呼和浩特等地区嗜尸性苍蝇mtDNA中CO Ⅰ基因序列检测及法医学应用

目的通过对嗜尸性苍蝇线粒体DNA(mtDNA)上细胞色素氧化酶辅酶Ⅰ(COⅠ)中278bp基因序列的分析,对其成虫及其幼虫、蛹、卵的种属进行鉴定,解决依据形态学方法难以鉴定的难题。方法随机分别采集呼和浩特和甘肃敦煌地区兔和猪尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、蛹及其腹中的卵,提取其mtDNA,经PCR扩增、产物检测与纯化、测序等,进行序列分析和构建系统发育树。结果双翅目嗜尸性苍蝇的种内基因差异均数小于1%,种间差异均数大于3%,成虫与幼虫、蛹、卵之间无显著性差异。结论mtDNA上COⅠ序列分析均可以有效地对嗜尸性苍蝇及其幼虫、蛹、卵进行种属鉴定,方法快速、简便和精确,可作为法医学嗜尸性苍蝇种属鉴别的可靠方法。     

嗜尸性苍蝇mtDNA中COⅡ基因序列检测

目的利用线粒体DNA(m tDNA)上细胞色素氧化酶辅酶Ⅱ(COⅡ)中635bp基因序列,解决嗜尸性苍蝇及其卵和幼虫种类鉴定的难题。方法随机采集放置在呼和浩特地区室外草地家兔尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、苍蝇腹中的卵。利用Chelex方法提取上述苍蝇m tDNA;通过Perk in-E lm er 9600扩增仪进行PCR扩增;琼脂糖水平电泳和银染显色技术进行扩增结果检测;PCR胶回收试剂盒纯化;AB I 377测序仪测序;DNAMAN 4.0序列分析软件,进行序列比对,截取等长度片段;MEGA2.1软件包进行序列分析和构建系统发育树。结果上述嗜尸性苍蝇m tDNA上COⅡ基因序列在双翅目嗜尸性苍蝇的种内差异均数小于1%,种间差异均数大于3%,成虫与幼虫、卵无明显差异。以此能够根据COⅡ序列差异判断两个个体是否同种。然而,对于亲缘关系非常接近的铜绿蝇和丝光绿蝇来说,由于二者的种内、种间进化分歧均数非常接近,运用上述两个片段则很难区别。结论m tDNA上COⅡ序列分析能有效地对绝大多数嗜尸性苍蝇进行种类鉴定。该检测方法快速、简便和精确,能作为法医鉴别嗜尸性苍蝇种类的依据。     

郑州地区食尸性苍蝇及幼虫mtDNA中COⅡ基因序列分析

目的 用mtDNA中细胞色素氧化酶辅酶Ⅱ(COⅡ)基因序列鉴定法医学中常见食尸性苍蝇及其幼虫的种类. 方法 收集郑州地区大白鼠尸体上的苍蝇及其幼虫,提取DNA,PCR扩增CO Ⅱ序列,测序,用Clustalx和MEGA 4.0软件对基因序列进行比对分析及构建系统进化树.结果 成虫与幼虫基因差异不明显,CO Ⅱ基因序列可以对棕尾别麻蝇、巨尾阿丽蝇和亮绿蝇进行鉴定,铜绿蝇与丝光绿蝇进化距离较近,CO Ⅱ序列不能将他们区分开,同时还发现巨尾阿丽蝇和亮绿蝇存在种群单核苷酸多态性. 结论 mtDNA中COⅡ序列能有效鉴定郑州地区部分常见食尸性苍蝇的种类,方法 简便、准确.     

重症肌无力伴冠状动脉粥样硬化死亡尸检一例

重症肌无力伴冠状动脉粥样硬化死亡尸检一例闫红涛，葛秀峰，郑旭东（河南医科大学法医学教研室，河南４５００５２）１病史简介王某，男，６４岁，于１９９２年９月４日以“两眼上睑下垂七个月，胸闷，四肢乏力四个月”为主诉人某医院胸外科。人院检查。神清，自动体位，...     

