丝状霉形体山羊亚种巢式PCR检测方法的建立

根据已发表的丝状霉形体簇各成员核苷酸序列,设计合成了2对引物McF、McR和MmcF、MmcR,建立了可以鉴别丝状霉形体山羊亚种(Mycoplasma mycoidessubsp.capri,Mmc)的巢式PCR方法。特异性和敏感性试验结果显示,该方法只能对Mmc扩增出195 bp的片段,而对其他病原菌不能扩增出任何条带,它最低能够检测出10 pg的Mmc DNA,说明该方法具有良好的特异性和很高的敏感性。田间试验结果显示,对4株霉形体分离株及其病料均可扩增出Mmc特异性片段,表明,该巢式PCR方法可用于Mmc快速鉴定和流行病学调查。     

工伤保险赔偿与侵权损害赔偿关系探研

现代社会工伤事故频发，对工伤损害进行补偿最重要的两个法律制度是工伤保险和侵权损害赔偿（从引发事故责任主体划分，工伤事故可分为本单位侵权工伤事故和第三人侵权工伤事故。本文只探讨第三人侵权工伤事故）。但关于两种赔偿间的关系，理论及实务界均有争议，见仁见智。     

副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

采用超声裂解的副猪嗜血杆菌菌体上清作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法.通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度80μg/mL;37℃作用2 h后4℃过夜包被,待检血清的稀释度为1:320,抗原抗体反应时间为1 h,酶标二抗稀释度为1:15 000,作用时间为1 h,底物显色时间为15 min.待检血清S/N值≥2.5时判为阳性,S/N值<2.5时判为阴性.特异性、重复性和敏感性试验以及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法的特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,可用于副猪嗜血杆菌的检疫和流行病学调查.     

未动用的余额如何定性

[基本案情]2004年至2006年期间,被告人杨健敏在担任上海市松江区社会保险事业管理中心结算服务科副科长期间,利用负责小城镇征地人员参保和养老保险账户变更工作的职务便利,将上海松江科技园区社会保障服务中心因误办而退还给上海市松江区社会保险事业管理中心封存、停发征地人     

谁，照亮黎明

一缕缕泥土的清香沁人心脾．     

加强民主建设 畅通民情通道——萝北县配备村级文化教员的做法与启示

随着新农村建设工作的深入，各种问题不断涌现。农民素质需要提高，党的各项政策需要及时传达到农户，村级民主需要进一步完善，想开展文体活动、想学习农业科技却无人组织，对村干部的行为有意见不知道怎样合法提出建议，总之．很多事情都需要有一个“明白人”和“张罗人”。2006年初，萝北县委、县政府决定先在部分村屯选聘村级文化教员。其宗旨为：宣传贯彻党在农村的路线、方针、政策，提高村民民主、法律意识．丰富农民的业余文化生活，保持农村社会稳定，推进农村政治、经济、文化的协调发展.主要做法是：     

借一双翅膀助梦高飞

萝北县北部山区有个村子名叫金满屯，这里因曾盛产黄金而得名，同时这个名字也寄托了村民对“金子满屯”的富裕生活的向往。随着时间的流逝，黄金资源日益枯竭，村民占有的耕地面积又少，金满屯人逐渐陷入了“离不开土地、饿不着肚皮、富不了腰包”的怪圈中，“金子满屯”成了一个美丽而遥远的梦。     

丝状霉形体山羊亚种血清抗体间接ELISA检测方法的建立

利用丝状霉形体山羊亚种标准株PG3制备抗原,经纯化后作为包被抗原建立了间接ELISA方法,用于检测丝状霉形体山羊亚种血清抗体。经方阵滴定确定最佳抗原包被浓度为1.09μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶64,兔抗羊IgG辣根过氧化物酶结合物的最佳稀释度为1∶40 000,抗原抗体最佳结合时间为1 h。判定标准为样品D490 nm值与标准阴性血清D490 nm值之比(P/N)≥3为阳性,≤2.5为阴性,介于二者之间的为可疑。重复性和稳定性试验证明,建立的间接ELISA的稳定性和重复性良好,与间接血凝试验相比,其敏感性较高。     

牛支原体P48蛋白的表达及间接血凝检测方法的建立与应用

优化并合成牛支原体的p48基因,将其克隆到pET-32a(+)表达载体上后,转化大肠杆菌BL21(DE3),16℃低温诱导表达,获得可溶性表达的大小约66ku的重组P48蛋白。将纯化后的重组P48蛋白致敏戊二醛和鞣酸处理过的绵羊红细胞,建立了检测牛支原体抗体的间接血凝试验。重组P48蛋白致敏红细胞的最佳质量浓度是20~40μg/mL,牛支原体超免疫血清抗体效价达1∶2 048~1∶4 096。该方法对牛肺疫、牛巴氏杆菌病、牛病毒性腹泻病、布氏杆菌病、结核病、口蹄疫、牛生殖道支原体感染、里奇氏支原体感染、大肠杆菌病阳性血清的检测结果均为阴性。该方法的特异性为100%,敏感性为93.33%。与国外商品化的牛支原体ELISA试剂盒相比,平均符合率为96.15%。对833份田间血清和1 084份乳清进行检测,阳性率分别是15.37%和19.56%。结果表明,该方法敏感性高、特异性强和重复性好,可用于牛支原体抗体水平检测、牛支原体病的辅助诊断和流行病学调查。