焦磷酸测序技术分析单核苷酸多态性在法医学中的应用

单核苷酸多态性（SNP）是新一代的法医学遗传标记,有望成为法医实践中解决高度降解检材及特殊案件DNA鉴定的重要工具。近年来涌现出许多高通量的SNP分析方法,如引物延伸结合时间飞行质谱分析法、微测序法、SNP lex以及焦磷酸测序法等。本文重点对焦磷酸测序技术的原理、步骤及其在法医学中的应用进展进行简要的综述。     

福尔马林固定组织SNP与STR检测的比较

目的检测经长期福尔马林固定的组织降解情况,并比较组织中SNP与STR的检出率。方法本文对24例经福尔马林固定、-20℃保存5年的组织样本,采用Quantifiler?Trio DNA定量试剂盒检测样本DNA的降解系数及浓度,运用55-SNPs SNa Pshot复合分型体系和Power Plex?21试剂盒分别进行SNP与STR检测。结果大部分样本降解系数在1~8,发生不同程度的降解。与未降解样本相比,SNP分型完全一致,检出率为100%;其中8例样本STR分型存在33个等位基因丢失,降解系数均大于2.6,且75.8%的等位基因片段长度大于300bp。当样本检测出16个STR基因座时,似然率与54个SNP相当。当样本检出大于17个STR时,似然率大于54个SNP。STR基因座片段长度与等位基因检出率之间呈负相关。除2例样本降解系数较小却发生等位基因丢失外,其余样本降解系数与等位基因检出率之间呈负相关。结论经福尔马林长期固定的组织DNA易降解,检测SNP明显优于STR,但需要更多的SNP以提高个体识别能力。     

利多卡因及MEGX在蛛网膜下腔麻醉致死犬体内死后再分布

目的研究利多卡因及其代谢产物单乙基甘氨酰二甲苯胺(MEGX)在蛛网膜下腔麻醉致死犬体内的死后再分布规律。方法犬6只随机分为A、B两组,分别经蛛网膜下腔注射0.5倍(6.34mg/kg)和5倍(63.35mg/kg)硬膜外麻醉极量的盐酸利多卡因,于死后0h、12h、24h、36h、72h取心血、外周血、肝、脑等,采用高效液相色谱法(HPLC)检测其中利多卡因及MEGX的含量。结果 A组犬死后72h,心血、外周血和脑中利多卡因含量与死亡当时的比值(Ct/C0)分别为4.74,14.87,7.67,均呈上升趋势(P0.05),MEGX含量与死亡当时含量差异无统计学意义(P0.05);B组犬死后72h,心血中利多卡因含量Ct/C0值为0.36,呈下降趋势(P0.05),脑中为3.48(P0.05)呈升高的趋势,肝中MEGX含量与死亡当时相比差异无统计学意义(P0.05)。结论蛛网膜下腔不同剂量麻醉致死犬体内利多卡因均会发生死后再分布,MEGX未发生死后再分布。     

脑震荡大鼠脑组织MDA、SOD、TNF-a及IL-1β表达变化

目的观察脑震荡大鼠脑组织中丙二醛（malondialdehvde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）活性及肿瘤坏死因子-ol（tumornecrosisfactor-a,TNF-a、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β表达的变化,探讨脑震荡后继发性脑损伤机制。方法建立大鼠脑震荡模型,Weil氏染色观察大鼠脑组织病理改变：光化学分析方法检测脑组织内MDA含量、SOD活性;免疫组化法检测大脑皮质和海马区TNF-a、IL-1β表达。结果Weil氏染色显示神经髓鞘排列紊乱,弯曲肿胀,12h后更加明显;脑震荡后大鼠脑组织MDA含量较对照组明显升高．而SOD活性较对照纽明显降低;脑震荡后大鼠皮质及海马区细胞胞浆中TNF-a、IL-1β较对照组表达量明显上调。结论脑震荡大鼠脑组织存在氧化应激和炎性损伤,可能在脑震荡后继发性脑损伤中起重要作用。     

