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为建立肺炎克雷伯菌TaqMan荧光定量PCR检测方法,根据肺炎克雷伯菌16SrRNA基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,通过反应条件优化和特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品的检测,建立了肺炎克雷伯菌TaqMan荧光定量PCR。结果显示,该方法与猪肺炎支原体、猪鼻支原体、臭鼻克雷伯菌、鼻硬结克雷伯菌、多杀性巴氏杆菌、链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌、沙门菌、肠球菌、乳杆菌、解淀粉芽胞杆菌、猪丹毒杆菌、奇异变形杆菌和化脓隐秘杆菌共15种细菌无交叉反应;标准品浓度在2.29×109~2.29×104 copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低可检测到2.29×102 copies/μL的标准品阳性质粒;批内和批间变异系数均小于3%。临床样品的检测结果表明,该方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强和检测快速的优点,可用于肺炎克雷伯菌感染的早期诊断、样品的快速检测以及肺炎克雷伯菌的定量分析。  相似文献   
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为了确诊疑似肉鸡和蛋鸡鼻气管鸟杆菌(ORT)感染并研究其病原的新生物学特性,对其病原进行分离鉴定并分析其16SrDNA序列特征、溶血活性、凝血活性和药物敏感性。从云南省有鼻炎症状的蛋鸡和肉鸡中分离到5株革兰氏阴性多形性杆菌,分别被命名为YN11061、YN12071、YN12072、YN12091和YN12092。生化试验表明,5株分离株氧化酶阳性,过氧化氢酶阴性,发酵葡萄糖、乳糖、半糖、麦芽糖、甘露糖和果糖,产酸不产气;16SrDNA序列分析表明,5株分离株与GenBank上12株国外代表株之间的核苷酸序列同源性为99.3%~100%,进一步鉴定为ORT。溶血试验和凝血试验表明,5株分离株具有β溶血性,能够凝集戊二醛醛化的绵羊红细胞。5株分离株同时对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、红霉素、氧氟沙星、诺氟沙星显示多重耐药性。结果证实,云南省存在ORT感染。本研究首次报道了ORT的溶血性和凝血性,为ORT的分离鉴定和新型诊断检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   
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九一路是永定县城最繁忙的交通要道。然而随着城市的不断发展,加之管理落后,经常发生拥堵。为此,我四处调查了解情况,连续两年提出建议,一切都是——  相似文献   
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李富祥 《学理论》2010,(3):171-171
从资源环境与城乡规划管理专业实践教学改革的目标出发,探讨提高实践教学改革质量的途径与方法,提高本专业的实践教学质量。  相似文献   
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