复方中草药注射液提取工艺的改进

复方中草药注射液提取工艺的改进伍莲王明德莫昌兰何富强（四川畜牧兽医学院荣昌６３２４６０）在中草药注射液的生产中，影响其澄明度和稳定性的主要因素是药液的杂质及其有效成分的性质。清除杂质是提取工艺的关键，常用的方法有醇沉淀、明矾沉淀、酸碱沉淀、明胶沉淀、...     

中草药对乳牛乳腺炎主要病原菌的体外抗菌活性试验

采用试管二倍稀释法,测定了金银花、连翘和蒲公英等12种中草药及其复方制剂对乳牛乳腺炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌)的体外抗菌活性(MIC和MBC)。试验结果表明,金银花、连翘和蒲公英及其复方制剂对这4种病原菌均具有较强的体外抗菌活性。     

用响应面法优化四黄止痢复方中药提取工艺

为制备四黄止痢复方中药并建立其高效液相色谱(HPLC)检测方法,在单因素试验的基础上,以浸渍时间、料液比[质量(g)体积(mL)比]、甲醇体积分数为自变量,黄芩苷、盐酸小檗碱质量浓度及干膏率综合评分为因变量,采用HPLC法测定其质量浓度,响应面法进行试验设计、建立数学模型,并进行预测分析。结果显示,四黄止痢复方中药的最佳提取工艺为浸渍时间146 min、料液比1︰333、甲醇体积分数80%。建立的HPLC色谱条件为色谱柱Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 m),流动相甲醇(A)-0.1%磷酸水(B)梯度洗脱,检测波长278 nm,流速1.0 mL/min,进样体积10 L,柱温25℃。结果表明,用响应面法优化的四黄止痢复方中药提取工艺,方法简单,精密度高;所建立的HPLC法可用于四黄止痢复方中药的检测。     

大青叶中4(3H)喹唑酮提取工艺的研究

将4(3H)喹唑酮含量作为大青叶的质控指标,采用正交试验方法考察了药材粒度、提取溶荆、提取时间、溶剂倍量等因素对提取的影响.分别进行热回流提取、超声波提取和微波提取工艺研究,优选4(3H)喹唑酮的最佳提取工艺条件.结果表明,在提取因素方面,药材粒度是热回流提取的主要影响因素,溶剂倍量是微波提取的主要影响因素,乙醇浓度是超声波提取的主要影响因素.当以提取速率(提取率与提取时间的比值)为分析指标时,微波提取工艺要明显高于其他提取工艺,超声波提取工艺次之.三种提取方法中,热回流提取工艺的提取率最高,其最佳工艺条件为A2B3C1D1,即药材粒度0.30 mm、700 mL/L乙醇、热回流时间1 h、8倍量溶剂.     

恩诺沙星注射混悬剂的研制及药物含量测定

以恩诺沙星和林可霉素为主药 ,以多因素正交设计优选配方 ,采用分散法制备了复方恩诺沙星注射混悬剂 ,并用紫外 可见分光光度计测定了恩诺沙星含量。结果显示 ,按照优选条件制备的混悬剂样品具有通针性好、不结块、易重分散的特点 ,可方便注射给药。所制备的恩诺沙星浓度分别为 40mg/mL和 80mg/mL的混悬剂样品 ,经 180d室温下储存 ,药物含量无明显改变。     

黑种草子总皂苷和总黄酮提取工艺优化

为了优选能同时提取黑种草子中的总皂苷和总黄酮的提取工艺,采用L9(34)正交试验法,通过考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数,以总皂苷和总黄酮含量为工艺选择的评价指标,进行了黑种草子提取工艺的研究。结果表明,最佳提取工艺为8倍量的60%乙醇回流提取2次,每次1 h。该提取工艺稳定可行,可用于黑种草子总皂苷和总黄酮的同时提取。     

沃尼妙林注射液的研制

以含量测定为指标,通过均匀设计试验进行处方筛选,同时优化制备工艺;用高效液相色谱(HPLC)法对沃尼妙林注射液的含量进行检测;通过经典恒温加速试验,进行初步的稳定性试验研究.结果,优选得到的注射剂的工艺处方组成稳定.HPLC法的回收率为99.59%,检测限为0.030 4 μg/mL,定量限为0.085 2μg/mL,回归方程y=1E+06x-25 120,相关系数r2=0.999 7.结果表明,研发的沃尼妙林注射液较稳定,适合产业化生产.     

复方苦芩对小鼠免疫功能及犬IL-4 mRNA和IFN-γ mRNA表达的影响

为了探讨复方苦芩对免疫低下小鼠免疫功能和对犬细胞因子IL-4mRNA、IFN-γmRNA表达的影响,将120只小鼠随机分为空白对照组、模型组(环磷酰胺造免疫低下小鼠模型,不给药)、阳性药物对照组(黄芪多糖注射液)、复方苦芩制剂高、中、低剂量组,连续给药7d,给药后,除空白对照组外,各组腹腔注射环磷酰胺0.2mL(80mg/kg)制造免疫低下模型,1次/d,共3d。于末次给药后第1小时,测定碳粒廓清指数、脾指数、胸腺脏器指数及T、B淋巴细胞转化率;建立犬细小病毒模型,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察复方苦芩对犬细胞因子IL-4mRNA、IFN-γmRNA表达的影响。结果显示,复方苦芩能增加小鼠脾指数和胸腺指数,明显增加T、B淋巴细胞的转化率和碳清值,降低犬细小病毒引起的犬血清细胞因子IL-4含量及其mRNA表达的增加,升高犬细小病毒引起的犬血清IFN-γ含量及其mRNA表达的降低。结果表明,复方苦芩具有增强小鼠非特异性免疫功能,降低犬血清细胞因子IL-4含量及其mRNA的表达,升高犬血清IFN-γ含量及其mRNA的表达的作用。     

