳＡ与ＩＨＡ比较检测绵羊血清中抗ＭＯ抗体，前者的阳性检出率较后者高７．１４个百分点     

鸡传染性法氏囊病的快速诊断

应用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＦＭ＿１４）及其荧光标记物（ＦＭ＿１４－ＦＩＴＣ），对接种ＩＢＤ疫苗、强毒感染和自然病例鸡组织进行直接荧光抗体试验（ＤＦＡ）、斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳ－Ａ）和琼脂扩散试验（ＡＧＰ）三种检测方法的比较。结果表明，鸡接种疫苗后１０天内ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ均呈阳性反应，而ＡＧＰ只在接种后６～８天的样品中检出抗原。２２例人工感染鸡和４０例自然发病鸡组织的检测结果表明，ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的敏感性基本一致，且高于ＡＧＰ，它们的整鸡阳性率分别为９６．８％、９５．２％和３８．７％；所有的ＡＧＰ阳性标本Ｄｏｔ－ＥＬＩ－ＳＡ和ＤＦＡ均为阳性，后两种方法的符合率为８７％。９６批次（被检鸡群达３８７００头份）野外送检病例之脾、肺、肾和法氏囊组织切片ＤＦＡ阳性率分别为４０％，１１％、１０％和８８％，而总阳性率则为９５％。     

单克隆抗体阻断ELISA检测SPF猪与非SPF猪肺炎霉形体抗体的比较

单克隆抗体阻断ＥＬＩＳＡ检测ＳＰＦ猪与非ＳＰＦ猪肺炎霉形体抗体的比较严彩红刘志南（北京市ＳＰＦ猪育种管理中心１０００９５）猪霉形体肺炎是由猪肺炎霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｈｙｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）引起的一种慢性呼吸道传染病，带菌猪是主要传染源。...     

用酶联免疫吸附试验检测黄曲霉毒素

用酶联免疫吸附试验检测黄曲霉毒素＠陆建华＠倪正平＠黄飞＠张启南＠李文广＠陈建国￥江苏省启东肝癌防治研究所用酶联免疫吸附试验检测黄曲霉毒素陆建华倪正平黄飞张启南李文广陈建国（江苏省启东肝癌防治研究所２２６２００）笔者采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测江苏...     

诊断B组轮状病毒的三种酶联免疫方法的建立

用从当地分离鉴定的山羊Ｂ组轮状病毒ＫＢ－６３毒株，在剥夺初乳的山羊羔体内传代繁殖病毒，制备抗原，建立了酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）及生物素－亲和素系统酶联免疫吸附试验（ＢＡＢＥＬＩＳＡ）。这三种方法经阻断试验、重复性试验以及交叉试验表明，其特异性、重复性好。以双盲法将此三种方法与对流免疫电泳法（ＣＩＥ）和聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ＰＡＧＥ）作了对比研究，表明此三种方法均较ＣＩＥ和ＰＡＧＥ法敏感。用这三种方法对成人、婴儿、绵羊羔、山羊羔、仔猪的１２０份腹泻粪样（包括实验室接种材料）进行检测，三种方法的检出率分别为１６．７％、１８．３％、２５％，而ＣＩＥ和ＰＡＧＥ的检出率分别为１２．５％和８％。     

快速检测鸡新城疫病毒的聚乙二醇单抗夹心ELISA试验的建立和应用

以抗鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验为基础，在酶标抗体（ＨＲＰ－Ｆ＿（２３））稀释液中加入４％（ｗ／ｖ）聚乙二醇（ＰＥＧ）６０００，建立了ＰＥＧ－ＥＬ１５Ａ法，使用此法检测临诊样品，与单抗夹心ＥＬＩＳＡ相比，时间缩短７０分钟且提高了ＯＤ＿（４９０）值，易于识别。结果表明，ＰＥＧ－ＥＬＩＳＡ法具有实际应用价值。ＰＢＧ能加强抗原－抗体反应的速率和强度，这种效应在固相夹心ＥＬＩＳＡ第二步表现尤其明显。ＰＥＧ的这种非特异性效应对于检测其它抗原或抗体的ＥＬＩＳＡ试验可能具有普遍意义。     

