猪源嗜麦芽窄食单胞菌16 S rRNA基因的克隆和序列分析

从临床病猪无菌采集抗凝血 ,抽提全血基因组DNA ,用能够扩增大多数真细菌 16SrRNA基因的通用引物 ,扩增出长度为 15 0 2bp的嗜麦芽窄食单胞菌的 16SrRNA基因 ;该基因与国外报道的嗜麦芽窄食单胞菌部分临床和环境分离株核苷酸序列的同源性达 99%以上。证实嗜麦芽窄食单胞菌可感染猪。     

应用琼脂免疫扩散试验检测番鸭细小病毒抗体

将分离的番鸭细小病毒通过正常发育的番鸭胚传代,分别取不同代次的病毒尿囊液经氯仿、聚乙二醇浓缩处理后制成不同代次的抗原.该抗原与抗番鸭细小病毒抗血清在含有20 g/L PEG 6000的琼脂平板上作用,可见有明显的沉淀线.     

猪伪狂犬病的诊断与防制

20 0 1年 1～ 4月 ,广东某猪场发生了以妊娠母猪流产、产死胎、母猪屡配不孕以及仔猪发病急、病死率高、高热稽留、出现神经症状为主要特征的疾病。通过流行病学调查、临床症状、病理变化、试验动物接种以及乳胶凝集试验 ,确诊为猪伪狂犬病。经过彻底消毒、灭鼠、紧急免疫接种等措施 ,疫情得到控制。1　发病情况广东某猪场共有经产母猪 5 64头 ,后备母猪 60头 ,均未使用过任何伪狂犬病疫苗。 2 0 0 1年 1月该猪场生产 87胎 ,出现16头死胎 ;2月生产 83胎 ,出现 3 9头死胎 ,1头干尸化胎 ;3月生产 90胎 ,出现 5 6头死胎 ,每窝死胎 1～ 5头 ,但…     

猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用

为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌(APP)的PCR诊断方法,对用以扩增apxⅣA毒力基因3′端长约442 bp的核苷酸片段的引物、模板、TaqDNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度进行了优化筛选,并进行了特异性及重复性试验;以筛选出的优化条件,对临床可疑病料进行了PCR检测。结果,在25μL体系中,以5 pmol/μL引物、0.25μLTaqDNA聚合酶、2 mmol/L dNTPs、56℃退火温度对APP标准菌株apxⅣA毒力基因的扩增效果最好,重复性和稳定性高;而对类症菌株的扩增结果则为阴性,表明其特异性强。对分离到APP的病料PCR阳性率为100%(5/5);未分离到APP的纤维渗出性病料中,新鲜与陈旧病料PCR阳性率分别为70.59%(12/17)、50.00%(4/8),而非纤维渗出性病料的PCR结果均为阴性(0/45、0/9)。结果表明,建立的PCR方法特异、快速、稳定、敏感,优于细菌学方法,它可作为APP可疑病料的理想诊断方法。     

鸭肝炎的研究进展

鸭肝炎 (Ｄｕｃｋｈｅｐａｔｉｔｉｓ ,ＤＨ )是雏鸭的一种高度致死性传染病。目前认为 ,鸭肝炎病毒 (Ｄｕｃｋｈｅｐａｔｉｔｉｓｖｉｒｕｓ ,ＤＨＶ)有 3个血清型 ,分别引起Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型鸭肝炎。Ｉ型鸭肝炎最早发现于美国 ,195 0年用鸡胚分离到ＤＨＶ。 195 3年开始蔓延到加拿大、英国、德国、意大利、法国、匈牙利、前苏联、印度、日本等国。二十世纪 6 0年代以来 ,我国兽医科技工作者对该病进行了调查研究和病原分离等工作 ,目前养鸭比较集中的一些省区均有该病发生和流行。 196 5年英国诺福克已接种了Ⅰ型ＤＨＶ弱毒疫苗的雏鸭发生…     

