创伤早期修复机制与法医损伤时间推断

创伤修复是一个复杂而有规律的过程,有细胞因子、细胞外间质成分、蛋白酶、立早基因产物等多种因素的参与,本文结合新进文献,对创伤早期修复机制的最新研究及其法医学上的应用前景予以总结。探讨其在法医损伤时间方面的应用价值。     

黄芪总黄酮对脂多糖体外诱导的RAW264.7细胞的细胞因子和NO分泌水平的影响

为了研究黄芪总黄酮(TFA)的体外抗炎作用,通过脂多糖体外诱导小鼠RAW264.7细胞建立炎症模型,采用MTT法检测黄芪总黄酮的细胞毒性作用,用ELISA检测细胞上清液中IL-6、IFN-γ、IL-1β及TNF-α水平,采用Griess法检测细胞内NO表达水平。MTT结果显示,10~100μg/mL TFA对RAW264.7细胞没有明显的毒性作用。与模型组比较,10、25、100μg/mL TFA均能抑制RAW264.7细胞过量分泌IL-6、IFN-γ、IL-1β、TNF-α及NO,且呈一定的量效关系。本试验结果表明黄芪总黄酮具有体外抗炎活性。     

内异方对子宫内膜异位症大鼠细胞因子含量、血管内皮细胞生长因子mRNA表达的影响

目的：探讨中药内异方对子宫内膜异位症大鼠细胞因子含量及血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA表达的调节作用。方法：用Cummings AM方法复制子宫内膜异位症动物模型，采用ELISA法检测IL－6、IL－8、IL－10含量，Dot blot法检测VEGF mRNA表达水平。结果：模型组外周血IL－6、腹腔液IL－8水平、腹腔巨噬细胞数量及巨噬细胞在脂多糖（LPS）刺激下产生的IL－6含量显高于正常对照组；内异方组异位种植内膜组腹腔巨噬细胞在LPS刺激下产生的IL－10含量显低于正常对照组和内异方组；模型组种植异位内膜组织VEGF mRNA表达水平明显高于内异方组。结论：子宫内膜异位症细胞因子IL－6、IL－8、IL－10的失衡与疾病的发生发展有关，VEGF mRNA的过度表达与内异灶血管的形成相关；内异方可显抑制异位内膜组织的生长，同时抑制异位灶VEGF mRNA的过度表达，减少异位灶血管的生成，并对细胞因子有明显的调节作用。     

猪胚胎多能性干细胞的分离培养

收集妊娠 2 6 .0～ 2 9.0d的猪胚胎 ,分离培养原始生殖细胞 (PGCs) ,在STO细胞饲养层上生长 ,形成了多能性干细胞 (EG)。发现其具有干细胞的显著特性 ,并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、C 3种不同的培养基培养PGCs ,结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距 ,说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响     

针灸督脉对骨质疏松模型大鼠血清相关细胞因子和骨密度的影响

目的:探讨针灸督脉对维甲酸所造成的骨质疏松的影响。方法:通过给大鼠灌服维甲酸14 d后,复制骨质疏松大鼠模型,并进行针灸及药物干预,采用放射免疫分析法和双能X线骨密度测定法等,检测实验大鼠血清骨代谢相关细胞因子以及骨密度。结果:针灸督脉可明显提高实验大鼠血清转化生长因子-β(TGFβ)水平,降低白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNFα)水平,升高骨密度(BMD)。结论:针灸督脉可通过调节机体相关细胞因子网络平衡,改善骨代谢负平衡状态,降低骨的转换率,增加骨密度,有效治疗维甲酸导致的骨质疏松症。     

鸡枞菌多糖对小鼠T细胞免疫功能的影响

采用鸡枞菌多糖(TAP)体外作用于小鼠T淋巴细胞,用ELISA法检测其IL-4、IFN-γ及IL-2水平,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群,RT-PCR法检测相关细胞因子mRNA表达量,观察研究了鸡枞菌多糖对小鼠T细胞免疫功能的影响。结果表明,与ConA组相比,25～100μg/mL TAP在作用72h内均能显著促进T细胞产生IL-4、IFN-γ及IL-2(P<0.01);25μg/mL TAP作用48h后可显著降低被ConA激活的T细胞CD4+%(P<0.01),升高CD8+%(P<0.05),并降低CD4+/CD8+(P<0.05);50μg/mL TAP则可显著升高CD3+%(P<0.01);50μg/mL TAP在作用72h内能显著提高IL-2、IL-4及IFN-γmRNA表达量(P<0.01),并使其保持较高水平。提示,TAP对细胞免疫功能具有显著增强作用,T淋巴细胞是TAP的靶细胞之一。     

