利用AP-PCR对柔嫩艾美球虫不同地理株及其杂交株多态性的研究

用随机引物PCR(AP PCR)技术对鸡柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)黑龙江株(H)、山东株(S)及黑龙江株与山东株的杂交株(F1)进行了研究,同时对 2 个不同地理株的子代株与亲代株和F1 株的亲缘关系进行了分析。结果,鸡柔嫩艾美球虫不同地理株之间以及同一地理株的亲代与子代之间存在DNA多态性;并且不同地理株间的种内变异程度较大(Si=0.642 3~0.637 0);同一地理株亲代与子代之间的亲缘关系也稍有改变,但其变异程度不大(Si=0.983 0~0.981 1)。对F1 株的AP PCR分析发现,F1 株与H株、S株的相似值分别为0.692 9、0.682 5,介于H株与S株相似值和传代株间的相似值之间。结果表明,F 株既具有两亲本株的遗传性状,又发生了变异。     

猪三毛滴虫长春株的形态观察及其5.8 S rRNA基因分析

对从长春地区腹泻仔猪结肠中分离到的1株毛滴虫进行了形态观察,并采用PCR扩增该毛滴虫的5.8SrRNA基因,测序后与国外已报道的三毛滴虫进行核酸同源性分析,并应用DNAStar软件绘制系统发育进化树。形态观察表明分离的毛滴虫为猪三毛滴虫。猪三毛滴虫长春分离株5.8SrRNA序列与国外已报道的三毛滴虫高度同源。系统发育进化树表明该序列与已报道的猪三毛滴虫5.8SrRNA(序列号U85966.1),牛胎儿三毛滴虫5.8SrRNA(序列号U85967.1,AF339736.1,AF466749.1,AF466750.1,AF466751.1)和T.mobiliensis5.8SrRNA(序列号U86612.1)同属于一个亚群,但与另1株猪三毛滴虫5.8SrRNA(序列号AY349190.1)亲缘关系较远。形态观察和5.8SrRNA基因分析表明,从长春地区分离的猪毛滴虫为猪三毛滴虫。     

猪急性细颈囊尾蚴病的诊治

细颈囊尾蚴（Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｕｓｔｅｎｕｉｃｏｌｉｓ）是寄生于犬及其它肉食动物小肠内的泡状带绦虫（Ｔａｅｎｉａｈｙｄａｔｉｇｅｎａ）的幼虫。它可以寄生于猪、牛和羊等家畜的肝、肺以及网膜等组织引起细颈囊尾蚴病。本病对任何年龄、品种的猪均易感染,特别对...     

犬贾第虫病的诊治

犬贾第虫病是由犬贾第虫寄生于肠道引起的一种人兽共患寄生虫病 ,各种犬均易感染 ,尤以品种犬感染率高。大多数犬感染贾第虫后症状不明显 ,但 1岁以内的犬症状较为明显 ,若不及时治疗 ,会影响幼犬的生长发育 ,造成较大的损失。 2 0 0 0年春 ,吉林省某实验牧场的比格犬发生了贾第虫病 ,经确诊后及时治疗 ,很快控制了病情。1　基本情况　　 2 0 0 0年 4月 ,该场从北京购进 12只比格犬 ,包括成年犬和幼犬。购进时犬的精神、饮食均正常 ,饲喂以玉米面为主的全价饲料 ,采取自由采食。 1月后发现比格犬尤其是幼犬逐渐消瘦 ,并排稀粪 ,用抗菌消炎药…     

杜氏利什曼原虫NH36基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

应用RT-PCR技术扩增并克隆杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)NH36编码基因,经鉴定及序列分析,构建其原核重组表达载体,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting鉴定其表达产物。结果显示,获得的NH36开放阅读框为945 bp,编码314个氨基酸残基,与GenBank上发表的国际标准株NH36编码基因序列以及氨基酸序列同源性分别为88.57%(837/945)和89.17%(280/314)。表达蛋白为36 ku,经1 mol/L IPTG诱导6 h后的表达量最高;薄层扫描显示表达的蛋白占菌体蛋白总量的57%;该蛋白可被抗杜氏利什曼原虫的多克隆抗体血清识别。     

