伪狂犬病病毒糖蛋白的研究进展

伪狂犬病病毒糖蛋白的研究进展向开军１）张楚瑜（武汉大学病毒研究所４３００７２）伪狂犬病病毒（ＰｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓＶｉｒｕｓ，ＰｒＶ）是引起家畜和野生动物Ａｕｊｅｓｚｋｙ′ｓ病（伪狂犬病）的一种疱疹病毒，其所致症状为神经功能失调、呼吸紊乱及繁殖障碍...     

猪伪狂犬病的诊治

伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ）又称Ａｕｊｅｓｚｋｙ氏病，最早于１８００年左右在美国发现，１９３９年由Ｌａｍｏｎｔ在爱尔兰东北部首见于猪。猪的狂犬病是由疱疹病毒Ⅰ型（ｓｕｉｄｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓⅠ）所引起的一种急性传染病，其危害仅次于口蹄疫和猪...     

三种不同方法检测猪伪狂犬病病毒血清抗体的比较

三种不同方法检测猪伪狂犬病病毒血清抗体的比较吴斌陈焕春方六荣李学伍周复春洪文洲（华中农业大学畜牧兽医学院武昌４３００７０）伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）引起的一种传染病，给养猪业带来巨大损失。对该病的诊断方法主要有病毒分离鉴定、动物接种试验、血清...     

用母猪抗血清预防仔猪伪狂犬病

用母猪抗血清预防仔猪伪狂犬病高跃（浙江省丽水地区农业局３２３００５）滕井修（日本千叶县东叶家畜诊疗所）１９９２年笔者在日本千叶县东叶家畜诊疗所研修期间，利用淘汰母猪制备抗血清进行仔猪伪狂犬病的预防效果试验，获得了满意效果。１材料与方法１．１猪伪狂犬病...     

猪伪狂犬病病毒的分离鉴定

猪伪狂犬病病毒的分离鉴定许伟琦朱璇孙泉云刘红刘佩红李维功沈莉萍（上海市畜牧兽医站２０１１０３）猪的伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）引起的一种危害严重的急性败血性传染病，主要以新生仔猪的急性死亡及４周龄以上的仔猪表现神经症状为特征。本病最早发生于美国...     

猪瘟与伪狂犬病混合感染的防制

猪瘟与伪狂犬病混合感染的防制费流芳，伍时达，吴虹黄万雄张英伟（广东省珠海市兽医防疫检疫站５１９０００）（珠海市平沙良种场）（珠海市矿山猪场）１９９３年１０月和１１月珠海市两个年饲养量达万头的猪场，先后发生了猪瘟（ＳＦ）和伪狂犬病（ＰＲ）混合感染的疫情...     

猪伪狂犬病的诊断

猪伪狂犬病（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ，Ｐｒ）是由伪狂犬病病毒（ＰｒＶ）引起的危害养猪业的主要疫病之一。母猪感染ＰｒＶ后表现为流产、死产或胎儿干尸化；仔猪常表现高热、食欲废绝、呼吸困难、流涎、呕吐、腹泻以及抑郁震颤，继而出现运动失调、间歇性抽搐、昏迷乃至死亡，其中１５日龄以内的仔猪死亡率较高。近年来，广东省Ｐｒ病例逐年增多，某些猪场受到严重经济损失。为了进一步了解Ｐｒ的流行情况以及为开展免疫预防提供依据，我们用直接免疫荧光抗体和动物接种试验对广东省５个猪场的流产胎儿与初生仔猪进行了Ｐｒ诊断。１　流…     

猪伪狂犬病的诊断和控制措施

伪狂犬病 (Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ ,ＰＲ)是由伪狂犬病病毒 (ＰＲＶ)引起的多种动物的一种急性传染病。猪伪狂犬病已在世界上 5 0多个国家和地区流行或暴发流行 ,近几年在我国也有不少集约化养猪场发生本病 ,但在甘肃省还未曾有此报道。 2 0 0 0年 3～ 4月 ,我省有 2个集约化养猪场相继发生了以初生仔猪在 3～ 4日龄突然整窝发生以呕吐、腹泻、出现神经症状和高致死率为特征的急性传染病。我们根据流行病学、临床症状和实验室检验结果确诊为猪伪狂犬病。1　发病情况Ａ猪场 :该场 1996年 6月投产 ,存栏母猪 3 0 0头。按常规免疫程序进行猪…     

