甲醛固定标本DNA提取及荧光标记STRs复合扩增

甲醛固定标本和石蜡包埋组织的病理切片是医院病理科和法医鉴定机构档案中重要的个人实物档案 ,是可靠的分子生物学研究材料的来源 ,同时也是医疗纠纷和一些刑事案件的重要证据。由于案情的需要 ,常需对甲醛固定标本和石蜡包埋组织及病理切片等进行个人识别和同一认定。但由于甲醛可使DNA发生降解 ,导致PCR反应的成功率降低。本文探索了应用TES、SDS、PK、尿素和DTT消化及酚 /氯仿提取DNA ,并用Chelex10 0溶解DNA ,应用灵敏度高的荧光标记STRs复合扩增 ,对甲醛固定标本和病理切片进行个人识别鉴定 ,取得了令人满意的结果。1　材…     

兔死后角膜内皮细胞核DNA降解随死亡时间变化规律

目的研究兔死后角膜内皮细胞核DNA降解与死亡时间的关系。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,检测27只家兔死后48h内不同时间点角膜内皮细胞核DNA降解情况。结果家兔死后角膜内皮细胞产生彗星现象,彗星样细胞出现率于兔死后6h开始逐渐增加。死后6～18h彗星样细胞出现率增加缓慢,死后24～36h出现率上升较快;死后36～48h彗星样细胞出现率上升缓慢,但仍始终保持在较高的水平上(M185.4%),其回归方程为y=-0.0096x2+2.4548x+5.7964,与死亡时间呈正相关(R2=0.9743)。结论家兔死后角膜内皮细胞彗星样细胞出现率随死亡时间增加而逐渐增加。     

法医如何认识外科医疗事故的术前防范要点

在当今的社会中,医患关系紧张,医疗纠纷频现,已经成为目前社会突出矛盾之一,严重影响了社会稳定和安定团结。在众多的医疗纠纷中,外科的医疗纠纷占据了很大的部分。因此,如何有效地防范外科医疗纠纷的出现,对于缓解医患关系、化解社会矛盾、维护社会稳定都具有重要意义。外科是以手术治疗为主的医疗领域,同时还涉及麻醉、输血输液、药物治疗、辅助诊断和治疗等,因而     

人类毛发的法医学检验研究进展

毛发作为刑事案件中常见的生物学检材有着非常重要的检验价值。本文重点对近年来毛发检验新技术的发展进行了综述,并指出了毛发检验的研究方向。     

联苯胺试验对血痕DNA检验的影响

目的探讨联苯胺试验及相关试剂对血痕DNA检验的影响。方法制作含1μL静脉血的滤纸血痕970份,其中10份为对照样本,960份经联苯胺试验及相关试剂分别处理后,采用Chelex-100法和硅珠法提取DNA,Amp F詛STR~(TM)Identifiler~(TM)Plus PCR扩增试剂盒进行复合扩增,对比各组STR分型结果。结果联苯胺试验后立即提取DNA,硅珠法的STR基因座检出数为(3.80±1.34)个,而Chelex-100法均未获得STR分型结果;联苯胺试验后干燥处理,硅珠法有13例(21.7%)获得全部STR基因座分型结果,且STR基因座检出数[(12.90±1.49)个]远高于Chelex-100法[(4.70±1.96)个](P0.05);加入冰醋酸后立即提取DNA,硅珠法的STR基因座检出数为(9.40±2.09)个,而Chelex-100法均未获得STR分型结果;只加冰醋酸后干燥处理以及只加四甲基联苯胺乙醇饱和溶液或3%过氧化氢溶液,两种方法均获得完整15个STR基因座分型结果。结论联苯胺试验对血痕的后续DNA检验有很大的影响,Chelex-100法不适合联苯胺试验后血痕的DNA检验,联苯胺试验后干燥处理及采用硅珠纯化的方法可有效提升联苯胺试验后血痕的STR基因座检出数。     

人类线粒体的特征及其在群体遗传学中的应用

mtDNA位于细胞质线粒体中,其不同于nDNA的许多特点,使其在法医学、遗传学等领域有 着重要的研究价值。本文介绍了mtDNA的特点、mtDNA的多态性及其在群体遗传学中的研 究现状,同时指出了今后的研究前景和方向。     

4种固相颗粒吸附法提取滤纸血痕DNA效果的比较

目的探讨4种固相颗粒吸附法提取滤纸血痕样本DNA的效果。方法含有1μL静脉血的滤纸血痕180份,分为4组,每组45份。分别采用4种固相颗粒吸附法(DNAIQ~(TM)系统、D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规的硅珠法)对上述样本进行DNA提取,对比各组DNA溶液的浓度及STR分型检验结果。结果 D盾超敏DNA提取试剂盒[(3.764±1.790)μg/mL]、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒(3.634±1.112)及常规硅珠法(3.350±1.250)提取到DNA溶液的浓度无统计学差异(P0.05),但均高于DNA IQ~(TM)系统(1.864±1.207)(P0.001);D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒及常规硅珠法样本图谱峰高大于DNA IQ~(TM)系统(P0.001),超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规硅珠法样本图谱峰高大于D盾超敏DNA提取试剂盒(P0.01)。结论 D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒及常规硅珠法对于滤纸血痕的DNA提取效率高于DNA IQ~(TM)系统;超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规硅珠提取到的DNA溶液可能具有更高的质量。     

Rolando骨折成伤机制鉴定1例

1 案例 某日,甲某与乙某因口角而发生厮打,在厮打过程中造成甲某右手第一掌骨基底部骨折.甲某报案称在厮打过程中乙某用砖块直接打击其第一掌骨基底部,造成其骨折.乙某否认自己用砖块打击甲某右手,称两人厮打过程中甲某曾用右拳击打其面部,并曾摔倒,摔倒时右手支撑地面.公安机关要求就甲某右手第一掌骨基底部骨折的成伤机制进行鉴定.     

左右手指纹相关性的研究

在杀人、碎尸、爆炸及无名尸体的现场勘查中,为确定死者身源,经常需对尸体指纹进行捺印提取,笔者在工作实践中经多次试验,感到以下几种方法有可取之处,供同行参考。     

应用免疫磁珠分离混合斑中精子

目的探讨应用免疫磁珠法分离精子-上皮细胞混合液中精子的可行性。方法制备不同比例的精子-上皮细胞混合液各15例,分别应用免疫磁珠法及差异裂解法提取精子,经PCR扩增进行DNA-STR分型,比较两者的差异。结果免疫磁珠可以特异性捕获精子,对精子个数为500～2 000/mL的混合斑STR分型成功率(正确分型13个以上,RFU200)为93.33%,差异裂解法为46.67%,两种方法存在明显差异(P0.05)。结论免疫磁珠可有效分离精子和混合斑中其他成分,在精子个数低于2 000个/mL检材中优于差异裂解法。