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(一)材料和方法1.材料:(1)实验动物:胆汁引流的健康成年猪6头(体重55~85kg),牛9头(体重230~350kg)。(2)药品:胆红素标准品:Sigma Co.(美国),批号266221。对氨基苯磺酸(A.R.):北京市朝阳区旭东化工厂,批号861103。注射用枸橼酸钠:中国医药工业公司上海第八制药厂。(3)器材:岛津UV-120型紫外分光光度计(日本),输液装置,采血瓶。2.方法:(1)自体溶血液的制备和输注:①采血:猪自前腔静脉,牛自颈静脉采血。先将2.5%~4%枸橼酸钠溶液按计划采血量的1/10加于采血瓶中,然后采血。每次采血量猪为100~200ml,牛100~150 相似文献
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水貂阿留申病(Aleutian disease)是水貂的一种慢性病毒性传染病。研究表明,对该病的被动和主动免疫均不能产生良好抗感染效果,反而使其病理过程加重。为此集中研究了各种特异性诊断方法,以淘汰阳性病貂,使貂群逐步达到净化。其中用对流免疫电泳(CIEP)诊断阿留申病已在加拿大、美国、丹麦、日本和苏联普及,并取得了控制和扑灭该病的良好效果。我们从1983~1985年在国内首次应用CIEP检测水貂阿留申病。 (一)材料与方法 1.被检血清:系由辽宁省金州外贸水貂饲养场和吉林省大安外贸水貂饲养场采得。从1983~1985年,在每年的11~12月份水貂取皮期进行趾尖或心脏采血,以3000rpm离心30分 相似文献
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禽的疫病普查、免疫状况检测、疾病诊断等都需要一种非致死性多次大量的采血法。虽然翅静脉、跖静脉和颈静脉都可穿刺采血,但常会引起皮下出血和血肿而使多次采血困难;仅管心脏穿刺采血可获得多次大量的血样,但采血难度大、死亡率高限制了这一方法的实际应用。本试验的目的在于观察鹅枕静脉窦的解剖结构,探讨多次大量采血的可行性、最大采血量以及多次采血的血清抗体效价。 (一)材料和方法 1.供试鹅与材料:供试鹅为当地品种成年白鹅,共64只。采血针为16号兽用针,其上装有自制的挡套,挡套可用螺旋调解,控制挡套外的针头长度。种毒为本校微生物实验室从凤阳分离的GP-FY_(80)毒株。琼扩试验抗原为本校微生物室制备。 相似文献
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五种重要猪病病毒基因芯片探针的建立及其应用 总被引:5,自引:0,他引:5
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病痛毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)的特异cDNA片段作为探针点制于氨基修饰的玻片上,以这5种细胞毒的核酸作为模板,进行不对称PCR扩增,制备靶物,经绿色荧光染料Cy3标记后,分别与cDNA微阵列的芯片探针进行杂交,杂交信号经Genepix 4000A扫描仪扫描.结果显示,该芯片探针可以特异地与Cy3标记的这5种靶物结合.用该基因芯片对100份现地采集的猪全血样品进行检测,检出PRRSV阳性样品26份,PCV-2阳性样品47份,PRRSV和PCV-2混合感染阳性样品17份,PPV阳性样品5份,PRV阳性样品2份,CSFV阳性样品20份.表明,本试验研制的cDNA芯片探针可以特异地检测这5种猪病病毒,具有良好的诊断应用前景. 相似文献
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应用抗牛白血病病毒(BLV)糖蛋白(gp~(64))抗原单克隆抗体(MAB)探针(Probes),分别检测了培养细胞、生物制品及感染牛羊组织内BLV抗原。结果:FLK/BLV细胞系中BLV抗原生成规律为,培养1~4天时,细胞系中BLV抗原分泌量依日递增,5~7天时,抗原生成量趋于平衡;通过对3批琼脂免疫扩散(AGID)诊断抗原的检测可进行质量评价;实验感染BLV传代绵羊淋巴细胞内BLV-gp抗原全部阳性;我国江南某奶牛场200头奶牛淋巴细胞样品中,75头样品BLV抗原阳性。检出率37.5%。AGID法检出BLV抗体阳性牛56头,检出率为28%。两种技术检测的符合率为88.5%;哈尔滨市郊某奶牛场100头奶牛淋巴细胞样品,抗原抗体检测均为阴性。本方法特异性、敏感性强,为地方流行性牛白血病(BEL)的检测开辟了新途径,建立了新技术。 相似文献