应用地高辛探针诊断猪细小病毒病

利用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ）标记的ＰＵＰ重组质粒探针，分别对７株猪细小病毒（ＰＰＶ）分离毒及ＰＰＶＢＭ１株细胞培养物的ＤＮＡ抽提物进行斑点杂交，结果均为阳性，而对照的猪瘟病毒、伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）、乙型脑炎病毒及ＰＫ１５细胞为阴性；对７份ＰＰＶ自然感染病料进行处理，杂交结果为阳性反应，对照健康猪组织、猪瘟病料、猪伪狂犬病病料则为阴性。     

伪狂犬病病毒感染小鼠骨髓间充质干细胞的增殖特性

体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,用伪狂犬病病毒感染骨髓间充质干细胞,通过细胞病变观察、毒力测定、PCR及间接免疫荧光试验,评估了伪狂犬病病毒在间充质干细胞内的增殖情况。结果显示,经体外分离培养并鉴定的间充质干细胞感染伪狂犬病病毒后,产生典型的细胞病变;经毒力测定细胞内伪狂犬病病毒的TCID50效价较高;经PCR从间充质干细胞内成功扩增出伪狂犬病病毒的特异性片段;间接免疫荧光试验显示间充质干细胞内分布有特异性荧光。表明,该细胞适应伪狂犬病病毒在其上增殖繁衍,具有作为伪狂犬病病毒致细胞病变机理、潜伏感染及致病等机制平台的潜质。     

乳胶凝集试验检测猪伪狂犬病血清抗体的研究

用ＢＨＫ－２１细胞增殖猪伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）鄂Ａ株,病毒培养上清液经硫酸铵沉淀、聚乙二醇浓缩后与等量经胰酶处理的乳胶制成凝集试验抗原。此抗原与伪狂犬病标准阳性血清、免疫猪血清和临床发病猪血清以及新鲜血清样品均呈现明显的凝集反应;与标准阴性血清和临床未感染ＰＲＶ的猪血清均不发生凝集反应;与猪瘟阳性血清、衣原体病阳性血清均呈阴性反应。证实所建立的乳胶凝集试验具有微量、简便、快速、敏感性高、特异性强的优点,可用于伪狂犬病抗体的定性和定量检测,特别适宜基层现场检疫应用。     

猪伪狂犬病病毒FJNP株的分离鉴定

从福建省某猪场采集的发病仔猪大脑和内脏病料中分离到一株病毒。病毒接种PK细胞的结果显示,PK细胞出现典型的细胞病变;PCR反应扩增出特异性的片段,与经典毒株闽A株一致;免疫荧光试验中出现绿色荧光;病毒接种家兔后引起典型的伪狂犬病症状并死亡。上述结果充分证实,本研究分离的毒株为伪狂犬病病毒,随之将其命名为伪狂犬病病毒FJNP株。本研究结果丰富了福建省伪狂犬病流行病学资料,为开发猪伪狂犬病病毒新型疫苗提供了依据。     

猪伪狂犬病病毒环介导等温扩增检测方法的建立

针对猪伪狂犬病病毒gE基因保守区域设计并合成了4条引物,建立了伪狂犬病病毒的环介导等温扩增检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,该方法可特异性地检测猪伪狂犬病病毒强毒株,不能检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株;该方法的最低检测量可达100个拷贝质粒DNA,比常规PCR方法的敏感性高10倍。试验表明建立的环介导等温扩增方法具有较高的特异性、敏感性和可重复性,可用于伪狂犬病病毒的快速诊断。     

