F-2毒素检测方法研究——离心薄层层析法检测

采用离心薄层层析仪分离真菌毒素,国内外尚未见报道。我们试用离心薄层层析法分离真菌毒素F-2,以便探索新的真菌毒素检测方法。材料与方法(一)仪器 ①LBC-I型离心层层析仪;②紫外线分析仪。(二)洗脱展开系统 ①甲苯:三氯甲烷:丙酮(To:TC:A 3:15:1 V/V/V);②三氯甲烷:甲基异丁酮(TC:MIBK 5:1 V/V)。     

F-2毒素检测方法的研究——F-2的光谱分析

1986年我们从饲料中分离出引起奶牛流产的物质,其生物学特性及薄层色谱特征均被证明为F-2毒素。该物质分离的纯品进一步通过光谱分析,也确定为F-2。材料与方法(一)F-2样品的制备1.菌种:QFM-1和QFG-1。2.培养方法:大米50g加40％水,分装500ml三角瓶内,121℃高压灭菌30分钟,冷却后接上述菌种,27℃培养14天,15℃培养21天,25℃再培养14天。培养物取出后65℃烘干,球磨机粉碎后备用。3.提取制备F-2纯品:用正己烷和三氯甲烷提取,经离心薄层层析仪分离(以TO:TC:A=3:15:1 V/V/V为展开洗脱剂),刮取转子硅     

F-2毒素检测方法研究——薄层层析法定量

F-2(Zearalenone)的毒性已逐渐为人们所重视,其生产真菌在我国饲料中普遍存在。为制定饲料中F-2毒索卫生标准,研制饲料中该毒素最小检出量的检测程序,已势在必行。现将试验结果报告如下:材料与方法(一)F-2标准样员(SiGMA) 以三氯甲烷稀释成每微升含0.01、0.015、0.02、0.2μg 4个浓度。(二)薄层层析板制备 板20×5cm,SilicaGel G(粒度10～14μm)1.6g,加蒸馏水(或去离子水)8.5ml,充分研磨,铺板,静止4～6小时,110℃干烤1小时(或70～80℃干烤3小时)。(三)点样 以微量进样器吸取标准F-2溶液,在板下限上3cm处点样,每板等距点0.5、10、2.0、2.5μl5个点,每个标准F-2浓度点样10个板。     

抗弓形虫独特型抗体的研究——抗独特型抗体的制备及其免疫原性测试

用抗弓形虫单克隆杂交瘤细胞株(3C_2)扩大培养,于腹腔注射BALB/C小鼠诱生腹水,经3次饱和硫酸铵盐析,透析,DEAE-Sephadex-A_(50)离子交换层析,除菌,制得纯化McAb(Ab_1),蛋白含量2mg/ml,用福氏佐剂乳化后免疫健康家兔4次,放血分离血清,再经盐析和层析处理,制得多克隆抗弓形虫独特型抗体(Ab_2),用佐剂制备疫苗,3次免疫绵羊(5～10mg/只)2只。共采集4次血清,制得抗抗弓形虫独特型抗体(Ab_3),用IHA法检测抗体效价为1:64～1024。证实抗独特型抗体(Ab_2)是特异的,是能模拟弓形虫抗原,具有类似弓形虫免疫原性,并可激发宿主免疫应答产生抗体,进而证实独特型和抗独特型的免疫网络学说在弓形虫病免疫中的应用价值。     

用SPA-固相免疫电镜技术诊断犬细小病毒性肠炎

(一)材料与方法 1.被检粪样和肠内容物处理:新疆某警犬所出现呕吐、血样腹泻的病犬5只,采其粪样或病死犬肠内容物,分别编号为1、2、3、4、5号,按1/2(V/V)量加入0.01MpH7.6的PBS,充分振摇,冻融2次,再加入等量氯仿充分振荡后,3000rpm离心30分钟,吸取水相待检。 2.抗体:①西德产Magioban,该制品为含有犬瘟热、犬腺病毒肝炎、犬钩体、犬细小病毒的狗免疫球蛋白,批号为23795。②猫泛白细胞减少症阳性血清、南京农大蔡宝祥教授惠赠。     

