分泌抗人类血型-H抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株建立及初步应用

应用杂交瘤技术,建立了两株分泌抗 H 的单克隆抗体细胞株 H_(2-6)H_8和 B_(2-5)D_9。经体外培养半年以上,生物学性状稳定。两株细胞分泌的抗体属 IgM 类,特异性识别 H 型物质,与几种常见动物的红细胞无交叉反应。培养上清液和腹水的抗体效价最高分别达1024倍和1.28×10~5倍,可用在中和试验、免疫斑点法中,在实际办案中应用理想。     

抗弓形虫独特型抗体的研究——抗弓形虫独特型抗体对小白鼠免疫保护试验

应用抗弓形虫McAb(Ab_1)免疫家兔制备poly抗Id(Ab_2)抗体免疫健康BALB/c小鼠,用弓形虫强毒(GJS)10~4攻击,进行免疫保护力效检。结果末经免疫的对照鼠5天内全部死亡,免疫鼠可存活11天陆继死亡。虫检率为100％,初步证明抗Id抗体做为弓形虫无病原抗原替代物,可诱导鼠体免疫应答,产生一定的免疫保护力、可延迟小鼠的死亡时间。提示抗弓形虫Id有进一步深入研究的价值。     

用荧光抗体法作血痕的种属鉴定

血痕的种属鉴定,最早是应用抗人血清作环状沉淀试验,后来使用特异性更好的抗人血红蛋白沉淀素血清替代抗人血清作各种沉淀试验.此外,还有应用抗人球蛋白消耗试验、间接血凝试验法、胶乳载体试验法.近来,随着免疫学实验技术的发展,应用酶联免疫技术等检测人血液中各种特异组分作血痕的种属鉴识.本文使用荧光标记抗体检测人血痕中的IgG组分,作人血和动物血的鉴别,取得较好结果,现将实验报告如下:     

猪瘟威胁区猪场仔猪免疫程序的探讨

对猪瘟威胁区仔猪不同首免日龄、不同免疫剂量及不同免疫次数的免疫效果进行比较。结果显示 ,仔猪 2 8日龄首免比 2 5日龄首免的抗体水平略高 ;首免剂量 2头份仔猪的免疫效果不及 4头份和 6头份的仔猪 ;2 8日龄首免 4头份、5 5日龄二免 2～ 4头份 ,免疫仔猪的抗体阳性率和抗体效价均较高 ,抗体持续期亦较长 ,3 5日龄一次免疫 4头份仔猪的免疫效果不稳定 ,平均抗体效价低于 1∶16。在猪瘟威胁区以 2 8日龄首免 4头份、5 5日龄二免 2头份的免疫程序免疫效果较为可靠     

猪白细胞介素21基因的原核表达与多抗血清的制备

为了制备猪白细胞介素21(porcine interleukin-21,pIL-21)的多克隆抗体,采用RT-PCR从猪外周血单个核细胞(PBMC)扩增获得pIL-21基因,然后将其克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)之中,转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,pIL-21以可溶性蛋白形式表达,分子质量为35ku,具有良好的反应原性。经过Ni-NTA镍离子亲和层析纯化,获得纯化的重组蛋白pIL-21。用其免疫BALB/c小鼠制备抗pIL-21血清抗体。Western-blot分析结果显示,该抗体可与杆状病毒表达的重组Cap-pIL-21、ConA和PHA共刺激的猪PBMC细胞发生特异性反应,ELISA抗体效价可达1∶12 800。上述研究结果为pIL-21的生物学功能研究奠定了重要基础。     

荧光免疫标记抗体法测定血痕ABO血型

目的探讨采用荧光免疫标记抗体法测定血痕血型的可行性和优点。方法根据抗原抗体特异性结合的原理,首先对抗A、抗B单克隆抗体进行荧光标记,然后使荧光标记抗体与相应抗原(血痕)在最佳条件下结合,最后荧光显微镜镜检,判定血痕的血型。结果采用该方法测定血痕的血型结果准确、灵敏度高、操作简单、检验时间短。结论该方法可以作为一种测定血痕血型的检验方法使用。     

基于主题效价分析的医患关系影响因素探究

为考察医患关系的影响因素,研究调查河南省三个地区298名医生和220名患者,通过对所列举因素进行主题提取,形成效价矩阵,对效价进行差异检验。结果发现,医生更倾向归因于医患共情,患者强调医生的职业修养,双方都重视患者认知与情绪的作用。男性医生和女性患者更注重社会环境的影响,公立制医院医生较之非公立制医院医生更强调医学现实更不强调医患共情,本科及以下学历较之硕士及以上学历的医生更注重医患共情与政策法律保障。医患关系满意度高分组医生更注重医生的职业修养,低分组医生和高分组患者更注重医学现实的作用。探究影响医患关系的因素,对促进医患信任具有理论指导意义。     

鼠抗人转铁蛋白抗体轻链与重链可变区基因库的制备

以纯化的人转铁蛋白免疫小鼠,测其血清效价,合乎要求后杀鼠取脾脏并以异硫氰酸胍和酚的混合溶液将其匀浆,再以氯仿抽提、异丙醇沉淀和乙醇洗涤,所得总RNA以oligo(dT)纤维素离心柱分离纯化制备mRNA,使mRNA达到eDNA合成所需的浓度后,反转录制备出eDNA,在合成的eDNA中加入轻、重链引物,扩增制备出小鼠抗人转铁蛋白抗体的轻、重链可变区基因库。     

抗人转铁蛋白单链抗体的研制及部分性能研究

研制人转铁蛋白的单链抗体。以纯化人转铁蛋白免疫小鼠,制备小鼠脾脏 mRNA,RT-PCR 扩增重轻链可变区基因;Linker 连接及引入 Sfi Ⅰ和 NotⅠ酶切位点构建单链抗体基因;同载体 pCANTAB 5E 连接,转化 E.coliTG1细胞,以 M13K07挽救制备噬菌体抗体呈现文库,筛选抗原阳性重组噬菌体粒子(Panning);感染 E.coliHB2151菌株,制备可溶抗体并检测其性质;测定抗体基因序列并分析同源性及结构特征。制备出4株分泌抗人转铁蛋白可溶抗体的 E.coli HB2151菌株。抗体基因只由小鼠抗体的轻重链可变区基因构成,开放读码,无终止子,并紧接一末尾为一琥珀终止密码的 E 末端序列,其对应氨基酸序列 V_H 和 V_L 部分均遵从抗体可变区特征。实验证明,可把基因工程抗体技术应用于法医血清学,以制备新型抗体试剂。     

山羊莱姆病血清抗体的调查

１９９３年３～５月，对甘肃省迭部林区不同样点二类生境下活动的山羊随机采血清２７０份，用ＥＬＩＳＡ检测莱姆病血清抗体情况，其中森林草原山羊血清１１３份，检出阳性血清１３份，阳性率为１１．５０％；灌丛草原山羊血清１５７份，检出阳牲血清１５份，阳性率为９．５５％。总阳性率为１０．３７％（２８／２７０）。