片形吸虫第一内转录间隔区DNA多态性的研究

以不同地区的片形吸虫虫株为研究对象 ,经PCR扩增出了ITS 1部分基因片段 ,采用单链构象多态性 (SSCP)方法 ,并结合序列分析研究了不同地区片形吸虫ITS 1DNA的多态性。不同地区的样品经SSCP分析 ,显示 3种带型 ,第 1种为大片形吸虫的带型 ,第 2种为肝片形吸虫的带型 ,第 3种为 2种带形的混合带型。广西区样品和大部分贵州省样品属于大片形吸虫带型 ;四川省、黑龙江省和部分贵州省样品为混合带型 ;南京市和甘肃省样品为肝片形吸虫带型或混合带型。测序结果表明 ,根据ITS 1基因的序列变异位点可区分 2种片形吸虫 ;表现为混合带型的样品在变异位点具有多态性。本研究结果显示 ,ITS 1片段可作为遗传标记用以区分大片形吸虫和肝片形吸虫 ,同时也证实 ,在我国除了这 2种片形吸虫外 ,还可能存在着“中间型”的片形吸虫     

重组猪α干扰素的纯化及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用

建立重组猪α干扰素(rPoIFN-α)的毕赤酵母分泌表达工艺,甲醇诱导84 h时,rPoIFN-α的表达量最高,达650.3 g/mL。随后,依次采用亲和、离子交换、分子筛层析对获得的rPoIFN-α进行纯化,得到纯度为95%的rPoIFN-α,生物活性为5.63×106IU/mg。细胞病变抑制结果表明,以341 IU/mL的rPoIFN-α预处理Marc145,可以完全抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的增殖;在PRRSV感染后的24 h,1 367IU/mL的rPoIFN-α可以完全抑制PRRSV的增殖。结果表明,获得的rPoIFN-α可有效抑制PRRSV的增殖,为rPoIFN-α的临床应用奠定了科研基础。