马散发性淋巴管炎的血液常规和生化特性探究

为探究马散发性淋巴管炎的发病、复发机制,通过对自然发病马匹的临床症状进行检查和综合评分,并对比复发前、后与有病史未发病以及健康无病史马匹的血液生化及常规检测结果,进行差异性比较和相关性分析。结果显示,患马表现为典型的低热、心率和呼吸频率明显升高及发病部位腿围显著增大等临床症状;呈现为白细胞、血小板数显著升高,淋巴细胞数显著降低且与临床严重程度呈正相关;白蛋白及球蛋白的质量浓度均显著高于正常马匹;钙、磷、血糖浓度显著降低、肌酐浓度显著升高等代谢增强现象。另外,有病史马匹肌酐浓度显著高于无病史马匹,其作为该病评价指标或病史调查指示参数用于马匹购买的评价还有待于进一步研究。与有病史未复发马匹相比,复发马匹白蛋白质量浓度显著升高,其高质量浓度可能是该病复发的诱因之一。因此,建议竞技马匹非训练期间降低高蛋白饲料摄入量,以防该病发生。总之,初步探讨了马散发性淋巴管炎的发病、复发机制,为该病的防治提供了参考。     

H9N2禽流感病毒HA2基因重组杆状病毒的表达

从pMD18-T-HA阳性质粒扩增了H9N2亚型禽流感病毒的HA2基因,将扩增到的 HA2基因克隆至昆虫杆状病毒转移载体pBlueBacHis2A中。将其与杆状病毒共转染于Sf9昆虫细胞,经蚀斑筛选纯化重组杆状病毒,用其感染Sf9昆虫细胞,并优化表达条件。SDS-PAGE和 Western-blotting分析表明,表达产物的分子质量约为27 ku。Dot-ELISA分析表明,表达的HA2 融合蛋白可与鸡抗H9N2亚型血清发生特异性反应,而与H5和H7亚型抗血清间无交叉反应。     

H7亚型禽流感病毒HA1基因在重组杆状病毒中的表达及其表达产物的抗原性

从pMD18-T-HA阳性质粒中扩增出H7亚型禽流感病毒(AIV)HA1基因,并亚克隆至昆虫杆状病毒转移载体pBlueBacHis2A,将筛选的重组质粒命名为pBlueBacHisH7-HA1,与线性化杆状病毒DNA(Bac-N-BlueDNA)共转染sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经3次蚀斑纯化,得到重组杆状病毒rpBlueHisH7HA1。Western-blotting和间接免疫荧光试验结果显示,HA1在昆虫细胞中得到表达,且表达产物具有抗原性。抗原特异性试验证明,重组HA1蛋白与鸡H5、H9亚型AIV抗血清不发生交叉反应。血凝试验证明,重组HA1蛋白具有良好的血凝性。     

H5亚型禽流感病毒HA1基因在Sf9昆虫细胞中的表达及其抗原性检测

利用pBlueBacHis2杆状病毒载体在昆虫细胞Sf9中表达H5亚型禽流感病毒(AIV)的 HA1基因。Western-blotting证明HA1在昆虫细胞中得到了表达,其产物具有抗原性;且不与 H7、H9 AIV的抗血清发生交叉反应,具有良好的特异性。Dot-ELISA结果显示,表达蛋白可以在非变性条件下与相应抗体作用,同样具有良好的抗原性。试验结果证明,表达的H5亚型AIV的 HA1蛋白,为检测禽类体内是否感染H5亚型AIV和监测免疫禽类血清H5抗体水平提供了优良的检测抗原。