多系统联合分析在复杂亲缘关系鉴定中的应用评估

目的对公安部物证鉴定中心自主研发的4种DNA扩增试剂盒在复杂亲缘关系鉴定中的联合应用评估。方法使用公安部物证鉴定中心自主研发的DNATyper TM19C试剂盒、DNATyper TMY29试剂盒、DNATyper TMX19试剂盒和DNATyper TM25试剂盒检测收集的302份复杂亲缘关系样本,并将结果与使用市面上已推广使用的PowerPlex?21 System试剂盒的检测结果进行对比分析,以此评估此次4种研发试剂盒的实用性和可靠性。结果DNATyper TM19C试剂盒、DNATyper TMY29试剂盒、DNATyper TMX19试剂盒和DNATyper TM25试剂盒的检出率分别为95.7%(289/302)、57.4%(70/122)、61.1%(110/180)、94.4%(285/302);对于不同DNA浓度样品的检测,这4种试剂盒的检出情况有一定区别,且以DNATyper TM19C试剂盒效果最好;与只有20个常染色体基因座的PowerPlex?21 System试剂盒相比,DNATyper TM19C和DNATyper TM25这两种试剂盒包含40个常染色体基因座,累积二联体排除率(CPE)大于(1-2.44×10-14),且在样品基因座出现差异时,DNATyper TM19C试剂盒的检测结果为正确分型。此外,DNATyper TM19C试剂盒具有最好的性价比。结论 DNATyper TM19C和DNATyper TM25常染色体检验试剂盒在复杂亲缘关系的鉴定中具有良好的系统效能和经济效应,且与DNATyper TMY29及DNATyper TMX19性染色体检验试剂盒参数兼容,可联合使用,对检验结果进行验证和补充,值得推广应用。     

PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因在溺死鉴定中的应用

目的采用PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因,评估其在溺死鉴定中的应用价值。方法 60只实验兔随机分为生前溺死（水中溺毙）、死后入水（空气栓塞致死后入水）、对照组（空气栓塞致死后不做处理）;溺死人体脏器组织;取各组织检材提取硅藻DNA,PCR扩增硅藻特异的核糖体小亚基（SSU）片段,用琼脂糖凝胶电泳检测、DHPLC检测分析。结果 6份硝酸消化法检测阴性的溺死人体器官组织检材经PCR及琼脂糖凝胶电泳检出5例阳性。生前溺死组肺、肝、肾硅藻检出率分别为100%、90%、85%,死后入水组仅肺检出硅藻（15%）,对照组各组织均为阴性;生前溺死组检出率明显高于死后入水组（P〈0.05）。10份溺死人体器官组织检材采用DHPLC法检出硅藻种类明显多于微波消解-扫描电镜法（P〈0.05）。脏器检出硅藻种类与溺死点水样一致。结论采用PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因,有助于溺死鉴定和溺死地点的推断,具有法医学应用价值。     

基于二代测序技术的多源遗传标记检测体系的构建与验证

近年来，法医实践中对复杂亲缘关系的鉴定需求越来越多，需要联合多种遗传标记进行判断，如STR、X/Y遗传标记、SNP、线粒体DNA等。二代测序技术可以将多种遗传标记纳入一个检测体系中。本文报道了开发出的一套包含29个常染色体STR、36个Y-STR、32个X-STR、71个Y-SNP以及mtDNA全基因组的检测体系DNATyper^TMNGSPanel v1.0。根据DNA分析方法科学工作组(SWGDAM)的验证指南，对该体系的重复性、准确性、一致性、灵敏度、混合样本、物种特异性等指标进行了评估。结果表明，该体系分型结果与毛细管电泳的一致性为99.72%，与ForenSeq?DNA Signature Prep Kit试剂盒相重合的基因座结果均完全一致。在0.5～10 ng DNA模板量范围内无等位基因丢失，而在0.25、0.125 ng时分别出现2、9个基因座的丢失。在男女混合比例为2︰1时女性成分开始出现等位基因丢失，混合比例为9︰1、4︰1、2︰1、1︰1时，检出率分别为54.72%、81.13%、98.11%、100%，若男女混合比例为1︰4则男性成分开始出现...