玉米赤霉烯酮免疫检测技术研究——分泌抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用F-2-BSA人工抗原免疫Balb/c鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,建立6株分泌抗F-2毒素的McAb杂交瘤细胞株。用间接ELISA法测定,细胞上清液抗体滴度为2084~×(4H_8)、256~×(6H_9、4H_3、2H_5、2C_8)、16~×(3F_(10));腹水抗体滴度为10~(-9)(4H_3、4H_8),10~(-8)(2H_5)、10~(-7)(6H_9)、10~(-6)(2C_8)、10~(-5)(3F_(10))。用竞争间接ELISA法测定6株McAb对F-2毒素的敏感度为0.8～0.3ng/ml。该抗体与同系物(玉米赤霉烯醇)交叉反应率为9.0％～1.3％。6株McAb均属IgG类。细胞体外传代培养和冻存复苏后,分泌抗体稳定。纯化抗体在37℃保存12天稳定。     

亚非新书林

殖民主义史:总论卷高　岱、郑家馨著. -北京大学出版社,2 0 0 3 .1 . -3 71页;1 8cm .当代伊斯兰教法吴云贵著. -中国社会科学出版社,2 0 0 3 . 3 . -40 6页;2 0cm .当代伊斯兰原教旨主义运动蔡佳禾著. -宁夏人民出版社,2 0 0 3 . 8. -3 0 1页;2 0cm .伊斯兰宗教哲学史(上、中、下) 王家瑛著. -民族出版社,2 0 0 3 .9. -1 0 61页;2 0cm .中东非洲发展报告No 5 ( 2 0 0 1～2 0 0 2 ) 杨　光、温伯友主编. -社会科学文献出版社,2 0 0 2 . 9. -3 5 2页;2 0cm .中东非洲发展报告No 6( 2 0 0 2～2 0 0 3 ) 杨　光、温伯友主编. -社会科学文献…     

应用Dot-ELISA检测肉品中沙门氏菌

(一)材料与方法1.载体:硝酸纤维素膜(2×8cm),浙江黄岩四青生化材料厂产品。2.沙门氏菌多价抗血清:成都生物制品研究所产品,重庆肉联厂提供。3.参考菌株:沙门氏菌(A～F群),重庆肉联厂提供;金色葡萄球菌(1800株)、猪丹毒杆     

培养基质量与制备环境的关系

(一)材料与方法 1.生理溶液:灭菌Hank’s滤液100ml。灭菌干燥的脱脂棉签15支,用涂抹法采样备用。 2.培养基:无菌制备绵羊脱纤血30ml,再以无菌手续制备以1:2营养(牛)肉汤作基础的鲜血琼脂平板(SBAP)若干付,V_1/V计加血量7％、W/V计加琼脂1.6％,经15磅30分钟蒸汽消毒灭菌,终末pH7.6,专留10付作启皿采样用。     

动物组织黏菌素残留柱前衍生化高效液相色谱-荧光检测方法的建立

以100 mL/L的三氯乙酸-甲醇(体积比为50:50)混合液提取组织中的药物,采用C18固相萃取小柱净化,使用氯甲酸芴甲酯.在0.1 mol/L的硼酸缓冲液(pH10)中进行柱前衍生化,反应15 min,直接进样.荧光检测.激发波长为260 nm,发射波长为315 nm,流动相为V乙睛:V四氢吹喃:V水=87:4:13,流速为1 mL/min.动物组织中黏菌素含量为0.05～1.00 ug/g时,黏菌素的含量与其峰面积之间存在良好的线性关系(r2＞0.990),在猪、鸡的肌肉、肝、肾组织中按0.05、0.15、1.00 ug/g 3个添加水平做黏菌素的回收率试验,其回收率≥80%,变异系数≤12%.结果表明,该方法重复性好,灵敏度高,简便,可用于动物组织中黏菌素残留的检测.     

