310型遗传分析仪的应用

使用ABI公司ProfilerPlus、Cofiler试剂盒及310型遗传分析仪(以下简称310)检验各类案件2000余起,简化了ABI公司推荐的检验步骤,节约了成本,缩短了检验时间,讨论分析常见问题并提出解决办法,使结果分析更为客观准确.     

指甲DNA提取及其STR分型

<正> 指甲DNA提取以往仅采用 Chelex100方法,其提取的DNA量少,且含大量抑制剂,影响STR分型。为提高DNA提取浓度,有效去除抑制剂,本文作者在以往方法的基础上进行改进,取得较好的效果,现报道如下。     

不同染色组织切片及不同组织固定方法对检测STR基因座的影响

目的探讨不同染色组织切片及不同组织固定方法对DNA检验的影响。方法采用Chelex100法及浓缩纯化方法提取DNA,PCR扩增后310型遗传分析仪检测。结果福尔马林固定4天以内或70%乙醇、无水乙醇分别固定1年及15年的HE染色切片可以检见Amel及9个STR基因座。PTAH等5种特殊染色未能检出相应基因座DNA谱带。结论70%乙醇或无水乙醇固定组织,石腊包埋组织及HE染色切片可以作为DNA?STR检验鉴定的样本材料。     

精斑中磷酸葡萄糖变位酶及其亚型的电泳分型

<正> 本文用淀粉凝胶电泳法和PAGIEF对精斑PGM_1普通型及亚型进行了检测。对169例不同个体精斑PGM_1分型,三个普通型的出现频率PGM_1 1—1 87;PGM_1 2—1 66;PGM_1 2—2 16。对31例同一个体红细胞及精斑PGM_1分型,其结果完全一致。对138例不同精子     

唾液脯氨酸蛋白系统及唾液酶多态性

<正> 1973年 Azen 首次报道唾液富含脯氨酸蛋白以来,开创了唾液蛋白多态性检验的新领域。富含脯氨酸的唾液蛋白(Proline-richProteins,简写 PRP)占腮腺分泌蛋白的2/3。PRP 含有丰富的脯氨酸、甘氨酸及谷氨酸其主要作用是结合离子钙、羟基磷     

自制与商业化抗人精液蛋白P30金标试剂条的法医学应用比较

目的　检测比较自制和商业销售的抗人精液蛋白P30 金标试剂条 ,探讨它们法医学应用的可靠性。方法　以人精液和人前列腺特异蛋白检测效价及灵敏度 ,以人阴道分泌物、人血清、人唾液和人初乳检测特异性 ,以保存不同年限的陈旧人精斑和斑痕类检材测定检验实际检材的能力。结果　自制抗人精液蛋白P30 金标试剂条效价及灵敏度与商业销售的试剂条中较好的基本相当 ,特异性则相当或好于商业试剂条 ,对非特异性测定均为阴性 ,而商业化试剂条则多有非特异性反应。结论　使用商业金标试剂条 ,要确定其是否合乎法医学检验标准与要求。     

青海地区回族人群9个STR基因座的遗传多态性

运用荧光标记复合扩增、ABI 310型基因分析仪电泳、自动荧光检测分型 ,对居住在青海地区的 10 2例回族无关个体的D3S135 8、vWA、FGA、D8S1179、D2 1S11、D18S5 1、D5S818、D13S317、D7S82 0等 9个STR基因座进行了群体分析 ,得到该地区回族群体 9个基因座的基因频率 (表 1)。表 1.青海地区回族人群 9个STR基因座等位基因频率 (n =10 2 )D3S1 358A基因数F1 4 5 0 0 2 4 51 5 75 0 36761 6 61 0 2 9901 7490 2 4 0 21 81 4 0 0 686vWAA基因数F1 4 33 0 1 61 81 5 80 0 3921 6 53 0 2 5981 7470 2 30 41 840 0 1 9611…     

凝血因子ⅩⅢ B的遗传多态性

目的首次调查北京地区人群体凝血因子ⅩⅢ B(FⅩⅢ B)DNA水平的遗传多态性.方法应用PCR-STR技术.结果推算出FⅩⅢ B DNA水平的基因分布频率,符合Hard-Weinberg平衡定律.结论对法医的办案工作,具有一定的实用性和推广意义.     

检验人精浆特异蛋白P30免疫胶体金试剂条的研制

目的制备用于检验人精浆特异蛋白P30-主要是来自法医学案件的免疫胶体金层析试剂条.方法选取针对不同抗原决定簇的抗P30单克隆抗体细胞株,并制备其小鼠腹水,分离纯化单克隆抗体.制备胶体金并以纯化抗体包被,制成免疫胶体金,以免疫胶体金浸泡玻璃纤维.选取适宜的硝酸纤维素膜并于其上不同位置以未金标的另一株P30单克隆抗体和羊抗鼠IgG包被.搭建试剂条并检测其灵敏度和特异性.结果所制成的试剂条灵敏度至少可达4ng/ml;对6人份混合的人精液物质在稀释20万倍后仍出阳性结果,且无非特异性反应.结论检验人精浆特异蛋白P30的免疫胶体金试剂条可对嫌疑人精物质做出排查,有利于法医物证检验.     

鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因的表达

目的 制备抗人转铁蛋白单链抗体。方法 拼装好并带有酶切位点粘性末端的鼠抗人转铁蛋白的单链抗体基因经凝胶电泳定量后,同载体pCANTAB 5E连接,以其转化E.coli TG1细胞,经辅助噬菌体M13K07挽救构建噬菌体抗体表面呈现文库、抗原包被固相材料富集选择阳性重组噬菌体克隆（Panning）。感染能产生可溶抗体片段的大肠杆菌菌株E.coli HB2151,制备可溶抗体,以Anti-E末端抗体进行Western blot、ELISA检验和分子量测定。结果 人转铁蛋白的单链抗体基因成功表达。结论 用基因工程抗体技术制备抗体是可行的。