猪胚胎多能性干细胞的分离培养

收集妊娠 2 6 .0～ 2 9.0d的猪胚胎 ,分离培养原始生殖细胞 (PGCs) ,在STO细胞饲养层上生长 ,形成了多能性干细胞 (EG)。发现其具有干细胞的显著特性 ,并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、C 3种不同的培养基培养PGCs ,结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距 ,说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响     

芪丹通脉片对高脂血症大鼠血液、细胞流变性及红细胞膜流动性的影响

目的：观察中药复方制剂芪丹通脉片（QDTMT）对高脂血症SD大鼠血液流变性，细胞流变性及红细胞膜流动性的影响。方法：复制高脂血症大鼠模型，同时用QDTMT灌胃。于第16d从眼眶静脉丛取血，测定血脂、血液流变性、细胞流变性及红细胞膜流动性。结果：QDTMT能降低实验性高脂血症大鼠全血黏度、血浆黏度、纤维蛋白原及红细胞聚集指数（AI），提高红细胞变形能力（DI），能够降低荧光偏振度，减少红细胞丙二醛（MDA）的含量。结论：QDTMT能明显改善高脂血症大鼠血脂紊乱、血液流变性，细胞流变性，红细胞膜流动性。     

过氧化氢诱导PC12细胞损伤的模型的建立

目的建立不同浓度的H2O2诱导PC12细胞凋亡的模型,研究组织缺血、自由基损伤的机制。方法分别以不同浓度的H2O2处理PC12细胞12h,用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术检测处理后细胞的生长活力和凋亡情况。结果以0浓度组作为对照,100、300nmol/L的H2O2处理的PC12细胞生存率分别为(76±7.69)%、(39±7.08)%(P<0.01);0、100、300nmol/L的H2O2处理的PC12细胞后凋亡率分别为2.47%、6.00%和55.54%。结论建立了以0、100、300nmol/L的H2O2诱导PC12细胞凋亡的模型。     

抗兔出血症病毒单克隆抗体的制备

用1∶10稀释的兔出血症病毒(RHDV)加等量佐剂乳化后接种BALB/C小鼠3次,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合。通过用间接ELISA试验筛选、克隆出分泌抗RHDV单克隆抗体的杂交瘤细胞林E_3E_6。     

克隆牛的DNA鉴定

目的建立26个多态性STR标记,进行克隆牛的鉴定。方法采用荧光标记PCR引物,进行PCR扩增,应用GeneScan技术分析26个牛的微卫星基因座遗传多态性。结果26对荧光标记引物均能对上述样品很好地扩增出DNA产物,并得到清晰的条带。根据实验观察到的数据计算,体细胞克隆牛供体奶牛与克隆小奶牛的偶合率为3.31×10-15,认定它们为相同来源;在所检测的26个微卫星标记中,体细胞克隆牛供体奶牛、克隆小奶牛与克隆小奶牛代孕荷斯坦母亲的基因型在21个标记上不符合母子遗传关系,可以排除其亲子关系。结论有助于今后开展对珍稀动物或家畜被盗的案件鉴定工作。     

手机短信的法律规制

现行法律法规中没有关于如何认识﹑如何规范手机短信的规定,目前存在立法思路不清的问题。手机短信具有私人通信媒介和大众传媒双重性质,应当将手机短信严格区分为通信短信和传媒短信两大类,通信短信强调私权至上理念,传媒短信强调公权至上理念,应分别采用不同的法律手段加以规制。     

大鼠肥大细胞的法医学实验研究──过氧化物酶活性变化、脱颗粒超微结构改变及分布

采用植物血凝素（PHA）致敏S、D大鼠，2周后处死，灌洗腹腔，用阿拉伯胶分离液分离肥大细胞（MC），将PHA与MC在37C水治中孵育，攻击MC使之受损伤，于伤后5、10、15、20、30和60分钟，分别吸取孵有液作聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳，分离MC过氧化物酶；用抗坏血酸-联苯胺染色显带，并计算酶的相对活性。另取20分钟时孵育液，常规固定，包埋，切片及染色后用透射电镜观察MC脱颗粒叶的形态。用常规石蜡切片，甲苯胺蓝染色，对SD大鼠的35种组织中MC的分布进行光镜观察。结果发现；（1）大鼠腹腔MC显示-条过氧化物酶电泳区带；（2）MC经PHA攻击受损伤10分钟内，过氧化物酶相对活性升高不明显；15、ZO、3O分钟时实验组酶活性升高，与对照组的差异明显；到60分钟时两组酶活性无显著差异；（3）MC与PHA孵育20分钟时，脱颗粒率为76％，MC浆内可见有膜性和无膜性两种类型的空泡．对照组大鼠MC脱颗粒仅为16％；（4）大鼠皮肤、肺、呼吸道、消化道、骨髓及胸腺MC含量较多；泌尿生殖道次之；心、肝、脾、肾等组织较少；脑、脊髓、脑垂体、肾上腺及睾丸等组织中未见MC，从而为法医损伤时间的推测提供方法与依据。     

正脂丸对人血管内皮细胞产生一氧化氮、内皮素的影响

目的：探讨正脂丸对体外培养的人血管内皮细胞产生一氧化氮（NO），内皮素（ET）的影响，以阐明正脂丸保护内皮和抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：用血清药理学方法制备不同浓度的正脂丸含药血清，并以该血清作用于体外培养的人血管内皮细胞，分别用硝酸还原酶法和放射免疫法检测内皮细胞培养液中NO，ET的含量，结果：正脂丸可以促进体外培养的内皮细胞生成NO，且具有剂量依赖关系，各组间两两比较，差异有显性（P＜0．01），同时可以抑制ET的生成，与对照组比较，差异有显性（P＜0．01），结论：正脂丸可以调节内皮细胞产生NO，ET，这可能是其保护内皮和抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

应用单细胞凝胶电泳测定人血痕淋巴细胞降解的实验研究

目的探讨血痕形成时间与其DNA降解的淋巴细胞出现率的关系。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定离体72h内不同时间段的血痕中彗星样淋巴细胞出现率。结果获得人离体血液经不同放置时间间隔后,经LUC IA图像分析系统采集得到荧光图像,并获得体现DNA降解趋势的二项式回归方程y=-0.0178X2+2.4623X+8.1098,r2=0.9522,具有高度的统计学意义。结论72h内的人血DNA降解的淋巴细胞出现率与血痕形成时间之间具有高度的线性相关。     

硝基苯致小鼠骨髓细胞的突变作用

为探讨硝基苯对哺乳动物的致突变性,将12周龄雄性昆明小鼠随机分为染毒组(26、52、104mg/kg)、空白对照组(生理盐水)、溶剂对照组(花生油)和阳性对照组(环磷酰胺),连续灌胃染毒7 d,检测骨髓细胞微核率、骨髓细胞染色体畸变率以及外周血网织红细胞数。结果显示,随着染毒剂量的增加,骨髓细胞微核率、染色体畸变率均有增加,外周血网织红细胞数减少,各组与对照组差异均极显著(P<0.01),并呈剂量-效应关系。表明,硝基苯可导致小鼠骨髓细胞发生突变。