DNA疫苗免疫佐剂的研究进展

简要阐述了细胞因子、共刺激分子、CpG DNA 和脂质体等 DNA 疫苗佐剂的来源、性质、免疫增强作用、作用机理和方式。认为以前的研究工作必然会使上述佐剂应用到 DNA疫苗的生产中。     

猪凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFRl和TNF-αSYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法的建立

分别针对猪凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1、TNF-α基因以及看家基因β-actin的序列设计了1对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测Fas、FasL、TNFR1、TNF-α及β-actin的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法.该方法线性关系好(r2≥0.995),敏感性高,初始模板的检出下限除TNFR1为1×102 copies/μL外,其他均为1×101 copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3%.应用所建立的方法对猪生殖与呼吸综合征病毒感染仔猪外周血单个核细胞中Fas、FasL、TNFRl和TNF-α mRNA的表达水平进行了检测.结果表明,建立的real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好.     

新风胶囊对佐剂关节炎大鼠肺功能血清细胞因子含量的影响

目的:观察佐剂关节炎(adjuvant arthritis, AA)大鼠肺功能、细胞因子含量的变化及新风胶囊对其影响.方法:将60只大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨喋呤(MTX)组、雷公藤多苷片(TPT)组和新风胶囊 (XFC)组,每组12只,分别向除正常组以外的其余动物右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎,致炎后第19天开始给药.正常组及模型组均给予9.0 g/L氯化钠注射液,其余3组分别给予MTX、 TPT、XFC.观察各组大鼠肺功能及血清细胞因子的变化.结果:与正常组比较,模型组及MTX组的用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气容积 (FEV1)、25%肺活量的最大呼气流量 (FEF25)、50%肺活量的最大呼气流量 (FEF50)、最大呼气中段流量 (MMEF)、最大呼气流量(PEF)显著降低(P＜0.05,P＜0.01),TPT组的FVC、PEF显著降低(P＜0.05);与模型组比较,XFC组的FVC、FEV1、FEF25、FEF50、MMEF、 PEF显著升高;与XFC组比较,MTX组的FVC、FEV1、FEF25、FEF50、MMEF、 PEF显著降低(P＜0.05,P＜0.01),TPT组的FVC、FEF50、MMEF显著降低(P＜0.05).与正常组比较,模型组TNFα显著升高(P＜0.05);与模型组比较,XFC组TNFα显著降低(P＜0.01),而与其余两个治疗组无显著差异(P＞0.05);与正常组比较,模型组IL-10显著降低(P＜0.01);与模型组比较,XFC组IL-10显著升高(P＜0.01),而与其余两个治疗组无显著差异(P＞0.05).结论: 佐剂关节炎大鼠存在通气功能及小气道功能障碍,新风胶囊能改善AA大鼠肺功能,其机制可能与新风胶囊下调致炎因子(TNFα)、上调抗炎因子(IL-10)、抑制致炎效应、增强抗炎效应有关.     

不同细胞因子对水牛原始生殖细胞传代培养的影响

为探讨不同细胞因子对水牛原始生殖细胞(PGCs)传代培养的影响,将PGCs分别采用A、B、C、D、E、F和G共7种培养基进行培养,即A组:基础液+10 ng/mL白血病抑制因子(LIF)+10 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF);B组:基础液+20 ng/mL LIF+20 ng/mL bFGF;C组:基础液+20 ng/mLLIF+10 ng/mL bFGF;D组:基础液+20 ng/mL LIF;E组:基础液+20 ng/mL LIF+20 ng/mL bFGF+20ng/mL干细胞因子(SCF);F组:基础液+20 ng/mL LIF+40 ng/mL bFGF+40 ng/mL SCF;G组(对照组):基础液。将机械法分离的PGCs小集落接种到水牛胎儿成纤维细胞(BEF)饲养层上进行传代培养。结果,原代时,A、B、C、D、E和F组的克隆数目都显著高于对照组(P<0.05),其中E和F组的克隆数目显著高于A组(P<0.05),而与B、C、D组差异均不显著(P>0.05);1~8代时,B、C、D、E、F组的克隆数目显著高于A组(P<0.05);对照组传代数仅为2代,A组为5代,而B、C、D、E和F组均为8代以上。结果表明,在传代过程中,LIF起主要作用,20 ng/mL的LIF浓度可以满足水牛PGCs传代培养的需要。