不同穴位艾灸对腹泻模型小鼠腹泻指数及小肠AQP8、VIP及SP表达的影响

目的 探讨不同穴位及配伍对腹泻模型小鼠腹泻指数的影响及艾灸干预腹泻的作用机制。方法 将昆明小鼠90只，随机分为正常组、模型组、天枢组、大肠俞组及天枢大肠俞组。采用番泻叶灌胃法建立小鼠腹泻模型，对天枢组、大肠俞组、天枢大肠俞组大鼠进行艾灸，其中天枢组选取双侧天枢穴，大肠俞组选取双侧大肠俞穴，天枢大肠俞组选取一侧天枢、大肠俞 (隔日交换对侧)，观察各组小鼠72 h后腹泻指数及小肠水通道蛋白8（aquaporin protein-8，AQP8）、血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）及P物质(substance P，SP)免疫阳性细胞表达的变化。结果 与正常组比较，模型组腹泻指数显著增高(P＜0.05)；与模型组比较，天枢组、大肠俞组、天枢大肠俞组腹泻指数显著降低(P＜0.05)；与天枢组、大肠俞组比较，天枢大肠俞组腹泻指数显著降低(P＜0.05)。与正常组比较，模型组小肠组织AQP8免疫阳性细胞表达显著减少(P＜0.05)，VIP、SP免疫阳性细胞表达显著增加(P＜0.05)；与模型组比较，天枢大肠俞组小肠组织AQP8免疫阳性细胞表达显著增加(P＜0.05)，VIP、SP免疫阳性细胞表达显著减少(P＜0.05)。结论 天枢与大肠俞配伍治疗腹泻具有协同效应，艾灸治疗腹泻机制可能与上调AQP8表达或抑制VIP、SP表达有关。     

电针时间对急性心肌缺血大鼠保护作用及心肌核转录因子-κB表达水平的影响

目的 观察电针时间对急性心肌缺血大鼠心脏保护作用及对心肌核转录因子-κB(nuclear transcrip-tic factor-κB,NF-κB)表达的影响,探讨电针干预急性心肌缺血的机制.方法 将SD大鼠随机分成正常组、模型组和电针即刻组、电针1d组、电针3d组、电针5d组、电针7d组,每组6只.采用结扎心脏冠状动脉左前降支法制备急性心肌缺血大鼠模型.电针心经"神门-通里"段,每次30 min,频率2 Hz、强度为1 mA的断续波分别进行即刻、1 d、3 d、5 d、7 d的电针治疗.用PowerLab 16导生理记录仪记录心电图;酶联免疫法检测血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)、缺血修饰白蛋白(ischemia modified albumin,IMA)水平;Western blot检测心肌组织NF-κB蛋白表达水平,荧光定量PCR检测NF-κB mRNA表达水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠ST段抬高,血清CK、CK-MB、IMA水平显著升高(P<0.05),NF-κB蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05).与模型组比较,即刻电针组大鼠血清IMA水平差异无统计学意义(P>0.05),CK、CK-MB水平显著降低(P<0.05),其他各电针组CK、CK-MB、IMA水平逐渐降低,以电针7 d组降低最为显著(P<0.05);即刻电针组、电针1 d组大鼠心肌组织中NF-κB蛋白及mRNA差异无统计学意义(P>0.05),电针1 d、3 d、5 d、7 d组表达水平呈下降趋势,以电针7 d组下降最为显著(P<0.05).结论 电针心经从第3天开始改善急性心肌缺血,且在治疗7 d后效果最为明显,其机制可能与逆转心肌组织NF-κB表达有关.     

熏器灸法的作用及其机制探讨

熏器灸法是熏灸法的一种,是指将艾条一端或以艾绒置于特制的熏灸器内点燃后,以其艾烟熏灸患处的一种施灸方法.本法最早见于马王堆汉墓出土的帛书<五十二病方>,有用干艾、柳蕈熏治"朐养(肛门部瘙痒)"的记载.     

针刺上巨虚穴对慢传输型便秘小鼠结肠组织Cajal间质细胞数的影响

目的 探讨针刺上巨虚穴治疗慢传输型便秘（slow transit constipation,STC）的机制。方法 将40只小鼠分为正常组、模型组、上巨虚组（针刺双侧上巨虚）、非经非穴组（针刺小鼠臀部两处非经非穴点）,每组各10只。采用复方地芬诺酯灌胃法复制小鼠STC模型。观察各组首次排便时间、12 h内排便粒数,采用免疫组织化学方法观察各组小鼠结肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)数量。结果 与正常组比较,模型组小鼠的首次排便时间明显延长 （P<0.01）,12 h内排便粒数和结肠ICC数量明显减少（P<0.01）;与模型组比较,上巨虚组小鼠的首次排便时间明显缩短（P<0.01）,12 h内排便粒数和结肠ICC数量明显增多（P<0.01）。结论 针刺上巨虚穴对STC具有明显的改善作用,其作用机制可能与升高结肠组织ICC数量有关。     