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对我场15年间(1969年1月~1983年12日)的绵羊病史资料做了整理分析,基本摸清了绵羊肠套叠的发生动态和发病原因。并认为早期手术是目前治疗本病唯一切实有效的措施。 (一)发病情况 自1969年以来,本场所饲养的5个品种羊群中,共发生肠套叠132例,发病率0.35%,死亡68头,致死率51.52%。分析发现本病的发生具有下述几个特点: 1.与季节的关系:绵羊肠套叠的发生具有明显的季节性。一般以冬季(11月~次年1月)发病为最高(57例,占发病总头数的43.18%),春季(2~4月)次之(40例,占30.30%),其次为夏季(5~7月 相似文献
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蓝舌病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 总被引:1,自引:1,他引:0
用将纯化的蓝舌病病毒(BTV)免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了3株(1F5、4E5和6A1)可以稳定分泌抗BTV VP7特异性单抗的杂交瘤细胞株.用纯化的BTV免疫家兔,按常规方法制备BTV多抗.选用抗VP7单抗(1F5)包被ELISA板,用兔抗BTV多抗作为捕获抗体,建立了BTV双抗体夹心ELISA检测方法.用该ELISA方法分别检测BTV、鹿流行性出血病病毒、水疱性口炎病毒、赤羽病病毒、小反刍兽疫病毒阳性样品.结果表明,该ELISA方法具有良好的特异性.用该ELISA和RT-PCR同时检测259份临床样品,ELISA的特异性和敏感性分别为99.1%和85.7%,两种方法的符合率为97.7%.该方法的建立为BTV的检测及蓝舌病的流行病学调查提供了有效工具. 相似文献
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1985~1991年青海省西宁市廿里铺园艺场畜牧一队初生黑白花犊牛发生一种以腹泻为主要特征的疾病,随机取粪样应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法确诊病原为犊牛轮状病毒,感染率为33.33%,试用抗体效价1∶64~128的羔轮状病毒(RV)高免血清对37头药物治疗无效的腹泻犊牛进行保护性试验,结果病犊牛获得全部保护。(一)材料与方法1.材料:(1)试验材料:从该场畜牧一队采集犊牛腹泻粪便9份,-50℃保存备用。(2)羔羊RV高免血清:由青海省畜牧兽医科学院羔羊病课题组制备。 相似文献
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将纯化猪囊虫、旋毛虫、弓形虫抗原分别定点包被于直径为5mm的混合纤维素酯微孔滤膜上,制成三虫组联快诊膜;自猪耳尖采取全血10μl作为Dot-ELISA检测样品,2小时内同时检测3种寄生虫病。以猪囊虫、弓形虫抗体阳性血清各90份、旋毛虫阳性血清26份进行检测,只在其相应位点呈阳性结果,无交叉反应;对720头份商品猪血清进行检测,其阳性检出率分别是:猪囊虫4.3%(31/720),旋毛虫0.14%(1/720)、弓形虫抗体阳性46.7%(336/720),与当地检出率平行:用350头商品猪的微量全血和其相应微量血清进行检测对比,结果猪囊虫阳性检出率,微量全血法为4.3%(15/350),微量血清法为4.6%(16/350),弓形虫抗体阳性检出率,微量全血法为45.7%(160/350),微量血清法为47.1%(165/350),经X~2检验,两种样品检测结果相差不显著(P>0.05)。 相似文献