斑点酶联免疫吸附试验检测牛羊捻转血矛线虫病的研究

应用斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测牛羊捻转血矛线虫病抗体，经对３９头剖检羊血纸检测，结果表明该法与剖检法的阳性符合率达１００％（２７／２７），阴性符合率也达１００％（１２／１２）。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ能检出第四胃寄生１～３３８条捻转血矛线虫羊的血清或血纸抗体；应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对５９９份牛、羊血纸的测定结果，与粪检法的阳性符合率达９５．５８％，阴性符合率达９１．４３％。初步认为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ作为牛、羊捻转血矛线虫病检测手段是可行的     

从鸡蛋和18日龄鸡胚培养鸡毒霉形体试验

从鸡蛋和１８日龄鸡胚培养鸡毒霉形体试验郭建华陈德威张冰（中国农业大学实验动物研究所１０００９４）赵良仓（山西省畜牧兽医学校鸡毒霉形体（ＭＧ）引起的鸡的慢性呼吸道病，给养鸡业造成严重的经济损失，特别是和其他呼吸道病原体混合感染时更是如此，而且这种病难以...     

鸡传染性鼻炎血清抗体间接ELISA诊断试剂盒的研究

鸡传染性鼻炎是由副鸡嗜血杆菌（Ｈｐｇ）引起的鸡上呼吸道传染病,有Ａ、Ｂ、Ｃ３种血清型,检测鸡血清中Ｈｐｇ抗体的方法有血清平板凝集试验（ＳＰＡ）、琼脂扩散试验（ＡＧＰ）、红细胞凝集抑制试验（ＨＩ）、间接ＥＬＩＳＡ（ＩＥＬＩＳＡ）和阻断ＥＬＩＳＡ（Ｂ?..     

排除ELISA检测畜禽血清中细菌性抗体的非特异性反应

自1971年Engvall和Van Weeman等建立酶联免疫吸附试验(ELISA)以来,在试验材料、技术等都在不断地改进、创新。应用ELISA的研究日益增多,本法已用于多种病毒、细菌、霉形体以及寄生虫抗原成份及其相应抗体的检测,范围日趋扩大。本文仅就ELISA检测畜禽血清中细菌性抗体,如何降低或排除非特异性的方法等作以简述。     

应用间接斑点酶联免疫吸附试验检测鸡减蛋综合征病毒抗原的研究

应用间接斑点酶联免疫吸附试验检测鸡减蛋综合征病毒抗原的研究孙刚潘兴广李英霞邢文杰朱琪（黑龙江省兽医卫生防疫站哈尔滨１５００３０）刘尚高张立昌（中国农业大学动物医学院）国内外对鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）进行了广泛的研究，已建立的检测ＥＤＳ－７６病毒抗...     

单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验现场诊断水牛日本血吸虫病

单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验现场诊断水牛日本血吸虫病为进一步验证单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）现场诊断耕牛日本血吸虫病的实用价值，笔者在安徽省望江县雷池、泊湖两乡与粪检法进行了同步双盲法检测。材料和方法对雷池乡３７头...     

抗兔轮状病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用小鼠骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）与经兔轮状病毒（ＬａＲＶ）免疫的ＢＡＬＢ／ｃ。系小鼠脾细胞进行融合，融合成功率为２２％。经间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）筛速杂交瘤细胞，阳性率为２９％左右。对其中６株强阳性的杂交瘤细胞进行了亚克隆，获得高产亚克隆杂交名细胞，用ＢＡＬＢ／ｃ小鼠生产了腹水，鉴定后选取２株强阳性高效阶的杂交瘤细胞，以ＥＬＩＳＡ阻断试验检验其分泌抗体的特异性，以直接ＥＬＩＳＡ测其敏感性，用琼脂双扩散试验鉴定类和亚类型别。结果１Ｂ＿３为ＩｇＧ，，２Ｂ＿４为ＩｇＧ＿（２ｂ）。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖和呼吸综合征病毒抗体的研究

应用间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖和呼吸综合征病毒抗体的研究查红波陈西钊张鹤晓１）蒋金书赵继勋蒋进（中国农业大学动物医学院北京１０００９４）自１９８７年在美国发现猪生殖和呼吸综合征（ＰＲＲＳ）以来，世界各地均有报道。迄今检测ＰＲＲＳ抗体的方法有间接免...