牛结核病巢式PCR快速检测方法的建立

根据分枝杆菌(mycobacteria)保守的插入序列IS1081设计4条特异性引物,建立了快速检测牛结核病的巢式PCR方法。该方法一次扩增的敏感性是1.35 pg,二次扩增的敏感性是1.35 fg。在对95份PPD阳性牛临床病料组织和23份血液样本的PCR检测中,用引物TB-Q1和TB-Q2做一次扩增,阳性检出率分别为36/95(37.5%)和5/23(21.7%);用引物TB-B1和TB-B2做二次扩增,阳性检出率分别为81/95(85.3%)和14/23(60.9%)。该方法作为辅助PPD试验的快速检测方法用于牛结核病的流行病学调查,具有重要的实用价值和应用前景。     

鸭白细胞介素-2基因在毕赤酵母中的表达

根据GenBank中登录的鸭IL-2基因序列设计并合成了1对特异性引物,以经ConA诱导的广州鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360 bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18-T载体上.酶切鉴定、PCR鉴定及序列测定结果表明,获得了鸭IL-2成熟蛋白基因的完整克隆.测序结果表明,该成熟蛋白基因由360个核苷酸组成,共编码119个氨基酸.克隆的鸭IL-2基因与GenBank上序列号为AYl73028及AF294322的鸭IL-2基因的同源性高达99.4%.将目的基因克隆至真核表达载体pPICZáC上,构建了重组质粒pPICZáC-DuIL-2.酵母转化子经甲醇诱导发酵分泌表达了鸭IL-2基因.SDs-PAGE分析证实,鸭IL-2基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达成功,表达的重组蛋白的分子质量约为14.3 ku.     

伪狂犬病病毒gG-gD基因片段的扩增及克隆和序列测定

以伪狂犬病病毒(PRV)HB-9304株的基因组为模板,利用聚合酶链反应(PCR)对其gG-gD基因片段进行扩增,获得了预定大小的片段,将这一片段克隆到质粒载体pPK中.对重组质粒pPKGD进行限制性内切酶分析、PCR鉴定和克隆片段的序列测定,证实了克隆片段的可靠性.     

一起猪增生性肠病的诊断

20 0 3年 3月 ,广东省清远市某猪场后备猪发生以肠道出血、拉血便为特征的传染病 ,经病理剖检和PCR检测 ,诊断为猪增生性肠病。1　发病情况2 0 0 3年 3月 ,清远市某猪场有数只后备猪发生血便 ,以后又陆续有猪出现相似的症状 ,病猪表现拉带血稀便、发热、皮肤颜色苍白和食欲下降 ,但未出现死亡。2　病理剖检2 .1　大体病变　主要集中表现在消化道。回肠肠管外形变粗 ,肠壁增厚 ,肠壁浆膜面有明显的脑回样花纹 ;肠腔内有大量条状凝血块 ,肠黏膜明显增厚 ,皱折成脑回样皱壁 ;黏膜表面无光泽 ,有少量坏死组织碎片。盲肠和结肠外观呈暗紫色 ,肠…     

仔猪大肠杆菌性腹泻的病原分离鉴定及免疫效果观察

仔猪大肠杆菌性腹泻的病原分离鉴定及免疫效果观察余志东，李乃津，黄引贤，黄毓茂，李柠，袁少华，梁昭平，施均喻，陈连忠，蒋远云（华南农业大学广州５１０６４２）广东Ｊ、Ｙ两个猪场的哺乳仔猪发生严重的腹泻。７日龄内的仔猪拉黄色稀粪，仔猪迅速脱水消瘦和死亡；７...