云南白族群体Y-STR及Y-SNP关联性探讨

目的探讨Y-STR与Y-SNP单倍群间的关联性及其法医学应用价值。方法用Y-filer的17个Y-STR基因座及6个Y-SNPs（M122、M95、M9、M130、M119和M45）对云南白族146名无关男性个体样本进行检测。结果①17个Y-STR基因座构成的单倍型在146名男性个体中共检出114种单倍型,其中93种仅出现于一名个体中。②6个Y-SNPs在白族中的频率为4.1%～47.3%,其中O3-M122频率最高,占47.3%。③综合两类遗传标记结果,出现于2名或2名以上个体的21种Y-STR单倍型中,有5种其Y-SNP不同;分别只有一个Y-STR基因座分型不同的29对单倍型中,有8对其Y-SNP分别不同。Y-SNP单倍群间部分Y-STR基因座等位基因频率分布存在一定差异。结论 Y-STR单倍型相同或相近的个体间其Y-SNP分型可不相同,结合两者进行检测分析对于男性嫌疑人家系排查具有重要意义。     

犬mtDNA高变区Ⅰ多态性及法医学意义初探

目的对犬毛发mtDNA高变区Ⅰ多态性进行检测,并探讨其在法医学中的应用价值。方法 54只家犬(拉布拉多犬7只、史宾格犬7只、德国牧羊犬6只、罗威纳犬4只、藏獒4只、昆明犬4只、杜伯文犬3只、金毛寻猎犬1只、昆明本地犬18只)。采用复合巢式PCR对54只家犬mtDAN HVRⅠ15803～16114区域进行测序分析。结果 54只家犬在mtDNA HVRⅠ15458～16100区域共检测到643个碱基对信息,共检出分属3大单倍群26个多态点;15个单倍型,频率在1.9%～20.4%之间,其中单倍型A11频率最高;个体识别概率为0.898,平均核苷酸差异和平均核苷酸多样度为7.62±3.61和0.011 9±0.006 3。结论采用本文方法,可检测犬mtDNA HVR-Ⅰ多态性,并可利用其较高的个体识别概率为相关案件侦察提供线索或依据。     

AFLP技术鉴别罂粟、虞美人和大麻种属差异的初步研究

目的探讨采用AFLP技术检测植物DNA,鉴别罂粟、虞美人和大麻植物种属间差异的方法。方法收集罂粟根、茎、叶、花、果以及虞美人和大麻叶检材,用AxyPrep DNA试剂盒提DNA,经EcoRI/MseI酶切,人工接头及PCR预扩增,用E-ACA/M-CAG、E-ACT/M-CTC、E-ACC/M-CTA、E-ACC/M-CTG、E-AGC/M-CTT、E-AGG/M-CTA6对标记了荧光的选择性引物进行PCR扩增,其产物在的CEQ8000遗传分析仪上检测。结果6对引物分别在罂粟、大麻和虞美人样本中检出27~46、5~20、4~31条扩增片段,种属间存在明显差异;同一罂粟根、茎、叶、花和果的DNA检测结果相同。结论罂粟、虞美人和大麻3种植物的AFLP分析结果显示出的差异性,同一植株不同部位DNA AFLP结果的同一性,有可能用于检测未知植物检材的种属来源。     

DYS389Ⅱ基因座在家系样本中分型异常的分析

Y—STR（short tandem repeat）基因座是遗传学、法医学和系谱学研究中重要的遗传标记，商品化的Y—filer试剂盒同步检测DYS389Ⅱ等17个Y—STR基因座，具有高度的多态性，但文献报道Y—STR的突变率较高，且单一基因座的突变就可导致整条Y染色体单倍型的改变。     