乙醇对家兔脑基底动脉零应力状态影响关系的研究

目的探讨乙醇对家免脑基底动脉零应力状态的影响。方法通过酒精灌胃的方法建立家兔血液乙醇浓度梯度的动物模型,测定各组家兔局部脑微区的血流灌注量;并通过测量血管张开角的方法测定各组家兔脑基底动脉的零压力状态。结果家兔灌酒后局部脑微区血流量值明显增大,至30min后,各组家兔脑血流量基本恒定;血液乙醇浓度持续增高,灌胃后1.5~2h,血液乙醇浓度达到峰值。灌酒后局部脑微区血流量值和血液乙醇浓度与灌酒量存在正相关关系。各组家兔酒精灌2h后基底动脉张开角均明显降低,各组之间差异存在统计学意义(P<0.05),且随灌胃量的增大基底动脉张开角降低越大。结论家兔基底动脉零应力状态随血液酒精浓度的增加而降低。     

河南汉族群体D4Satt、D5Saat miniSTR基因座遗传多态性

在法医学实践中,严重降解或者微量的生物检材采用STR分型,结果常不理想,而miniSTR技术是有效的一种检测方法[1]。本文从人类基因组DNA序列中查找并对D4Satt、D5Saat2个miniSTR基因座进行分型检测,希望可在日常法医学鉴定中作为核心STR基因座的补充[2]。1材料与方法1.1样本和DNA的提取134例河南汉族健康无关个体枸橼酸钠抗凝血样取自郑州市中心血站。采用酚-氯仿法提取DNA。1.2引物设计从GeneBank上下载4、5号染色体DNA序列,用Tandem repeats finder软件在距常用STR基因座较远的区域(50Mb以外)查找重复单位为3bp,连续重复12次以上的STR基因座。用Primer3软件设计引物,使扩增片段在150bp以内。引物由上海生工生物工程技术服务公司合成(表1)。1.3 PCR扩增及产物检测PCR扩增体系总体积20μL,包括1ng模板DNA,10×Buffer(含Mg2+1.5mmol/L)2μL,10mmol/LdNTPs 0.4μL,100μmol/L正反向引物各0.1μL,Taq表1 2个MiniSTR基因座一般信息基因座引物序列(5′-3′)重复区结...     

成人急性会厌炎伴脓肿形成猝死1例

<正> 1 案例资料 简要案情 王某,男,30岁。于某日6时30分以“急性喉阻塞”急诊入院。入院时有Ⅱ°吸气性呼吸困难,声嘶、咽痛、发热(38.1℃),给予吸氧及静滴地塞米松10 mg。7时左右,呼吸困难突然加重(Ⅲ°～Ⅳ°),立即行环甲膜穿刺,同时行床边紧急气管切开术。在行切过程中,由于病人体形肥胖及燥动不安,气管暴露欠佳,气管套管插入困难,连续5～6次插入才达气管,此时病人呼吸已停止。经紧急抢救30 min后,瞳孔散大,心电图示心跳消失,于7时30分死亡。     

大鼠死后腓肠肌内糖原含量变化与死亡时间的关系

目的研究大鼠死亡后腓肠肌内糖原含量变化与死亡时间之间的关系。方法采用断颈、机械性窒息、失血性休克三种方法分别处死大鼠,于死亡后0﹑0.5﹑1﹑1.5﹑2﹑3﹑4﹑8﹑12﹑18和24h时间点取腓肠肌,利用PAS染色方法并结合计算机图像分析技术分析糖原含量变化。结果大鼠腓肠肌内糖原含量和阳性面积随死亡后时间的延长而呈线性减少。结论腓肠肌内糖原含量和阳性面积可作为死亡时间推断的参考指标。     

三尖瓣下移畸形伴心房间隔缺损猝死1例

三尖瓣下移畸形伴心房间隔缺损罕见 ,本病在10 85例先天性心血管病的构成比为 0 1% [1] 。因本病而猝死的尸检案例国内尚未报道 ,现报告如下。1　案情介绍陈某 ,女 ,2 9岁 ,农民 ,1991年结婚 ,婚后生育一男孩儿 ,曾做两次引产手术 ,能正常参加劳动 ,2 0 0 0年某日与他人发生纠纷经劝解后倒地死亡。2　检　验尸检 :全身除尸表几处擦伤外 ,余未见异常。心脏重 311ｇ ,左、右室后壁交界处向内凹陷。右心耳腔高度扩张 ,右心耳壁明显变薄 ,呈半透明状 ,房间隔筛状缺损 (照片 1) ;右心房腔明显变大 ,三尖瓣瓣口由隔瓣和后瓣组成 (照片 2 ) ,向下…