马香苓口服液制备工艺的优化

为优化马香苓口服液的制备工艺,并最终确定其制备路线,采用水蒸气蒸馏法和水煎提取法两种提取工艺,使用L9(34)正交试验法设计考察加水量、浸泡时间、蒸馏时间、煎煮次数和煎煮时间等影响因素,并计算挥发油得率、浸膏得率、百秋李醇和白术内酯Ⅲ的含量,同时考察了静置温度和静置时间对澄清度的影响和助溶剂吐温-80的用量。经过直接观察、极差分析和方差分析,确定了药材挥发油的最佳提取工艺为加10倍水,浸泡1 h,蒸馏8 h;水煎煮提取的最佳工艺为加12倍水,煎煮3次,每次1.5 h;药液冷藏静置12 h,以4 000 r/min离心15 min澄清度最好,1.5%吐温-80与挥发油先乳化,再与其他药物混合,可使挥发油完全溶解;最终经过调节pH、加防腐剂等便可得到成品的马香苓口服液。本研究方法准确稳定,简便可行,能够很好地制备马香苓口服液,同时本研究也为该制剂质量控制提供了一种有效的方法。     

野生鸡枞菌多糖的提取及其免疫活性分析

采用水提醇沉法获得鸡枞菌多糖,并对其总糖含量进行了测定;研究了不同剂量的鸡枞菌多糖对正常小鼠的免疫器官指数、血清溶血素水平、腹腔巨噬细胞吞噬功能及脾淋巴细胞增殖等免疫指标的影响。结果:鸡枞菌多糖得率为6.27%,总糖含量为94%;根据体重腹腔注射20mg/kg的鸡枞菌多糖可明显提高正常小鼠的溶血素水平(P<0.01)、脾指数(P<0.01)、胸腺指数(P<0.05)和巨噬细胞吞噬功能(P<0.01);体外试验中,与空白对照组相比,25μg/mL的鸡枞菌多糖可促进体外脾淋巴细胞增殖(P<0.05),12.5μg/mL鸡枞菌多糖对ConA或LPS引起的脾淋巴细胞增殖均有显著的协同作用(P<0.01)。结果表明,鸡枞菌多糖能显著增强小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,有望成为一种新的天然免疫增强剂。     

鸡骨钙素多克隆抗体及其间接竞争ELISA试剂盒的制备与应用

为了建立鸡骨钙素间接竞争ELISA检测方法,使用原核表达的重组鸡骨钙素蛋白作为免疫原,免疫4只雄性新西兰大白兔,成功获得兔抗鸡骨钙素多克隆抗体。该抗体能用于Western-blot检测天然骨钙素。以天然提取的鸡骨钙素为包被抗原,葡聚糖A亲和纯化后的兔抗鸡骨钙素多克隆抗体为一抗建立ELISA反应。结果,最佳包被抗原浓度为0.5μg/mL,最佳抗体工作浓度为1∶10 000,标准品浓度在50～0.39ng/mL间,具有较好的线性关系,检测下限为0.34,批间变异系数和批内变异系数分别为10.6%和4%。使用制备的试剂盒测定30个鸡血清样本及其倍比稀释后的血清样本;结果,鸡血清骨钙素浓度为4.42～19.83ng/mL,稀释前与稀释后测定的血清样本浓度相关性r2=0.952。结果表明,制备的鸡骨钙素间接竞争ELISA试剂盒可用于定量检测鸡血清骨钙素含量。     

头孢噻呋钠纳米脂质体的制备及表征

优选头孢噻呋钠纳米脂质体的处方工艺并对其理化性质进行考察,为奶牛乳房炎的治疗提供参考。以无水乙醚为助溶剂,磷酸缓冲液(PBS,pH=6.3)为水化剂,采用逆向蒸发-薄膜分散法制备头孢噻呋钠纳米脂质体。以头孢噻呋钠与卵磷脂质量比、卵磷脂与胆固醇质量比、无水乙醚与PBS的体积比为考察因素,包封率为评价指标,采用L_9(3~4)正交试验设计优选处方。利用紫外分光光度法测定头孢噻呋钠含量,超滤离心法测定头孢噻呋钠纳米脂质体的包封率。以纳米激光粒度仪测定脂质体的粒径,光学显微镜和透射电镜观察其形态,体外释药曲线计算脂质体的累计释放率。结果显示,头孢噻呋钠纳米脂质体的最佳处方工艺为膜材比为4∶1,药脂比为1∶5,有机相与水相的比为3∶1。所得脂质体包封率为61.8%±1.14%,平均粒径为86.74 nm,多分散指数(PDI)为0.23。头孢噻呋钠纳米脂质体标准曲线为A=24.549C+0.1246,平均回收率为98.44%,RSD均小于1%。头孢噻呋钠纳米脂质体在6 h内累计释放率为65%以下,而同样时间内头孢噻呋钠累计释放率超过80%,头孢噻呋钠纳米脂质体的释放率较头孢噻呋钠更缓慢。结果表明,以逆向蒸发-薄膜分散法制备的头孢噻呋钠纳米脂质体较头孢噻呋钠有缓释性。其形态为椭圆、均一无黏连聚集的球形,粒径分布均匀、包封率高。