针刺心经对急性心肌缺血模型大鼠血流动力学指标的影响

目的 观察针刺心经对急性心肌缺血模型大鼠心电图和血流动力学指标的影响,探讨针刺抗急性心肌缺血的效应。方法 将SD大鼠随机分为伪手术组、模型组、针刺心经组、非经非穴组,每组各10只,通过冠状动脉左前降支结扎法复制大鼠急性心肌缺血模型,针刺心经组取“神门（HT7）—通里（HT5）”经脉段,非经非穴组取大鼠臀部非经穴刺激点,各刺入3根1寸毫针,间距约2 mm;电针每次30 min,每天1次,连续3次。观察比较各组大鼠血流动力学指标心率（heart rate,HR）、平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）和心率收缩压乘积（rate pressure product,RPP）。结果 末次针刺后即刻（0 min）,与伪手术组比较,模型组大鼠HR显著增加,MAP、RPP显著下降 （P<0.01）;与模型组、非经非穴组比较,针刺心经组大鼠HR显著下降,MAP、RPP显著上升（P<0.05,或P<0.01）; 末次针刺后10、20、30 min,与模型组、非经非穴组比较,针刺心经组大鼠HR显著下降,MAP、RPP显著升高 （P<0.01）。结论 针刺心经可逆转急性心肌缺血大鼠心电图和血流动力学指标的异常变化,具有改善急性心肌缺血的确切效应。     

基于16S rDNA测序技术探索白头翁汤灌肠 对湿热型溃疡性结肠炎大鼠肠道菌群的影响

目的 采用不同剂量白头翁汤对比美沙拉嗪干预治疗湿热型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）大鼠，观察肠道菌群是否参与了UC的发病过程及药物治疗前后肠道菌群的变化情况。方法 随机将62只SD健康雄性大鼠分为正常组，模型组，白头翁汤低、中、高剂量组和美沙拉嗪组，其中正常组12只，其余各组10只。采用三硝基苯磺酸/乙醇复合法复制UC大鼠模型。模型复制成功后，白头翁汤低、中、高剂量组分别以白头翁汤每日2.15、4.31、8.62 g/kg灌肠，美沙拉嗪组予以美沙拉嗪灌肠液每日0.35 g/kg灌肠，正常组和模型组予以生理盐水灌肠，连续给药14 d。治疗结束后观察各组大鼠一般情况和疾病活动指数，光镜下观察结肠病理变化，并收集大鼠结肠新鲜的粪便，提取粪便微生物DNA，测序及分析PCR扩增基因组DNA，采用Miseq平台测序。结果 ①与模型组相比，白头翁汤各剂量组和美沙拉嗪组体质量逐渐回升，便血及腹泻次数减少。②与模型组比较，白头翁汤各剂量组、美沙拉嗪组疾病活动指数评分明显降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。③模型组大鼠菌群丰度、多样性均降低，白头翁汤及美沙拉嗪治疗后菌群丰度及多样性均有提升。④模型组大鼠厚壁菌门与拟杆菌门比值较正常组升高，白头翁汤和美沙拉嗪治疗后二者比值回调。⑤在菌群构成方面，UC大鼠较正常大鼠具有较低的普氏菌属、乳杆菌属生物丰度，白头翁汤和美沙拉嗪治疗后可回调普氏菌属、乳杆菌属益生菌丰度。结论 肠道菌群参与了UC的发病过程，白头翁汤和美沙拉嗪可能通过调节肠道益生菌而起到对于疾病的治疗作用。     

电针预处理不同原络配穴对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1蛋白表达的影响

目的 观察电针预处理不同原络配穴对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症因子表达的影响，初步探讨其保护心肌的作用机制。方法 采用冠状动脉左前降支结扎再灌注法复制急性心肌缺血再灌注损伤模型，将模型大鼠随机分为模型对照组、神门支正组、神门通里组、大陵内关组、大陵外关组，每组6只，另取6只大鼠设为假手术组。电针预处理组分别选取神门、支正、通里、内关、大陵和外关穴位，用电针仪进行电针刺激，刺激电压1 V，频率为2 Hz，每日1次，每次20 min。模型复制前共刺激14 d。假手术组、模型组不给予电针刺激。监测大鼠心电图，分析ST段位移情况；采用免疫组织化学法检测心肌组织肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）、细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2, COX-2）表达水平。采用Wester blot 法检测心肌组织COX-2蛋白相对表达水平。结果 电针预处理不同原络配穴均可显著降低急性心肌缺血再灌注损伤模型大鼠升高的ST段电压(P<0.05)，以神门支正组的效应最显著。免疫组织化学法检测结果显示，电针预处理不同原络配穴均可显著降低模型大鼠心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1表达水平(P<0.05)， 以神门支正组的效应最显著。Western blot法检测结果显示，各组心肌组织COX-2蛋白表达水平与免疫组织化学法检测结果相一致。结论 电针预处理减轻急性心肌缺血再灌注损伤的机制与调节心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1表达水平有关，电针神门、支正穴的效应最为显著。     