伪狂犬病病毒野毒株新型可视化环介导等温扩增检测方法的建立

利用环介导等温扩增（LAMP）与pH指示剂结合的方式建立伪狂犬病病毒（PRV）野毒株的快速检测方法，并优化反应体系。结果显示，该方法特异性良好、敏感性较高，检测限达 10~(0.5) TCID_(50)，与荧光定量PCR的敏感性一致。对52 份临床样品进行检测，用荧光定量PCR检测出30份阳性样品，LAMP检测出27份阳性样品，二者的符合率为94.2%。结果表明，PRV野毒株新型可视化LAMP检测方法操作简便、结果判别明显、检测成本低，可预期应用于PRV带毒猪的快速筛查，这对于猪伪狂犬病的净化具有重要意义。     

猪伪狂犬病的诊治

猪伪狂犬病的诊治１９９４年２月初，某猪场爆发了以幼猪为主的具有神经症状的疾病，病死率高达１００％。经过流行病学、病理剖检、微生物学试验、动物试验、血清学试验确诊为伪狂犬病，经过严格消毒，对２０日龄以上的猪及产前１０～２０天的妊娠母猪接种伪狂犬病疫苗，...     

新生仔猪伪狂犬病的诊断与防制

新生仔猪伪狂犬病的诊断与防制李学伍陈焕春１）杨艳艳方六荣１）吴斌１）周复春１）索绪峰１）（河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州４５０００２）１９９５年３～７月，湖北省某地养猪场的５０窝仔猪共５１１头，整窝发病、死亡，发病率和死亡率均为１００％，而产仔母...     

陕A株伪狂犬病病毒的分离与鉴定

陕西省大荔县八鱼公社西营大队的耕牛于1978年2月底发生疫情。经过对疫情的调查与研究,已诊断为牛伪狂犬病(Pseudrabies)或称奥叶兹基氏病(Aujeszkys disease)。由于牛伪狂犬病在西北地区未见报道,陕西省仅初次发生,因此,有进一步分离培养病毒的必要。其二,为了准备应用福建省兽医生物药品厂制造的牛伪狂犬病疫苗,故有目的地通过闽A株伪狂犬病病毒的免疫血清鉴定陕A株伪狂犬病病毒,为今后有效控制此病提供可靠的依据。所以,将采取的病料进行了伪狂犬病病毒(以下简称PrV)的分离与鉴定。现将结果报告如下。     

伪狂犬病病毒gB抗原的可溶性原核表达及纯化条件的优化

为实现伪狂犬病病毒gB蛋白的可溶性表达,基于伪狂犬病病毒gB基因的序列分析及密码子优化,基因合成gB基因胞外区(含全部抗原表位)序列,亚克隆至原核表达载体pSMK中,获得表达载体pSMKgB。经大肠杆菌诱导表达,并对诱导温度、可溶性、IPTG加入时机、终浓度及诱导时间进行优化。结果表明,伪狂犬病病毒的gB蛋白在16℃、D600值为1.2、IPTG终浓度为0.8mmol/L的条件下,诱导20h,蛋白表达效果最好。经超声破碎,镍柱纯化可获得可溶性的gB蛋白。蛋白印迹法分析结果表明,纯化的目的蛋白能与抗组氨酸标签的抗体及猪伪狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性。本研究为后期制备猪伪狂犬病血清检测ELISA试剂盒奠定了基础。     

伪狂犬病病毒分子生物学的研究进展

介绍了伪狂犬病病毒基因组的特点及编码蛋白,论述了伪狂犬病病毒分子生物学诊断方法,包括核酸探针诊断方法、PCR诊断方法、LAMP诊断方法、鉴别诊断方法,并就其基因工程疫苗方面的研究进行了着重阐述。     

伪狂犬病毒弱毒株培育的研究

伪狂犬病(Pseudorabies)是伪狂犬病毒引起的各种家畜和野生动物的急性、致死性传染病。1902年匈牙利科学家奥者士奇(Aujeszky)发现此病以来,世界许多国家都有发生。我国不少地区有发生本病的报道。但是,伪狂犬病毒弱毒疫苗株的培育研究未见报告。为了防制本病,我们于1979年采用选斑和低温法选育伪狂犬病弱毒株,经三年时间,育成伪狂犬病毒闽A弱毒株。