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341.
通过对比各短肽标签,选择由8个氨基酸组成的FLAG标签弥补口蹄疫疫苗毒株OZK 3A蛋白的93~102位10个氨基酸缺失,原核表达FLAG与3A的嵌合蛋白,并命名为3AF。同时也表达了OZK毒株原始3A蛋白。分别以3A和3AF蛋白作为免疫原免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,采用ELISA和Western-blot分析融合蛋白的血清学反应活性。结果表明,3A蛋白和3AF蛋白均能在大肠杆菌中有效表达,且主要以可溶性形式表达。纯化的3AF蛋白能与FLAG单抗特异性反应而未能诱导免疫小鼠产生针对该标签的抗体,体现了体外和体内的生物反应性差异。FLAG标签对3A蛋白的表达水平、表达形式等未产生显著影响。本研究为下一步FLAG标记病毒的拯救及其应用奠定了基础。 相似文献
342.
小反刍兽疫病毒F基因真核载体的构建与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
根据GenBank中小反刍兽疫病毒(Nigeria 75/I株)F基因序列设计了引物,应用RT-PCR方法获得了目的基因,纯化回收后将其连接到克隆载体pMD18-T上.将鉴定与序列测定后的目的基因再克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,经过鉴定,成功构建了含有小反刍兽疫病毒F基因的真核细胞表达栽体pEGFP-N1-F.利用脂质体介导阳性pEGFP-N1-F质粒转染了BHK-21细胞.Western-blotting证实,表达的pEGFP-N1-F融合蛋白(90 ku)具有免疫活性. 相似文献
343.
明代徐光启的《农政全书.荒政》及台湾学者陈正祥的《中国文化地理》都认为广西蝗灾较少,危害不甚严重。陈的主要依据是在广西未见有一座祭祀蝗神的庙祠———八蜡庙或刘猛将军庙,许多研究者也认同此观点。但笔者却认为此观点与历史事实存在严重不符。本文根据65种广西地方史志记载,统计出历史时期(有蝗虫记载至1949年)广西蝗神庙的地理分布表,并且与此时期广西蝗灾之间的关系进行了考察,发现历史时期尤其清中后期以来广西的蝗灾不仅波及范围广,而且危害大。面对严重的灾情,人们在禳灾无效的情况下,不得不采取一定的治蝗措施。 相似文献
344.
何克亮 《理论学习(山东)》2001,(11):26-27
坚持任人唯贤的干部路线,按照革命化、年轻化、知识化、专业化的方针和德才兼备的原则选拔使用干部,是加强和改进党 的作风建设的组织保证。只有坚决反对用人问题上的不正之风,坚持用好的作风选人,选作风好的人,才能真正坚持党的干 相似文献
345.
中国共产党自成立之日起就很重视青年工作,主张教育青年、争取青年、赢得青年。然而青年并不是一开始就愿意主动跟着中共走的,是经过实践的检验才最终确立了如今的关系。第一次国共合作时期,中共与青年的关系经历了这样一个变化过程:中共通过青年团团结、组织和动员青年、直接领导青年参加反帝运动和青年与反共言论作论争。 相似文献
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347.
行政执法工作是行政机关的重要日常工作,也是行政机关依法履职、服务人民的基本手段。当前,随着经济社会的快速发展和人民群众要求的日益提高,行政执法工作表现出了一定程度的不适应,暴露出很多问题。结合南京市开展的行政执法大检查活动,分析当前行政执法工作出现的突出问题,提出进一步加强和改进行政执法工作的建议。 相似文献
348.
诚信问题是一个永恒命题,无论中外,无关古今。以日本为例,仁、义、礼、智、信本是儒家的根本,古代日本受中国文化影响极深,礼与信的观念也得到非常广泛的认可。目本民众,因为守礼,往往被世人认为是最有礼貌的民众;而诚信,则被日本公司认定为自己的命根子。一家公司,一旦被公众认为没有诚信,那么不管其规模大小。几乎都没有翻身的机会。日本名门企业雪印集团以及新兴企业活力门的破灭,也从反面证明这一点。 相似文献
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