海马齿状回在针刺心经抗心肌缺血中的作用

目的 观察海马齿状回（dentate gyrus,DG）区在针刺心经干预大鼠急性心肌缺血损伤中的作用。方法 将60只大鼠随机分为伪手术组、模型组、针刺组、损毁组,每组15只。通过开胸结扎心脏冠状动脉左前降支复制大鼠急性心肌缺血模型,其中针刺组和损毁组选取手少阴心经“神门-通里”经脉段,给予电针干预,电流强度为1 mA,频率为2 Hz,每日电针30 min,连续干预3 d,伪手术组和模型组不予电针处理。观察各组大鼠心电图、海马DG区细胞形态以及神经细胞放电频率的变化。结果 与伪手术组比较,模型组心率和ST段电压均显著升高（P<0.05）;与模型组比较,针刺组心率和ST段电压均显著降低（P<0.05）;与针刺组比较,损毁组心率和ST段电压均显著升高（P<0.05）。伪手术组大鼠海马DG区神经细胞排列紧密,细胞核大而圆,胞质色浅而均匀,尼氏体丰富;模型组大鼠海马DG区神经细胞排列较为稀疏,细胞体积变小,尼氏体减少;针刺组大鼠海马DG区神经细胞排列相对较为紧密,细胞体积较大,尼氏体相对增多。与伪手术组比较,模型组海马DG区神经细胞放电频率显著增加（P<0.05）;与模型组比较,针刺组海马DG区神经细胞放电频率显著减少(P<0.05)。结论 海马DG区可能是针刺改善急性心肌缺血损伤的关键中枢之一。     

刺络拔罐联合熏灸治疗血虚风燥型局限性神经性皮炎疗效观察

目的 观察刺络拔罐联合熏灸疗法治疗血虚风燥型局限性神经性皮炎的临床疗效。方法 将60例患者随机分为对照组和治疗组，每组30例。治疗组采用刺络拔罐联合熏灸治疗，对照组给予卤米松乳膏外用。比较两组治疗前后临床症状、体征总积分，临床疗效，肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α, TNF- α）、白细胞介素1β（interleukin- 1β, IL- 1β）和白细胞介素6（interleukin- 6, IL- 6）水平以及复发率。结果 两组治疗后临床症状、体征总积分及TNF- α、IL- 1β、IL- 6水平均较治疗前显著降低（P＜0.05）。治疗组治疗前后临床症状、体征总积分和TNF- α、IL- 1β、IL- 6水平差值均大于对照组（P＜0.05），且治疗后3、6个月，治疗组复发率均显著低于对照组（P＜0.05）。结论 刺络拔罐联合熏灸治疗血虚风燥型局限性神经性皮炎疗效显著，能有效降低炎症反应，且复发率低。     

细胞凋亡参与脑心综合征心肌损伤及针刺干预作用

目的 观察心肌细胞凋亡在脑心综合征(cerebral-cardiac syndrome，CCS)发病中的作用机制及针刺的干预作用。方法 从60只健康SD大鼠中随机选择10只作为伪手术组，其余50只用于CCS模型复制，从模型复制成功的大鼠中随机选取30只，分成模型组、针刺组和非经非穴组，每组10只。采用胶原酶加肝素联合注射大鼠尾状核方法复制CCS模型，伪手术组向大鼠尾状核注入等量生理盐水。模型复制后72 h处死动物，分别采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling，TUNEL)和免疫组织化学法检测心肌组织病理变化、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)的表达。结果 HE染色示伪手术组心肌结构正常，模型组心肌细胞变性、坏死，大量平滑肌断裂；TUNEL及免疫组织化学染色提示模型组出现较多凋亡细胞，Caspase 3大量表达，针刺组TUNEL染色阳性细胞和Caspase 3阳性细胞均较模型组和非经非穴组显著减少(P<0.01)。结论 心肌细胞凋亡参与了CCS大鼠心肌损伤，其机制可能与上调凋亡蛋白酶Caspase 3表达有关，而针刺可拮抗CCS大鼠心肌组织细胞凋亡。