猪传染性胃肠炎病毒重组核蛋白的纯化与Dot-ELISA抗体检测方法的建立

将重组猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)N基因原核表达载体pProEXHTb转化的大肠埃希氏菌 ,用IPTG诱导表达核蛋白 ,经过Ni NTA柱的纯化 ,获得纯化核蛋白。以该蛋白制备抗原 ,建立了以TGEVN蛋白重组抗原的Dot ELISA诊断技术 ,其抗原最适包被量为 1μg ,抗原预点膜在 4℃可保存 5周以上。本法快速简便 ,适合基层进行抗体检测     

猪传染性胃肠炎病毒核酸免疫昆明鼠的抗体应答

以猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)TH98株N基因的重组质粒 pHN为模板 ,Li 15和Li 2为上、下游引物扩增出TGEVTH98/N基因。将N基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)分别用BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后连接 ,构建了重组真核表达载体 pcDNA N。将昆明鼠随机分为 2组 ,分别肌肉注射 pcDNA N和pcDNA3.1(+) ,每只鼠 10 0 μg ,共免疫 3次 ,每次间隔 2周。首次免疫后第 0、14、2 1、2 8、35、39、4 7和 5 4d采血分离血清 ,采用ELISA检测抗体动态变化。注射pcDNA N组小鼠在首次免疫后第 39d检测到针对TGEVN蛋白的阳性抗体。     

鹅细小病毒VP3基因重组禽痘病毒转移载体的构建

从含有鹅细小病毒 (GPV)H1株主要结构蛋白VP3基因的重组质粒pPROEXHTb VP3中切取GPVH 1株VP3基因片段 ,将其亚克隆于 pSY5 3 8的EcoRⅠ位点 ,并将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ报告基因平端克隆于上述重组子的SmaⅠ位点 ,再用NotⅠ切下同时含有VP3基因和LacZ报告基因的片段 ,亚克隆于pSY681的NotⅠ位点 ,构建了含有VP3基因的重组禽痘病毒转移载体。上述结果为GPV基因工程疫苗的研制奠定了基础     

单克隆抗体鉴定的鸡T细胞体内功能特性试验

对鸡Ｔ细胞特异性单克隆抗体１Ｂ６鉴定的Ｔ细胞亚群进行了体内功能试验，表明１Ｂ６＋Ｔ细胞缺陷鸡接种新城疫ＬａＳｏｔａ疫苗后，抗体效价明显降低，证明１Ｂ６＋Ｔ细胞具有辅助Ｂ细胞产生抗体的重要功能。     

湖南大力进行文化创新、发展文化产业的启示

近年来，湖南文化产业在创新中加速发展，在发展中不断创新，走出了一条有特色的路子，创造了一种湖南文化现象。2008年7月，中央党校中青二班“关于提升国家形象”课题调研组赴湖南进行了为期八天的调研，深切地感受到湖南文化领域创新发展的强大活力，也从他们创新文化、发展文化产业的做法中得到许多启示。     

开展寒暑期社会实践活动

在大中学校开展寒暑期社会实践活动．是由国家教委、共青团中央和全国学联等部委联合倡导的。几年来．我校积极响应这一号召．成立了由学校主管校长任组长印有关单位领导参加的学生社会实践活动领导小组。下设办公室负责具体工作．对这一活动进计精心组织．周密布置、具体指导，在每个寒暑假期间都组织学生开展了形式多样、丰富多彩的社会实践活动。并取得了可喜的成绩，因而1988年受到了国家教委、共青团中央和全国学联等九部委的联合表彰。开展社会实践活动的形式有：1．在学生比较集中的地区成立社会实践营开展科技咨询，农业技术讲座、…     

猪传染性胃肠炎病毒国内分离株S基因克隆及与国外分离株的同源性比较

用猪睾丸细胞增殖并扩增猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)国内分离株TH 98,根据基因库中已发表的TGEVS基因cDNA序列 ,利用Oligo软件设计并合成 2对引物 ,进行逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,扩增出 2 .3kb和 2 .1kb2个片段 ,即Sa与Sb。将Sa与Sb先后插入到pUC18质粒载体上的EcoRⅠ和PstⅠ多克隆位点上 ,构建了重组质粒pUC S。根据TGEVS基因位点和 pUC18的物理图谱 ,用相应的限制性内切酶进行酶切及套式PCR方法鉴定、分析 ,证明克隆的pUC S为TGEVS基因。同时对pUC S进行序列测定分析 ,并与来自美国、英国和日本的 5个毒株进行核苷酸及编码氨基酸同源性比较 ,证明了S基因的高度保守性     

新形势下如何正确认识和解决人民内部矛盾

近年来，各种群体性事件时有发生，严重影响社会的稳定与和谐。新形势下，正确认识和解决人民内部矛盾，积极预防和妥善处理群体性事件，切实维护社会稳定，是各级党委、政府必须认真面对、思考的重大课题。     

A群猪轮状病毒G5型OSU株VP7基因的克隆及其重组杆状病毒的鉴定

利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出A群猪轮状病毒(PRV)G5型OSU株长度约为1.0kb的基因片段,将其克隆到pMD 18-T载体上进行测序鉴定,证明为该PRV的VP7蛋白基因,与已发表的该PRV VP7基因序列的同源性为99.8%.将该基因黏端克隆至表达载体PblueBAChisC质粒中,酶切及PCR鉴定表明获得了PRV-VP7蛋白基因与PblueBAChisC质粒的阳性重组子.纯化该重组质粒并与线性杆状病毒DNA分子Bac-N-Blue共转染昆虫细胞sf9,5 d后收获重组病毒.通过对重组杆状病毒DNA分子的酶切及PCR鉴定,确定PRV-VP7基因已正确插入.将经3次蚀斑筛选纯化后的该重组杆状病毒接种于sf9细胞大量增殖后,获得了重组杆状病毒PRV-VP7蛋白的真核表达.     

落实科学发展观应提高五种能力

实现科学发展，关键在人。各级领导干部肩负着引领科学发展的重任，必须在新的历史起点上率先完成自身能力素质的革命，特别是要提高以下五种能力。