巴马香猪超前免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的免疫效果评价

为了评价高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗(JXA1-R)对仔猪超前免疫的免疫效果及安全性,给3头巴马香猪超前免疫弱毒疫苗JXA1-R 1头份/头,以3头同窝仔猪为对照组,接种等量疫苗稀释液,观察疫苗免疫后的临床表现,测定疫苗免疫后的抗体动态变化及排毒情况;免疫后第35天,采用高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(JXA1)攻毒,测定攻毒后的抗体变化、排毒情况及免疫保护作用。结果表明,巴马香猪超前免疫后第14天发生抗体阳转,鼻拭子样品、肛门拭子样品和血清样品中均检测到病毒核酸,同居的阴性对照组中有1头仔猪发生抗体阳转,提示该疫苗存在排毒现象。攻毒前免疫组和对照组的抗体阳性率分别为3/3和1/3;攻毒后免疫组和对照组的免疫保护率分别为3/3和1/3,表明该疫苗具有一定的免疫保护作用,但初生巴马香猪超前免疫后表现生长缓慢,被毛粗乱,提示该疫苗对仔猪具有一定的毒力,不适合用作超前免疫。     

番鸭细小病毒弱毒株VP2基因的分子克隆与序列测定

将番鸭细小病毒(MDPV)强毒Q株经番鸭胚连续传代,获得致弱株MDPV-26.根据已发表的MDPV的全基因序列,设计了1对引物LHMP7/LHMP8,同时在这2条引物中分别加入2种限制性核酸内切酶SacⅡ和KpnⅠ的酶切位点.应用PCR技术扩增了MDPV-26株的VP2基因片段.将扩增后的基因片段重组到pMD18-T质粒载体上,并对插入片段进行序列测定.测序结果表明,弱毒株MDPV-26与强毒株MDPV-Q的VP2基因序列相同率达99.7%,与国外分离株的同源性为98.3%,说明强、弱毒株的VP2基因序列变化不大.     

仔猪大肠杆菌病的诊断与防制

20 0 1年 9月 ,某集约化商品猪场 15～ 2 0日龄仔猪陆续出现下痢、发热 ,表现神经症状和死亡病例 ,发病率较高 ,经抗生素治疗虽有一定疗效 ,但易复发。笔者根据其流行特点、临床症状、病理变化和实验室检验 ,确诊为大肠杆菌病。经采取综合防制措施 ,病情得以控制。1　猪场基本情况该场为新建的万头集约化商品猪场 ,有 6 0 0头长白×大约克母猪 ,生产杜大长三元杂交商品猪 ,2 0 0 1年投入正常生产。栏舍结构和生产流程基本按现代养猪要求科学设计 ,产房为产床式独立单元结构 ,以周为单位全进全出 ,但产房瓦面高度相对较矮 ,前后栏舍间距不足 …     

番鸭细小病毒弱毒株VP2基因的序列分析

将番鸭细小病毒强毒株MDPV-Q经番鸭胚传代,获得致弱株MDPV-26,应用PCR技术扩增MDPV-26株的VP2基因片段,将扩增后的VP2基因重组到pMD 18-T质粒载体上,并对插入片段进行序列测定,将测序结果及由该结果推导的氨基酸序列分别与MDPV-Q株及国外已发表的MDPV相应序列进行同源性比较及分析.结果表明,MDPV 26与强毒株MDPV-Q的VP2基因序列及与国外分离株均具有很高的同源性.     

集约化猪场猪衣原体血清抗体的检测

用间接血凝试验对广东3个大型集约化猪场进行衣原体病血清学调查,共检测286份血清,总阳性率35.3%,其中仔猪、生长肥育猪及母猪的阳性率分别为15.6%、25.8%和47.4%,XG猪场有流产、死产史母猪的阳性率(69.4%),显著高于正常经产母猪(45.5%);结合生产中存在的问题分析,认为衣原体病对广东集约化猪场母猪繁殖及其他猪的发育、生长已造成一定的危害.