大鼠软组织挤压伤后NO对肝组织TNF-α和IL-1β基因表达的影响

目的 探讨一氧化氮（nitric oxide,NO）在大鼠软组织挤压伤后肝组织TNF-α和IL-1β基因表达中的作用. 方法 将大鼠随机分成对照组、挤压组、挤压后氨基胍（aminoguanidine,AG）处理组、挤压后L-精氨酸（L-arginine,L-Arg）处理组,经实验处理后检测血清中ALT、AST活性和NO浓度,并利用RT-PCR技术观察肝组织中TNF-α、IL-1β基因表达情况. 结果 与对照组比较,挤压组肝组织中TNF-α、IL-1β mRNA表达明显上调（P＜0.05）,应用L-Arg后TNF-α、IL-1β mRNA表达进一步上调（P＜0.05）,而应用AG后上述指标明显下降（P＜0.05）;与对照组比较,挤压组血清ALT、AST活性以及NO浓度明显增加（P＜0.05）,应用L-Arg后血清ALT、AST活性以及NO浓度进一步明显增高（P＜0.05）,应用AG后上述指标则明显降低（P＜0.05）. 结论 大鼠软组织挤压伤诱导NO生成增多,内源性NO介导肝组织TNF-α和IL-1β基因表达上调.     

不能过多依赖利益犒赏机制

改革开放前,我们国家的管理基本上依赖于纪律规范机制来调整社会关系,但是光靠这一机制是不行的。调整社会关系的另一大机制就是利益犒赏机制,调整社会关系要靠这两个机制。     

吗啡依赖和戒断大鼠中枢cAMP和cGMP含量的变化

目的　研究吗啡依赖和催促戒断大鼠中枢cAMP和cGMP含量变化。方法　以剂量递增法连续皮下注射吗啡建立吗啡依赖模型 ,采用放射免疫学方法检测脑内cAMP和cGMP含量。结果　与生理盐水对照组大鼠比较 ,吗啡依赖大鼠的纹状体、间脑、中脑、脑桥和海马内cGMP含量均显著降低 ,cAMP含量和cAMP/cGMP比值显著升高 ,而小脑则无类似变化 ;与吗啡依赖组大鼠比较 ,纳洛酮催促戒断大鼠 ,其海马和纹状体内的cGMP含量显著下降 ,cAMP含量和cAMP/cGMP比值显著升高 ;其它部位无明显变化。结论　中枢cAMP和cGMP含量变化 ,可能是形成和维持吗啡依赖和戒断的重要分子机制之一。     

四态MVR-PCR检测河北D1S8基因座遗传多态性

D1S8(MS32)基因座是位于人类1号染色体(1q42-43)的小卫星(Minisatellite Variant Repeat,MVR),由长度为29bp的重复单位串联排列组成。在重复单位的5’端存在两个相邻的碱基替换G-A(SiteⅠ)和C-T(siteⅡ),Tamaki等[1]根据两个位置碱基替换的不同将D1S8核心序列命名为E、e、Y、y型,由此设计四种MVR-PCR特异性引物分别针对这四型核心序列,称为四态MVR-PCR技术。本文采用此技术检测了河北汉族群体100名无关个体的D1S8基因座,现报道如下。1材料与方法100份抗凝血液样品(河北省血液中心提供),采用酚/氯仿法提取基因组DNA。D1S8基…     

第22届国际法庭遗传学大会内容介绍

2007年8月21日~8月25日在丹麦哥本哈根召开了第22届国际法医遗传学大会,来自46个国家的法医遗传学领域635名科学家参加了这次大会。中国代表团有来自公安系统、医学院校、香港特别行政区及澳斯邦公司的参会代表20位。大会组织者邀请了6位不同领域的科学家作了特邀演讲,50位科学家作了口头报告,并展示了325张Poster,所有的口头报告摘要及海报摘要均收录在论文集中。此次大会是一次高水平的学术交流会,展现了世界法庭遗传学领域研究的最新进展。为了及时将这次大会的信息传递给国内的同行,我们对大会的主要议题、中文工作组分会等进行了总结…     

胸外心脏按摩致濒死期肝破裂一例

案例男，59岁。1992年6月24日22时口服中药方剂（含川岛IOg）煎汤急性中毒。经胸外心脏按摩（剑突处）、电除颤、吸氧输液等抢救无效．于次日凌晨4时4o分死〔。死后57小时尸检。男尸。发育正常，营养良好。皮肤无伤，胸廓两侧对称，胸肋骨无骨折，肋间肌及腹壁肌肉均无出血。腹腔有血性液体43O。11，肝左叶脏面人’部分被膜皱缩一被膜下出血，左叶近方叶处有一矢状破裂口，长4．scm，边缘呈细锯齿状，创口哆并不著，创壁破碎不整．创腔无凝血决。镜下见肝组织片状空泡变性或灶状坏死，仅支架残存、肝窦扩张充血，有多量淋巴细胞和中性白细…