利用荧光AFLP技术检测罂粟DNA多态性

目的 利用荧光AFLP检测技术检测罂粟植物DNA多态性。方法 用Axygen公司的AxyPrep DNA试剂盒提取了12株产于缅甸和中国云南省昆明市宜良县罂粟植株的DNA，用Eco RI和Mse I对总DNA进行酶切。连接人工接头，预扩增和选择性扩增，其产物在CEQ8000遗传分析系统上检测。结果 64对选择性扩增引物中8对引物能得到20条以上的扩增片断，具有高度多态性。结论 荧光AFLP技术可用于罂粟DNA多态性的检测。     

毛干mtDNA单倍型母系家系排查法侦破命案

笔者在实践工作中遇到利用受害者指尖粘附微量毛干线粒体DNA(m tDNA)测序的多态信息,最终成功侦破一起命案,现报道如下。1材料与方法1.1简要案件及样本DNA的提取2008年9月某市发生一命案,现场提取死者(杨某,女)指尖粘附约1cm长毛干及胸部、膝关节上毛发各1份;杨某丈夫(王某)和杨某血痕,编号1~5。按母系遗传关系排查的杨、金、何、刘姓嫌疑人血痕各1份,编号6~9。参照张纯斌等人[1]的方法提取毛干m tDNA;有机法提取血痕m tDNA。1.2巢式PCR扩增m tDNA高变区I(HVRI)15996-16401区域长片段的PCR扩增,上、下游引物序列为L15996:5-′CTCCAC-CATTAGCACCCAAAGC-3;′H16401:5-′TGTTTCACG-GAGGATGGTG-3′。15μL反应体系包括含镁离子10×PCR缓冲液1.5μL,5mmol/L dNTP1μL,1μmol/L正反向引物各1μL,0·2μL(5U/μL)TaqDNA聚合酶,0·5μLDNA(50ng/μL),余量用水补足。PCR反应条件:95°C变性2m in,94°C变性20s,58°C退火20m in,72°C...     

二代测序技术在法医学中的应用

随着二代测序技术的快速发展,其高通量和低成本在生命科学领域应用广泛,测序的通量更高,测序时间和成本不断下降,使得其被广泛应用于微生物研究、古DNA研究、临床诊断、法医学研究等。本文阐述了二代测序技术平台及其遗传标记在法医学中的应用,包括STR分型、SNP分型、HLA基因型预测以及在降解检材中的应用等。     

建立检测制式长枪上DNA多态性的新方法

目的建立快速、准确检测制式长枪上基因分型的新方法。方法联合使用直扩法、硅膜法对48支制式长枪上5个不同部位共240份检材进行DNA检测。结果联合使用直扩法及硅膜法,在48支制式长枪中检测出DNA完整分型42支,检出率达87.50%。结论联合使用直扩法、硅膜法,可有效快速、准确地检测出制式长枪上DNA多态性。     

云南省汉族p33.6位点的基因频率调查

P33．6（D；S；；l位点）是Jeffreys等人1988年首先报道的一个VNTR位点，国内陈松等人（1993）“’对IO0名中国汉人进行了此位点扩增，得到了分辨率高、清晰易读的图谱。我们参考了Jeffreys和陈松等人的方法，根据本实验室的条件，以云南省汉人为研究对象，进行了此位点的扩增和频率调查，报道如下。材料和方法1．血液取自昆明及玉溪地区100名无关个体（汉族）的静脉血，构檬酸钠抗凝。2．4个家系12人的血样由玉溪地区人民医院血库提供。3．引物序列为：5’－TGTGAGTAGAGGAGA＊＊T＊＊C＊＊＊一丁；5’＊＊G＊＊A＊＊C＊＊T＊…     

输血后造成样本基因型改变1例

在大部分伤害致死的案件中，受害者如有医院抢救的记录，则输血必不可少，但输血后患者的外周白血细胞基因分型可能会与供血者的基因型一致或形成嵌合体。本文作者应用PCR-STR技术，通过对1例伤害致死案的检验，诣在对在法医学个体识别和亲权鉴定工作中遇到输血治疗后的个体应引起同仁的足够重视。