猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用

为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌(APP)的PCR诊断方法,对用以扩增apxⅣA毒力基因3′端长约442 bp的核苷酸片段的引物、模板、TaqDNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度进行了优化筛选,并进行了特异性及重复性试验;以筛选出的优化条件,对临床可疑病料进行了PCR检测。结果,在25μL体系中,以5 pmol/μL引物、0.25μLTaqDNA聚合酶、2 mmol/L dNTPs、56℃退火温度对APP标准菌株apxⅣA毒力基因的扩增效果最好,重复性和稳定性高;而对类症菌株的扩增结果则为阴性,表明其特异性强。对分离到APP的病料PCR阳性率为100%(5/5);未分离到APP的纤维渗出性病料中,新鲜与陈旧病料PCR阳性率分别为70.59%(12/17)、50.00%(4/8),而非纤维渗出性病料的PCR结果均为阴性(0/45、0/9)。结果表明,建立的PCR方法特异、快速、稳定、敏感,优于细菌学方法,它可作为APP可疑病料的理想诊断方法。     

仔猪大肠杆菌病的诊断与防制

20 0 1年 9月 ,某集约化商品猪场 15～ 2 0日龄仔猪陆续出现下痢、发热 ,表现神经症状和死亡病例 ,发病率较高 ,经抗生素治疗虽有一定疗效 ,但易复发。笔者根据其流行特点、临床症状、病理变化和实验室检验 ,确诊为大肠杆菌病。经采取综合防制措施 ,病情得以控制。1　猪场基本情况该场为新建的万头集约化商品猪场 ,有 6 0 0头长白×大约克母猪 ,生产杜大长三元杂交商品猪 ,2 0 0 1年投入正常生产。栏舍结构和生产流程基本按现代养猪要求科学设计 ,产房为产床式独立单元结构 ,以周为单位全进全出 ,但产房瓦面高度相对较矮 ,前后栏舍间距不足 …     

集约化猪场猪衣原体血清抗体的检测

用间接血凝试验对广东3个大型集约化猪场进行衣原体病血清学调查,共检测286份血清,总阳性率35.3%,其中仔猪、生长肥育猪及母猪的阳性率分别为15.6%、25.8%和47.4%,XG猪场有流产、死产史母猪的阳性率(69.4%),显著高于正常经产母猪(45.5%);结合生产中存在的问题分析,认为衣原体病对广东集约化猪场母猪繁殖及其他猪的发育、生长已造成一定的危害.     

集约化猪场猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

猪传染性胸膜肺炎在我国有十多年历史 ,对该病的病原研究、诊断防制及血清学调查等已有不少报道。作者经多年观察 ,认为猪传染性胸膜肺炎对广东省养猪业的影响 ,已由过去的以种猪隐性感染为主发展为应激性急性发病 ,且有群发的趋向。为了进一步掌握该病在集约化猪场的发生情况 ,笔者进行了此项血清学调查工作。1　材料与方法1.1　材料　猪传染性胸膜肺炎间接血凝诊断抗原及阴性、阳性血清 :中国农业科学院兰州兽医研究所提供 ;间接血凝稀释液 :0 .15ｍｏｌ/ＬＰＢＳ (ｐＨ为 7.2 )加 10ｍＬ/Ｌ灭能兔血清 ;待检血清 :采自广东省珠江三角洲地…