中华鳖全血呼吸爆发化学发光检测方法的建立

为进一步研究中华鳖的先天免疫能力及其机理,以酵母多糖为吞噬底物,通过对鲁米诺浓度、全血稀释度和检测温度等条件的优化,建立了中华鳖全血呼吸爆发的化学发光检测方法,并用此方法对放置不同时间的全血和稀释血液进行了呼吸爆发检测效果的比较。结果表明,鲁米诺浓度为1×10-4mol/L,检测温度为31.5℃时,以0.4~0.8μL/mL的中华鳖全血进行检测可获得理想效果。保存6 d的全血仍可检测到呼吸爆发,稀释全血放置30 h后不再产生呼吸爆发。     

中华鳖TLR2部分序列的克隆及其组织表达差异分析

为探究中华鳖天然免疫的分子机制,针对TLR2(Toll-like receptor 2)保守区设计兼并引物,从中华鳖脾cDNA中扩增出了740bp的目标序列。测序和序列分析结果表明,该序列包含富含半胱氨酸型C端结构域、跨膜结构域和TIR结构域;与斑马鱼、鸡等脊椎动物相应的TLR2序列相似性为60.5%～74.4%。采用荧光定量PCR检测中华鳖感染嗜水气单胞菌后各组织TLR2mRNA表达的变化,结果显示,感染后第24小时,中华鳖脾和外周血TLR2mRNA相对表达水平升高,其中外周血中的增幅最显著,是对照组的8.57倍;中华鳖外周血经4μg/mL酵母聚糖刺激后,第2小时TLR2mRNA相对表达水平较高。首次获得了中华鳖TLR2部分cDNA序列,并分析了不同刺激物对中华鳖TLR2mRNA转录的影响。     

土鳖虫总生物碱对家兔心泵功能的影响

实验结果表明:家兔静脉分别注射土鳖虫总生物碱5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg对兔心脏均呈明显的负性作用。即左室收缩压、左室舒张末期压力、左室压力最大速率均降低,右心房压力升高,心电图P-R传导见心率减慢,S-T段轻度缺血改变。当用至20mg/kg以上时,心电图出现明显的S-T段缺血改变,并有室性早搏。     

冬虫夏草菌丝水提液对SP2/0细胞凋亡的影响

在冬虫夏草菌丝水提液诱导下,采用Hoechst33342荧光染色、MTT、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等方法,观察和分析了SP2/0细胞的凋亡情况。结果显示,冬虫夏草菌丝水提液可抑制SP2/0细胞增殖,在荧光显微镜下,凋亡细胞呈亮绿色,DNA琼脂糖电泳可见典型的“阶梯状”条带,Annexin-V-FITC和碘化丙啶(PI)双染后流式细胞仪分析显示,细胞凋亡数量明显增多。表明,冬虫夏草菌丝水提液对SP2/0细胞增殖的抑制作用可能与诱导其凋亡有关。     

紫藤瘤中化合物抗农作物病原真菌活性研究

目的 研究紫藤瘤中分离得到的单体化合物抗农作物病原真菌活性。方法 采用十字交叉法测定紫藤瘤中分离到的单体化合物对5种农作物病原真菌的体外抑制率。结果 分离得到的单体化合物对小麦赤霉菌、辣椒枯萎病菌、棉花枯萎病菌、油菜菌核病菌、玉米穗腐菌5种病原真菌均有较好的抑菌效果,尤其是对油菜菌核病菌的抑菌效果最为显著。0.6 mg/mL丁香脂素对油菜菌核病菌抑制率达到36.72%,0.75 mg/mL (3S)-7-O-methylvestitol对油菜菌核病菌抑制率达到40.26%,0.1 mg/mL白桦脂酸对油菜菌核病菌抑制率高达84.52%。结论 从紫藤瘤中分离得到的部分单体化合物具有抗农作物病原性真菌活性。     

湖南省华支睾吸虫线粒体cox1和nad1基因的克隆及进化分析

为了研究湖南省华支睾吸虫分离株线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅰ亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅰ基因(nad1)部分序列(pnad1)的遗传变异情况,并用pcox1和pnad1序列构建华支睾吸虫与其他吸虫的种群遗传进化树。应用聚合酶链反应扩增华支睾吸虫虫株的pcox1和pnad1,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,然后用Phylip3.67程序中的MP法和MEGA4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树。结果显示,所获得的pcox1和pnad1序列长度分别为1 100bp和790bp,种系发育进化表分析表明,25个华支睾吸虫分离株位于同一分枝。证实华支睾吸虫pcox1和pnad1序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记,从而为华支睾吸虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定基础。     

中华鳖胸腺的毛细血管和网状纤维观察

应用光学显微镜和电子显微镜技术对中华鳖胸腺毛细血管和网状纤维的结构和分布特点进行了观察，发现其胸腺皮质毛细血管丰富，具有典型的血胸腺屏障；髓质毛细血管的结构不构成血胸腺屏障。胸腺髓质具有较丰富的网状纤维，有的聚积成束，有的分支呈细网状；皮质部网状纤维主要分布于小梁和毛细血管周隙，其它部位未见分布。     

冬虫夏草对肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：观察冬虫夏草菌丝对体外培养的大鼠系膜细胞(MsC)增殖的影响。方法：应用血清药理学，使用氚标胸腺嘧啶([^3H]-TdR)掺入法检测大鼠肾小球MsC增殖。结果：含虫草菌丝血清可抑制MsC的增殖。结论：虫草菌丝可用于肾小球硬化的防治。