绵羊夏柏特线虫和叶氏夏柏特线虫线粒体nad5基因和cytb基因的序列分析

本研究的目的是通过对绵羊夏柏特线虫和叶氏夏柏特线虫线粒体细胞色素b基因(cytb)部分序列(pcytb)和烟酰胺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位5基因(nad5)部分序列(pnad5)的克隆和遗传变异分析,首次为在分子水平上区分绵羊夏柏特线虫和叶氏夏柏特线虫提供理论依据。采用PCR方法分别克隆了6条绵羊夏柏特线虫陕西分离株和9条叶氏夏柏特线虫青海分离株的pcytb和pnad5。将测序结果应用ClustalX 1.81程序进行比对,然后用PAUP 4.0程序中的MP法将pcytb和pnad5串联后构建系统发育树。结果显示,获得的pnad5和pcytb序列的长度分别为388bp和659bp,其变异率在绵羊夏柏特线虫分离株中分别为0.3%~1.3%和0.2%~2.6%,在叶氏夏柏特线虫分离株中分别为0~1.8%和0.2%~1.2%,较为保守。但pnad5和pcytb序列在两种间差异率较大,分别为14.7%~16.0%和15.0%~17.3%。用pcytb和pnad5串联后的序列进行的种系发育分析表明,绵羊夏柏特线虫和叶氏夏柏特线虫分别位于2个分支,支持叶氏夏柏特线虫为独立种;pcytb和pnad5序列可作为夏柏特线虫种间鉴定的遗传标记。     

我国耳萝卜螺ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析

以采自我国黑龙江省大庆市的耳萝卜螺样品为研究对象,利用核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区序列(ITS)的遗传标记特点,用保守引物BD1和BD2对rDNA内转录间隔区(ITS)及5.8S序列进行PCR扩增,扩增纯化后克隆至pMD18-T载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对阳性菌落进行测序和分析。结果显示,所获得的23个耳萝卜螺样品的ITS及5.8SrDNA序列总长度为1 124～1 130bp,存在一定差异,包含ITS-1(548～551bp)、5.8S(175bp)、ITS-2(399～404bp)序列。23个黑龙江省耳萝卜螺之间ITS-1序列的相似性在98.3%以上,ITS-2序列相似性在98.2%以上;而与GenBank中其他椎实螺的ITS-1序列的相似度低于75.6%,与ITS-2序列的相似度低于83.1%。由于耳萝卜螺ITS序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为椎实螺种间遗传变异研究的标记。本研究结果为耳萝卜螺的分类鉴定以及进一步的分子流行病学研究奠定了基础。     

猪札幌病毒VP1基因的表达及ELISA抗体检测方法的建立

为了在大肠杆菌中表达猪札幌病毒VP1基因,并以纯化的重组蛋白为抗原建立猪札幌病毒血清抗体ELISA检测方法。采用RT-PCR技术扩增VP1基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,再将所克隆的衣壳蛋白的编码序列亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,将成功构建的原核表达质粒pETSAVCAP转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。用纯化的VP1蛋白作为抗原建立了猪札幌病毒血清抗体间接ELISA检测方法并初步用于临床样品的检测。结果显示,猪札幌病毒VP1基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达,Western-blot分析表明该重组蛋白具有良好的反应原性。经对反应条件进行优化,确定间接ELISA的抗原最佳包被浓度为0.5μg/mL,且不与其他常见猪病的阳性血清发生交叉反应,建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。通过对从多个省份收集的490份猪血清样品进行检测,阳性率为65.31%。表明,以大肠杆菌表达的猪札幌病毒VP1重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可以用于猪札幌病毒抗体的检测。     

透视二战后日本对华公共外交

二战后,日本对华政治、军事外交的开展受到国际社会和国际法的极大限制,公共外交就成为重塑其在中国的形象、重新赢得中国的理解与信任、促使中国奉行符合日本利益的温和政策的重要途径。通过人员与文化交流、经济与文化援助、外向型的文化教育、对华宣传以及动漫外交等手段,对华公共外交在政治、经济、文化等方面取得了很大成就。但受其独特政治文化及国内右倾化思潮的影响,以及中日两国意识形态、价值观、发展战略等方面矛盾的制肘,日本战后对华公共外交并没有达到预期的效果。     

豪猪血蜱的形态学和分子生物学鉴定

为豪猪血蜱的鉴定提供准确依据,从湖南省怀化地区猪獾体表采集蜱,运用体视显微镜超景深系统观察其形态学特征;提取蜱体壁总DNA,经PCR扩增测序获得其COX1、ITS2和16SrDNA基因序列,与GenBank数据库中序列比对,并构建系统发育树,进行同源性分析.结果显示,该蜱种雌蜱呈南瓜子形,前窄后宽;假头基为矩形,基突后...     

旅游目的地形象内涵及形成机理

形象是旅游目的地的生命,也是形成竞争优势最有力的工具。关于目的地形象的定义很多,如何评价这些定义以及良好的目的形象是怎样形成的。具有哪些影响因素等都是旅游目的地研究中十分重要的课题。     

贯彻科学发展观做好党委领导工作

胡锦涛同志强调,各级党委是部队建设的领导核心,是贯彻落实科学发展观的组织者和领导者。各级党委要把科学发展观贯彻到党委领导的全部工作中去,以领导工作科学化水平的提高来推进部队建设的全面、协调和可持续发展。一、出主意是党委领导的核心,党委工作贯彻科学发展观要坚持民主科学决策科学发展观在部队建设中的全面贯彻落实,是通过党委出主意、作决策来实现的。把科学发展观贯彻到党委工作中,核心是坚持民主科学决策。要强化民主科学决策的意识。要把民主贯穿于党委决策的全过程,在发扬民主的基础上集中集体智慧,以广泛的民主保证党委决…     

史老汉有个好女婿

南京调速电机厂工程师张国才与史文富老汉的女儿史彩云本是一对恩爱夫妻。史彩云不幸于1972年去世，撇下了一对年幼的儿女和年老耳聋的爹、张国方毅然挑起这副沉重的生活担子，拉扯小儿女．照顾老岳父。8年后，张国良与小学教师曾宪苹再结良缘，有人以为史老汉这下不仅失去女儿，也要失大女婿厂。然而，重建家庭并没有冲淡张同才对老人的一对爱心．他还为老人“赚”回一个女儿。曾宪苹温柔贤惠．冈张回才一样孝敬老人。每遇假日，张国才总要带妻子、背着女儿从市区来到郊区．为老人洗衣洗被做家务，给他捎上一点吃的和穿的，奉上一份浓浓的…     

生命为人民燃烧──记杰出法官谭彦

生命为人民燃烧──记杰出法官谭彦张佩霞，刘国华，杨迎秋７年前，一位重病缠身的年轻法官接到医生一纸“宣判”──如果不“长期全休治疗”，“最多只能活５年”。然而，这位法官没有接受医生的忠告，把生死置之度外，头顶国徽，肩扛天平，坚守岗位，兢兢业业，忘我工作...     

商品房售后保修义务的立法完善——创“和谐社会”之要举

我国房地产市场正走向成熟,但目前商品房售后保修义务中“质量问题”的举证责任分配法律尚未明确规定,再加上其他诸因素,使现实生活中开发商运用推委、拖延战术将保修责任及成本非法转借给“相对弱势业主群体”的案件大量出现。文中分析了该现象的本质、后果、成因及目前可行而又不足的保护途径;运用传统法理学与新兴法经济学方法,对立法完善的必要性、可行性进行了探讨,并提出了相应立法建议;最后指出该立法完善对创“和谐社会”、建“诚信中国”的重要意义。