抗弓形虫单克隆抗体试剂的研究——分泌抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本研究选用了弓形虫QHO株活虫抗原免疫BALB/C小鼠,摘取脾细胞与SP_2/O骨髓瘤细胞融合,获得了分泌抗弓形虫McAb杂交瘤细胞株(2A_(11),3C_2)。其细胞分泌抗体效价为1:64(IHA),诱生腹水效价为1:1024和1:16384,经3个月连续培养和2次液氮冻存复苏培养,细胞生长良好,持续稳定分泌抗体效价不变,用诱生腹水经(NH_4)_2SO_4盐析、DEAE-Sephadex-A50层析和PEG浓缩,所得McAb致敏5％鞣酸化绵羊红细胞,与弓形虫可溶性抗原显示良好凝集效果,证明McAb与弓形虫可溶性抗原反应特异、敏感,并在血凝诊断试剂上具有应用价值。     

几种二甲苯胺噻唑类似物的合成及其镇痛、催眠作用的比较

为了寻找便于国内生产和临床应用的兽用镇麻新药,我们在合成隆膨(Rompun)的基础上进一步改变结构,合成了几种二甲苯胺噻唑类似物。 我们在本刊1977年第2期曾报道了2-(2·6-二甲苯胺基)-5·6-二氢-4H-1·3-噻嗪(简称2·6-二甲苯胺噻嗪)和2-(2·6-二甲苯胺基)-5-二氢-4H-1·3-噻唑(简称2·6-二甲苯胺噻唑)的合成方法及初步药理作用。并初步讨论了化学结构与药理作用的关系,验证了苯环上     

丁胺卡那霉素在奶山羊体内的动力学研究

本文报道了国产丁胺十那霉素在奶山羊体内的动力学及给药方案。通过对16头3～6岁泌乳萨能奶山羊单剂量(D=7mg/kg)肌注丁胺卡那霉素的药代动力学研完,其结果表明:血药浓度与时间数据符合一级吸收一室开放模型;吸收半衰期(T_1/2K_a),消除半衰期(T1/2K),峰时间(T_(max)),峰浓度(C_(max))和药时曲线下面积(AUC)分别为,0.16±0.08,1.47±0.26,0.57±0.20(hr),19.99±3.99(μg/ml)和51.46±9.07(μg/ml.hr);生物利用度为89.29±6.40％;根据单剂量给药参数和不同致病菌对丁胺卡那霉素的敏感性推算出多剂量给药参数,提出了治疗方案。以同样剂量对其中10头羊作静脉注射,药代动力学结果表明:血药时间数据符合二室开放模型,生物半衰期(T1/2β),AUC和C_0(零时药物浓度)分别为:1.40±0.51(hr),59.03±11.58(μg/ml.hr)和67.23±17.48μg/ml),对静注给药方案作了探讨。     

应用细胞培养技术测定伪狂犬病毒对不同消毒药的敏感性

有关资料介绍,伪狂犬病病毒(PrV)可适应于兔肾、鸡胚和猪肾等细胞,并致细胞发生特征性病变。据此,我们应用细胞培养技术对PrV对某些消毒药的敏感性进行了评价。同时对消毒药本身对细胞的毒性做了初步探索。 (一)试验材料: 1.毒株:系用我院余永建等(1984)分离的PrV Ncr-1株的第4代细胞毒,TCTD_(60)为10~(-7)。 2.单层细胞:应用1～5日龄乳兔原代肾细胞(BRK)。按常规法制备。 3.生长液:用日本进口的199粉,配成9.8g/1000ml,添加5～10％犊牛血清及双抗各100iu/ml制成。维持液为含2.0％犊牛血清的199液。     

非特异性酸性酯酶染色法测定长毛兔T淋巴细胞值

(一)材料与方法 1.动物:德中安哥拉杂交长毛兔50头,系上海县七一公社七宝五队饲养者,随机抽取,不分公母。平均体重3公斤。 2.试剂配药: (1)固定液(甲醛-丙酮缓冲液):磷酸氢二钠100毫克,磷酸二氢钾500毫克,无离子水150毫升,丙酮225毫升,40％甲醛125毫升,依次溶于无离子水内,再加丙酮和甲醛,充分混匀,置4℃冰箱内备用。     

