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猪细小病毒SC-1株VP2基因的定点突变及其对该基因表达的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
根据GenBank中的猪细小病毒(PPV)VP2基因序列设计并合成了2对突变引物,对PPV SC-1株VP2基因进行了定点突变.利用重叠延伸PCR技术分别将VP2蛋白中第402位(A)和214位(B)的半胱氨酸突变为精氨酸,并定向克隆入真核表达载体pPI-2.EGFP中,构建含报告基因EGFP的重组质粒pPI-2.EGFP.VP2(A)、pPI-2.EGFP.VP2(B);利用脂质体介导法将上述重组质粒转染COS-7细胞,从而研究该突变对VP2基因表达的影响.结果显示,成功构建了合突变体及EGFP的真核表达载体;在倒置荧光显微镜下,突变后的质粒转染呈现不同的荧光信号,A样品的荧光呈颗粒状分布于细胞中,而B样品与阳性对照相似,荧光信号均匀分布于细胞中.提示,突变的引入是导致表达差异的主要原因. 相似文献
84.
师生和谐——提高教学质量的重要原则 总被引:3,自引:0,他引:3
朱玲 《中国青年政治学院学报》2006,25(5):124-128
师生和谐,首先要求教师自身各方面的和谐。它需要把职业道德和父母情怀融为一体,处理好师生间的伦理关系,营造轻松愉快的课堂气氛,处理好教与学的关系,促进学生的主动发展,重视教学中的精神交流,达到师生相得益彰的状态。师生和谐是在不断解决矛盾的过程中形成的一种动态的和谐,它是非强制性的一种理念,比强制性的规范更具有长效深入的功能,应成为教育教学永远追求的一个目标。 相似文献
85.
谁来为农民看病吃药提供社会保障 总被引:3,自引:0,他引:3
我国部分地区农村低收入人群有病看不起病的现象在逐渐增加,改革和重建乡村合作医疗制度的努力收效不显。1998年,合作医疗制度的人口覆盖率在高收入地区达22.2%,但在中等和欠发达地区仅为l-3%。 改革和重建村级合作医疗制 度,是从上到下关注解决的 基本医疗保障难点问题。近些年来,全国各地区都展开了与此有关的制度试验,然而维持试验的运转不易,大面积推广更是举步维艰。 在农村社会经济组织结构发生巨大变化的今天,怎样建立适应于这种变化的基本医疗保健保障制度?笔者自1999年11月起,在浙江的鄞县、安徽的宣… 相似文献
86.
就业中的性别差异在我国是一个长期存在的现象,这种现象的产生受多种因素的影响,比如传统思想等,对人才结构的平衡发展起到非常不利的影响。因此,社会、高校、大学生都应该积极探索原因及相应的对策。 相似文献
87.
切实加强和改进大学生思想政治教育,是培养社会主义合格建设者和可靠接班人、确保党和国家命运前途的重大问题。高校图书馆作为第二课堂,在大学生思想政治教育中担负着越来越重要的角色,具有开展大学生思想政治教育的独特优势。 相似文献
88.
提高大学生毕业论文质量的路径 总被引:6,自引:0,他引:6
朱玲 《中国青年政治学院学报》2009,28(2)
本科生毕业论文的研究写作,受高等教育形势和大学生就业形势变化的影响,困惑和问题日益增多,需要因势利导,抓表治本.明确论文的定位和指导原则,使之切实有效.适应社会变化,调整组织管理措施;提高答辩质量,形成良性反馈.注重教学的有效性,奠定学生厚积薄发的基础.从不同的路径入手,综合治理,才能实现培养目标. 相似文献
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用含刀豆蛋白的营养液培养大熊猫外周血中分离的淋巴细胞,72h后抽提RNA。设计1对引物,通过RT-PCR方法对大熊猫GM-CSF基因片段进行扩增。测序后对其进行分析,并将该序列克隆到pCI-neo真核载体中,命名为pCI-G,然后免疫健康小鼠,同时设立pCI-neo载体和PBS免疫组为对照。序列分析结果显示,该基因片段含一个完整的开放性阅读框,编码144个氨基酸,与其他几个物种同源性为76.1%~86.2%,预测蛋白中含较多的α-螺旋区域,主要集中在3个区域。免疫结果显示,与对照组相比,pCI-G能够引起小鼠体内IL-4和IFN-γ持续快速的增长,在首免后第56天,二者的质量浓度可达到70.86pg/mL±4.22pg/mL和237.39pg/mL±3.17pg/mL。该质粒可增强小鼠Th2型和Th1型免疫应答,是极具应用潜力的细胞因子。 相似文献
90.
为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2B细胞表位与猪细小病毒(PPV)VP2重组真核表达质粒的免疫原性,将PCV2ORF2的B细胞表位基因(141~257bp)重组到PPV SC-1株VP2基因的N端,构建了真核表达质粒pCI-VP2.ORF2B。用脂质体转染法将重组质粒pCI-VP2.ORF2B转染至Vero细胞中,利用间接免疫荧光法检测其在体外的表达情况。将重组质粒免疫小鼠,并设猪细小病毒灭活疫苗、猪圆环病毒亚单位疫苗和空载体对照组,采用MTT比色法、流式细胞术和ELISA法分别对免疫小鼠脾淋巴细胞的转化功能,外周血CD4+和CD8+淋巴细胞比例,PCV2和PPV IgG抗体效价进行了检测。结果表明,转染Vero细胞后第48小时用间接免疫荧光法能在荧光显微镜下观察到绿色荧光,检测到特异性蛋白的表达;pCI-VP2.ORF2B免疫组脾淋巴细胞从第7天开始对ConA有明显反应,显著高于对照组;CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞的数量高于或显著高于对照组;在免疫后第14天检测到PPV/PCV2IgG抗体。提示pCI-VP2.ORF2B能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫反应。 相似文献