中国汉族人群2个高变MVR基因座遗传多态性

常染色体小卫星基因座D16S309(MS205)位于16p13.3(AE006466)[1],核心序列为45~54bp,重复次数8~87次[2]。D2S44(YNH24)基因座位于2q21.3-q22(AJ001534)[3],核心序列为31bp。本文采用MVR-PCR技术,选择重复单位3′侧翼区引物(公共引物)和MVR特异性引物匹配进行PCR扩增,对中国河北汉族人群2个基因座遗传多态性进行了调查。1材料与方法1.1样本及DNA提取116份枸橼酸钠抗凝血样由河北省血液中心提供,采自无血缘关系汉族健康个体。常规饱和酚-氯仿法提取DNA。1.2MVR-PCRD16S309引物序列参见文献[2,4]。反应体系为25μl,分别加入5μl…     

大鼠DAI脑细胞凋亡与Phospho-Ser^727 Stat1表达的相关性

目的探讨Stat1是否参与弥漫性轴索损伤（diffuse axonal injury,DAI）后神经细胞凋亡的病理生理过程。方法应用自由落体撞击模型复制大鼠DAI模型,分为正常对照组、假手术组和打击后不同时间组（6、12、24、48、72h,5d和10d）。采用HE染色和镀银染色观察大鼠脑组织的病理改变,用流式细胞检测脑组织中脑细胞的凋亡率,RT-PCR法测定脑组织中bax和bcl-2的表达变化,免疫组织化学法测定脑组织中不同脑区727位丝氨酸磷酸化的信号转导与转录激活子1（Phospho-Ser727 Stat1）的表达情况。结果DAI后HE染色未见脑挫裂伤,镀银染色可见神经轴索扭曲肿胀,个别断端膨大形成轴缩球;损伤组脑细胞的凋亡率和脑组织中bax和bcl-2 cDNA扩增产物的比值24h达到最大值,随后下降;不同脑区Phospho-Ser727 Stat1表达升高,24h达峰后下降,至10d较对照组仍有显著差异;阳性细胞主要是神经元,在不同脑区也有一定量的神经胶质细胞阳性表达。脑组织中Phospho-Ser727 Stat1表达变化与bax和bcl-2的cDNA扩增产物比值的变化具有正相关性,相关系数r为0.921。结论大鼠DAI后Stat1的激活和损伤后脑细胞的凋亡有关,应与损伤后二次打击有关。     

STR基因座特性及其多态性

微卫星ＤＮＡ(ｍｉｎｉｓａｔｅｌｌｉｔｅＤＮＡ)或称短串联重复序列(ｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ,ＳＴＲ),约占人类基因组的10%。其分布均匀,重复单位长1～6ｂｐ,重复次数10～60次。ＳＴＲ基因座等位基因片段短(100～500ｂｐ),适合于陈旧及降解检材的分析,避免短片段等位基因优先扩增而造成的错误判型;易进行复合扩增,提高有限检材的利用率和检验速度。因此,ＳＴＲ基因座在法医学领域得到广泛应用。目前已发现数千个ＳＴＲ基因座,常用的有20个左右。在欧洲,至少75%的实验室用四核苷酸重复基因座,即ＴＨ01、ｖＷＡ31、Ｆ13及ＦＥＳ…     

河北汉族人群3个基因座的遗传多态性

<正> D16S310、D11S201基因座遗传多态性目前在国内尚未见报道,D3S1358基因座在河北汉族人群中也未见报道。本文作者采用PCR技术和变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳技术和银染方法,分别对中国河北汉族200余名健康无关个体进行了调查,同时对10个家系两代人进行上述3个基因座的遗传学分析。     

河北汉族人群线粒体DNA HV3(CA)n重复子长度多态性

线粒体DNA的控制区具有高度多态性和母系遗传等特征被广泛应用于法医学个人识别和母系亲权鉴定。目前法医学主要应用HV1、HV2区(16024~16365nt、73~340nt)序列多态性,在m tDNA 00438~00574nt的HV3区域也具有多态性[1],其中位于00514~00524的(CA)n重复子是一个长度多态性区域,重     

河北汉族人群X染色体3个STR基因座遗传多态性

本文调查了X染色体3个STR基因座在河北汉族人群中的遗传多态性,现报道如下。1材料与方法1.1材料血液样本来自河北汉族无关个体,男114名,女118名。1.2方法血液样本用酚-氯仿法提取DNA。3个基因座的引物序列参照基因组数据库(www.gdb.org),由北京赛百盛生物工程有限公司合成。扩增采用20μl反应体系,其中包括:10×buffer 2.0μl,DXS6801、DXS7424、DXS9902引物浓度分别为1pmol/μl、0.5pmol/μl、1pmol/μl,模板20ng,25mmol/L MgC l21.2μl~1.6μl,TaqDNA聚合酶1U,10mmmol/L dNTP 0.2~0.4μl。热循环参数参考Edelmann等[1,2]人的…     

四态MVR-PCR检测河北D1S8基因座遗传多态性

D1S8(MS32)基因座是位于人类1号染色体(1q42-43)的小卫星(Minisatellite Variant Repeat,MVR),由长度为29bp的重复单位串联排列组成。在重复单位的5’端存在两个相邻的碱基替换G-A(SiteⅠ)和C-T(siteⅡ),Tamaki等[1]根据两个位置碱基替换的不同将D1S8核心序列命名为E、e、Y、y型,由此设计四种MVR-PCR特异性引物分别针对这四型核心序列,称为四态MVR-PCR技术。本文采用此技术检测了河北汉族群体100名无关个体的D1S8基因座,现报道如下。1材料与方法100份抗凝血液样品(河北省血液中心提供),采用酚/氯仿法提取基因组DNA。D1S8基…     

应用MVR-PCR和银染法分析河北汉族人群D1S8基因座DNA结构多态性

研究D1S8基因座重复序列内部的变异,并进行数字编码。应用MVR－PCR和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对240名河北汉人无关个体进行检测。结果每个个体得到约30个数字编码,未发现任何两无关个体所有编码相同,30个编码完全相同的概率为3．55×10－11。3种重复单位a-型、t-型、o-型出现的频率分别为54.77％、42．54％、2．69％。为小卫星变异重复序列的研究及其在法医实践中的应用提供了一种新方法。     

河北汉族人群GATA A10、GATA H4基因座遗传多态性调查

本文应用聚合酶链反应及8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离扩增产物,结合银染显带的方法,对Y染色体特异基因座GATAA10、GATAH4遗传多态性在河北汉族人群中的分布进行调查。1材料和方法1.1样品河北汉族110名健康无关个体的枸橼酸钠抗凝血由河北省中心血站提供。1.2方法采用Chelex方