牛肉汤的氨基酸分析

取新鲜牛肉若干,常规剔除脂肪筋腱血管等非肌肉组织,分成二份。处理方法稍作变动:1份置室温下加适量常水浸泡过夜,次日浸液以W/V1:2制备牛肉汤(CMI)(简称A组);另份未经浸泡置普通冰箱保存,以法制之(简称B组)。均文火煮1小时后双层纱布粗滤,俟温度至40～50℃时分装清洁三角瓶,15磅(1.02kg)121.3℃30分钟高压灭菌。在两组待测样品中分别加入0.5％氯仿防腐。将两组的新鲜配制样品和存放7个月的样品,用氨基酸自动分析仪(HITACHI 835—50型)分析18种氨基酸含量(μg/ml)结果。A组:     

鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系建立

(一)材料 1.病毒:传染性法氏囊病病毒F_(16)(IBDVF_(16))引自哈尔滨兽医研究所;新城疫病毒(NDV)由本所提供。 2.小白鼠骨髓瘤细胞系:NS-1和Sp 2/0均引自解放军兽医大学军事兽医研究所。 3.动物:8～12周龄BALB/C小鼠引自卫生部北京生物制品研究所。 (二)抗原制备 把IBDV-F_(16)经30日龄公鸡体内增殖后,收集病变明显的法氏囊制成乳剂,测其病毒滴度为10~7TCID_(50)/0.1ml,-30℃保存备用。使用时常规离心、硫酸铵沉淀、高速离心,同时用密度梯度超速离心制备纯化IBDV抗原。提纯后的抗原经磷钨酸负染,JFM—T电镜观察(放大117000倍),病毒粒子呈六角形,大小为60nm。提纯病毒的蛋白含量为3.25mg/ml。     

用高效液相色谱法测定跌打损伤颗粒中人参皂甙Rg1的含量

探讨了应用高效液相色谱法 (HPLC)测定跌打损伤颗粒中人参皂甙Rg1含量的方法 ,并对其含量进行了测定。测定条件 :色谱柱为Ultrasphere ODSC18柱 (4.6mm× 2 5 0mm ,5 μm ) ;流动相为V(乙腈 )∶V(水 ) =3∶7;检测波长 2 10nm ;流速 1mL/min ;柱温为室温。测定结果显示 ,人参皂甙Rg1的含量平均为 0 .5 67% ,平均回收率为 99.11% ,RSD为 0 .92 3%。表明该测定方法简便、灵敏、准确、快速、重现性好 ,可用于控制该制剂的质量     

EDS-JS9201毒株的分离和鉴定

1991年下半年,江苏一些地 区的鸡发生类似EDS_(76)的疾病。 我们在调查EDS_(76)来源时,分 离出一株病毒,定名为EDS-JS_(9201)。本文报告JS_(9201)毒株分离和鉴定的结果。 (一)材料与方法 1.病料:从江苏2个地区的4个鸡群采集发病鸡的输卵管和软壳蛋蛋清。用pH7.2 PBS制成1:2混悬液,冻融3次,加氯仿处理后,以3000r/min离心30分钟,上清液再用8000r/min离心30分钟,最后上清液加双抗作为分离材料。 2.鸭胚接种:将处理好的材料接种10日龄鸭胚,每胚尿囊腔接种0.2ml。接种后每日观察2次 并于96小时收获尿囊液继续育传,每次传代时     

2003年西亚非洲中文文献题录(二)

从“9·1 1”事件分析反恐怖主义与国际法 /赵绪生 //中东研究 . -2 0 0 3 ,(1 ) . -3 5 -3 9大冲击、大分化、大角逐、大变革———伊战后的中东形势走向 /董漫远 //国际问题研究 . -2 0 0 3 ,(5 ) . -1 2 -1 5 ,1 1论中东的战争与和平交往问题 :《中东国家通史·也门卷》编后三记 /彭树智 //人文杂志 . -2 0 0 3 ,(4 ) .-1 1 8-1 2 1“阿拉伯改革大合唱” ,是动真格的呢 ,还是一出骗人的把戏 ?/拉·寇里 ;戈　平译 //海外星云 . -2 0 0 3 ,(3 0 ) . -9-1 0试论一战后初期的库尔德民族主义运动 /陈天社 //世界民族 . -2 0 0 3 ,(3 ) . -2 1…