胸腺九肽对鸡脾淋巴细胞增殖转化及IL-2基因表达与分泌的影响

采用MTT比色法、相对半定量RT-PCR法和放射免疫测定(RIA)法研究了不同浓度的胸腺九肽对离体培养的鸡脾淋巴细胞增殖转化I、L-2基因表达与分泌的影响。结果表明,用10 ng/mL和1 ng/mL胸腺九肽处理鸡脾淋巴细胞8 h后,能显著增加由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化反应,显著提高IL-2基因的表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量(P<0.05);100 ng/mL的胸腺九肽虽有增强脾淋巴细胞增殖转化反应以及提高IL-2基因表达和分泌能力的趋势,但与对照组无显著差异(P>0.05)。提示,胸腺九肽能增强鸡脾淋巴细胞的增殖转化反应,并主要在基因转录水平上促进IL-2的合成与分泌,其作用与剂量大小有关。     

鸡IL-18基因重组真核表达载体的构建及其表达产物的生物学活性

从pMDChIL18克隆质粒扩增获得了ChIL18全基因片段,并将其重组到真核表达载体pcDNA3.1( )。经酶切、质粒PCR鉴定和基因测序,鸡IL18全基因被正确重组到pcDNA3.1( )真核表达质粒上;将重组真核表达质粒pcDNA3.1( )ChIL18转染COS7细胞,转染细胞中含ChIL18基因的mRNA。SDSPAGE分析表明,表达产物是与ChIL18相符的约23ku的蛋白条带。鸡淋巴细胞转化试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导转化作用。     

鸡Toll样受体3胞外区片段的克隆表达及多克隆抗体的制备

以笔者所在课题组扩增测序的广西三黄鸡Toll样受体3(TLR3)基因为基础,采用降落PCR法从鸡外周血淋巴细胞中扩增其胞外功能区片段chTLR3-LRR,并构建该片段的原核表达重组质粒,通过优化蛋白表达条件,用获得的融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过Western-blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示,该片段长度为834bp,与预测的片段大小、碱基序列相符;构建的原核表达重组质粒pET-chTLR3-LRR经IPTG诱导后,表达出预期的30ku的重组蛋白,所获得的鼠抗鸡TLR3多克隆抗体能够与经传染性法氏囊炎病毒(IBDV)刺激后的鸡胚成纤维细胞的TLR3蛋白发生特异性免疫反应。表明,所选择的区域片段具有很好的免疫原性,制备的鼠抗鸡TLR3多抗具有良好的特异性,这为进一步研究鸡TLR3的功能提供了重要材料。     

Differential Ability of Necrophagous Diptera to Colonize Concealed Resources: Empirical Evidence From a Field Experiment in Brazil

Field studies in forensic entomology seem to assume that a cadaver is a resource equally accessible to flies, irrespective of the species’ size, behavior, and sensorial capacity. We aimed to challenge this assumption by experimentally manipulating baited traps in order to test whether the accessibility to decomposing baits is related to the following: (i) the diversity of necrophagous dipterans; (ii) the body size of adults; and (iii) the female sexual maturity stage. The experiment was performed in a rainforest fragment in Northeastern Brazil, in an area characterized by high levels of homicides. Traps baited with decomposing chicken liver had three levels of access: easy (six openings on the trap), intermediate (three), and difficult (one). A total of 750 adults of Calliphoridae, Fanniidae, Muscidae, Phoridae, and Sarcophagidae were collected. Of the 18 species recorded, Megaselia scalaris was the most abundant (46.8%) followed by Lucilia eximia (29.7%) and Chrysomya megacephala (9.8%). The number of species increased significantly with the accessibility level, but overall abundance did not differ, as a consequence of the numerical dominance of M. scalaris. A strong female bias (>91%) was observed in all traps. For Calliphoridae specimens, 90% of the females caught in traps under intermediate and difficult access were sexually mature. By empirically demonstrating that limitation of access and exclusion of visual stimuli do not deter several dipteran species from reaching a substrate, we expand the knowledge on the factors that can shape the colonization of concealed human cadavers, including variables such as insect size and stage of sexual maturity.     