咪唑苯脲缓释剂在黄牛体内的药代动力学及组织残留量测定

用紫外分光光度计测定了咪唑苯脲缓释剂在黄牛体内不同时间的血浆药物浓度及组织药物残留量.结果为该药药代动力学符合一室吸收模型、动力学方程为C=2.7885(e-0.0032t-e-0.4229t).药代动力学参数为达峰时间Tmax为11.320 h±0.2955 h,峰浓度为2.804μg/mL±0.0029 μg/mL,吸收相半衰期t(1/2)α为1.643 h±0.9960 h,消除相半衰期t(1/2)β为215.061 h±22.2836 h,与肌肉注射咪唑苯脲注射液相比,半衰期延长了210.383 h.组织含量检测结果为注射后3月时脑、肝、脾、肾、心肌、肌肉中药物残留量分别为0.134 μg/g±0.0302μg/g、0.976 μg/g±1.2432μg/g、0.743μg/g±0.1864 μg/g、0.527 μg/g±0.2243μg/g、0.313μg/g±0.1723 μg/g和0.373 μg/g±0.0420 μg/g;4月时肝、脾、肾分别为0.276 μg/g±0.0437μg/g、0.113μg/g±0.0252 μg/g和0.182 μg/g±0.0337 μg/g.结果表明,咪唑苯脲缓释剂优于其他咪唑苯脲剂型.     

Dot-ELISA诊断猪弓形虫病的研究

本文报道了应用硝酸醋酸混合纤维素薄膜作载体进行Dot-ELISA试验诊断猪弓形虫病的试验方法的建立。试验中,封闭液、洗涤液和稀释液采用levy等(1987)方法并加以改进,加入EDTA并提高了反应温度,使得在“快诊膜”做成后35分钟内完成整个试验。此外,还做了不同载体、不同底物和不同反应时间对试验结果的影响试验。通过对160头份猪血清进行Dot-ELISA、PPA-ELISA和IHA检测,其阳性检出率分别为38.13％、30.63％和23.75％。且不与猪囊虫、猪旋毛虫病和猪瘟发生类属反应。初步证实了Dot-ELISA优于PPA-ELISA和IHA。具有快、敏、特、简等优点,便于在基层推广应用。     

犬等孢球虫病的诊断与防治

犬等孢球虫 (ｌｓｏｓｐｏｒａｃａｎｉｓ)属于艾美球虫科等孢球虫属 ,寄生于犬的小肠上皮细胞内 ,主要在小肠后 1/3段 ,也可寄生于大肠。据报道 ,等孢球虫呈世界性分布 ,幼犬的发病率较高 ,危害性大。 2 0 0 0年春季 ,长春市某实验牧场 2月龄的土种犬发生犬球虫病 ,笔者从犬粪便中分离出犬等孢球虫卵囊 ,并经及时治疗而痊愈。1　材料与方法1.1　粪便的采集与处理　收集长春市某自然发病犬的粪便 ,加10倍量自来水 ,充分搅拌 ,过 6 0目筛 ,然后再过 2 0 0目筛 ;将滤液以 30 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 10ｍｉｎ ,弃上清液 ,在沉淀中加入 3— 4倍330 ｇ…     

鸡柔嫩艾美球虫子孢子表面抗原基因λMzp5-7在Hela细胞中的表达

将已构建的柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)子孢子表面抗原pMD-Mzp5-7基因片段定向亚克隆到核酸疫苗载体pVAX1上,构建了真核表达载体pVAX-Mzp5-7,酶切鉴定正确后,用脂质体介导的转染法转染Hela细胞,进行了体外表达;并用裸DNA质粒经肌肉接种鸡体内表达。经Western-blotting及RT-PCR鉴定,表明该基因在Hela细胞及鸡体内均获得表达,并有一定的反应原性。     

应用间接ELISA检测微小隐孢子虫抗体的研究

以在大肠埃希氏菌中表达的微小隐孢子虫 (Cryptosporidum parvum )子孢子表面抗原CP15为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA。试验筛选出的最佳反应条件为 :大肠埃希氏菌CP15抗原包被量为 1μg/孔 ,用10 0mL/L的兔血清进行封闭 ,以正常大肠埃希氏菌裂解上清液稀释待检血清。试验结果表明 ,应用CP15重组蛋白作为诊断微小隐孢子虫抗体的抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点