免疫抗A、抗B、抗H沉淀素血清的制备

本文介绍了用浓缩的分泌型人唾液免疫鸡,经吸收精制获得鸡抗A、抗B、抗H沉淀素血清的方法。用本法制备的抗血清,对相应血型人唾液的特异性沉淀价可达1:512倍以上,对非相应血型者的分泌液不出现非特异性沉淀反应。应用该血清进行环状沉淀试验、单向琼脂扩散试验等免疫学试验,可简便、准确地鉴定人唾液斑、精液斑等分泌液斑的ABO血型。     

制备抗人精液特异蛋白P30血清的研究

作者以精浆特异蛋白P30为抗原免疫新西兰白兔、豚鼠和鸡三种实验动物,制备了抗P30血清。用双向琼脂扩散法检测兔和豚鼠的抗 P30血清,其特异性和敏感性均达到目前国外同类产品的水平。抗 P30血清与阴道分泌物,血清、唾液、尿液、初乳以及羊精液、鸡精液均不出现交叉反应。用抗 P30血清检测混合的人精浆,其抗原效价为1:160;P30含量可测到12.5ug/ml。在三种动物的抗血清中,豚鼠抗 P30血清的抗体效价最高。以不同浓度的 P30测豚鼠、兔和鸡抗 P30血清抗体效价豚鼠平均滴度可达52.50,兔次之,鸡的抗 P30血清最差。经作者制备的抗 P30血清可用来确证精液。     

鸭IgG提取方法的比较试验

用辛酸-硫酸铵法提取鸭IgG并与传统提取方法硫酸钠、硫酸铵法进行比较.结果表明,3种方法回收的IgG依次为12.35、8.36和10.14 mg/mL,而且辛酸-硫酸铵法回收IgG纯度高,可用于免疫标记技术,比色谱层析快速、操作简单、价格低廉.用该法以鸭卵黄提取IgG,回收的IgG为13.58 mg/mL,氯仿法为8.55 mg/mL,PEG不能回收;辛酸-硫酸铵法从鸭卵黄得到的IgG活性最高.     

衣原体单克隆抗体在牛羊血清诊断上的应用

采用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出的抗衣原体单克隆抗体,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对本地区所采集的128份羊血清、90份牛血清进行检测.结果,羊血清阳性检出率为25.8%,牛血清阳性检出率为32.2%.选择50份羊血清、50份牛血清用已建立的检测衣原体抗体ELISA与间接血凝试验(IHA)进行比较,牛血清ELISA阳性检出率为32.0%,IHA为24.0%,ELISA比IHA试验高出8个百分点;羊血清ELISA阳性栓出率为26.0%,IHA为22.0%,ELISA比IHA高出4个百分点.     

RP-HPLC法测定血清中羟基喜树碱

建立了用RP -HPLC法测定血清中羟基喜树碱含量的方法。文中采用ODS不锈钢柱 (10cm×4.6mm,5μm) ,流动相为甲醇:0.625mol/L磷酸缓冲溶液 (pH6.4)35:65 ,流速为0.5ml/min ,检测波长为385nm ,羟基喜树碱的保留时间为4.4min。回收率为62.0% ,RSD=3.6 % (n=5)。在0～400ng/ml浓度范围内有较好的相关性 ,r=0.9946 ,血清中最低检出限为5ng/m1     

抗α-1酸性糖蛋白血清的制备

作者用分离纯化的α-1酸性糖蛋白免疫新西兰兔,制备抗α-1酸性糖蛋白血清。鉴定结果表明,制备的抗血清与进口商品抗α-1酸性糖蛋白血清特异性相同;与人血清其他蛋白无交叉反应。琼脂双向扩散法测得抗血清效价为128,检出α-1酸性糖蛋白的最低浓度为204μg/ml。     

手工乳化制备新城疫油乳剂苗的试验

用手工和机械乳化制备10组不同HLB值的新城疫油乳剂苗,分别免疫3月龄来航鸡,免疫后每隔1-2周采血检测血清HI抗体,直至第8周.结果,相同HLB值的手工和机械乳化的油乳剂苗的HI抗体效价无明显差异;攻毒保护试验表明两种方法乳化的油乳剂苗免疫鸡均能获得保护,而对照鸡全部死亡.多数手工乳化的油乳剂苗在37℃环境放置30 d物理性状稳定.     

山羊痘直接荧光抗体检测方法的建立与应用

用兔抗山羊痘病毒IgG制备荧光抗体,检测了临床发病山羊皮肤痘疹切片和山羊痘病毒B、Y、LD和QL株感染的BHK-21细胞中的病毒抗原.结果,皮肤痘疹切片、感染细胞抹片及飞片均呈阳性,而正常山羊皮肤和细胞对照为阴性;荧光抗体的最适工作浓度为1∶32,且这种荧光可被山羊痘标准阳性血清特异性抑制.表明,建立的山羊痘直接荧光抗体检测方法能对临床发病山羊皮肤痘疹和感染细胞中的山羊痘病毒抗原进行定位检测,为临床诊断山羊痘提供了一种简单快速的方法.     

禽呼肠孤病毒99G株σB编码基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

采用RT-PCR方法扩增禽呼肠孤病毒(ARV)99G株σB编码基因,序列分析表明,99G株σB编码基因与其他禽呼肠孤病毒的同源性为90%～99 9%,而与我国番鸭呼肠孤病毒S12株的同源性仅有60%;用BarnH Ⅰ和Xho Ⅰ酶将σB编码基因切下并克隆到表达载体pGEX-6p-1中,构建了重组表达质粒pGEX-σB;鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,σB基因在大肠杆菌中得到了高效表达,表达的融合蛋白占总蛋白的41.46%,融合蛋白的分子质量为66 ku,主要以包涵体形式存在;Western-blot结果显示,该融合蛋白能与抗ARV阳性血清发生特异性反应,表明重组蛋白具有良好的反应原性,可用于禽呼肠孤病毒病诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制.     

用甘肃棘豆草粉饲喂苦马豆素-BSA免疫山羊的血清相关酶分析

用甘肃棘豆草粉饲喂经苦马豆素(SW)-BSA免疫接种的山羊,检测分析了山羊血清中与中毒相关的酶的活性,以探讨SW-BSA免疫接种对动物机体组织器官的保护作用。将24只山羊随机分为免疫对照组、免疫攻毒组和未免疫攻毒对照组,免疫对照组和免疫攻毒组山羊接种SW-BSA,免疫攻毒组和未免疫攻毒对照组山羊按干重拌料饲喂10 g/(kg.d)甘肃棘豆草粉,检测血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、尿素氮(BUN)和α-甘露糖苷酶(AMA)的变化。结果表明,免疫攻毒组山羊较未免疫攻毒对照组山羊LDH活性升高延缓28 d,AKP活性升高延缓14 d,AMA活性降低延缓21 d,BUN活性升高延缓14 d,GOT活性升高延缓28 d。这些酶活性延缓变化,说明SW-BSA免疫动物后,在甘肃棘豆攻毒后的30 d内,能够有效地延缓SW对山羊肝、心和肾等组织器官的损伤。