鸡舌下神经核运动神经元树突分布和轴突走向——用CB-HRP研究

用酶标类霍乱原（ＣＢ－ＨＲＰ）注入鸡舌下神经所支配的舌部肌肉和气管部肌肉，用四甲基联苯胺（ＴＭＢ）成色法进行组织化学显色，在鸡延髓横断面的切片上清晰地观察到被标记的舌下神经核运动神经元的树突分布和轴突走向。发现鸡舌下神经核运动神经元的核外树突向八个方向分布；还发现鸡舌下神经核运动神经元的轴突的走向与哺乳动物的不同。说明舌下神经核运动神经元的轴突走向有纲间差异     

禽腺联病毒序列对鸡输卵管细胞表达人溶菌酶基因的促进作用

将鸡卵清蛋白基因5′-调控区控制的人溶菌酶(hLYZ)cDNA表达盒插入禽AAV末端反向重复序列之间,将CMV启动子控制的rep表达盒插入其下游,获得的表达载体pRep2ITR-OV4-LYZ用聚乙烯亚胺包裹,经翅静脉注射产蛋鸡,待蛋清中rhLYZ表达水平下降至注射前水平时,用pRep2ITR-OV4-LYZ进行3次重复注射,以RBB-R染料标记比色法和Western-blotting检测蛋清中rhLYZ表达,以细菌生长抑制试验检测rhLYZ活性。结果,在相同试验条件下,pRep2ITR-OV4-LYZ表达rhLYZ的水平和时间优于不含禽AAV序列的pOV4-LYZ,rhLYZ表达水平和时间随载体注射次数增加呈上升和延长趋势,rhLYZ的分子质量与天然hLYZ相同,对致乳牛乳腺炎大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌具有显著的抑制作用。试验结果提示,禽AAV ITR和rep序列能促进hLYZ基因在鸡输卵管细胞中正确表达。     

鸡IL-18对禽多杀性巴氏杆菌DNA疫苗的免疫佐剂作用

为了探索鸡IL-18在禽多杀性巴氏杆菌H基因DNA疫苗中的免疫佐剂作用,分别用共表达鸡IL-18基因和禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗、鸡IL-18真核表达质粒pcDNA3/cIL-18与禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗混合物、禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗肌肉注射5周龄鸡,首免后每周采取外周血及外周抗凝血,应用ELISA和MTT法分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。二免后第2周用10 LD50禽多杀性巴氏杆菌强毒菌株C48-1进行攻击。结果鸡IL-18能够明显增强禽多杀性巴氏杆菌H基因DNA疫苗的免疫原性,显著提高免疫鸡的体液免疫和细胞免疫水平,并且鸡IL-18与禽多杀性巴氏杆菌H基因共表达时的免疫佐剂作用最强,能强有力地抵抗强毒菌株C48-1的致死性攻击。结果表明,鸡IL-18可作为DNA疫苗的一种理想的免疫佐剂。     

支配鸡肝的交感传出神经元分布规律的研究

为了解支配鸡肝的交感传出神经元的分布规律,将CT-HRP溶液注入鸡肝门周围区, 动物存活3-4 d后,经左心室灌流固定,取内脏神经节、肾上腺神经节及双侧胸、腰和荐段交感干神经节,制成50μm厚的连续冰冻切片,TMB法呈色反应,明视野显微镜下观察统计。结果发现, 支配鸡肝的交感传出神经元胞体位于内脏神经节(占41．9％)、肾上腺神经节(占41．7％)和T2- T7交感干神经节(占16．4%)。在交感干神经节中,标记细胞的峰值位于T5、T6交感干神经节。     

Stewed Chicken with Three Cups of Sauce

正Stewed Chicken with Three Cups of Sauce,literally"three-cup chicken,"is a popular dish in Jiangxi Province in southern China.It is a specialty known for crispy texture and rich f lavor.Its story dates back to the last years of the Southern Song Dynasty(1127-1279),when Wen Tianxiang,a Jiangxi native scholar-general,was     

鸡脾转移因子对肉鸡免疫应答及防病效果的研究

以肉鸡脾为原料,采用超滤法制备鸡脾转移因子(Transfer factor,TF)。单独使用鸡脾TF以及与疫苗联合使用,比较不同剂量、不同使用时间对肉鸡平均日增重、死亡率、淋巴细胞比率、免疫器官指数、巨噬细胞吞噬指数的影响。结果显示,当鸡群处于健康状况时,使用鸡脾TF对试验结果影响不大,但当鸡群处于非健康状态时,使用鸡脾TF可以改善免疫应答指标,明显提高鸡群的抗病力和日增重。疫苗加TF组与单用疫苗组相比,差异不显著(P>0．05),但在降低死亡率和促进鸡增重以及提高巨噬细胞吞噬功能方面,疫苗组与对照组差异显著(P<0．05),疫苗加TF组与对照组差异极显著(P<0．01)。处于亚健康状态的鸡群使用鸡脾TF可提高机体抗病力,可与疫苗免疫同时使用,临床饮水使用的最佳剂量为0．5 mL／只。