分子印迹技术在毒品检测中的应用

分子印迹技术具有优越的识别性和选择性,在毒品检测中具有重要的研究潜力。分子印迹技术应用与打击毒品犯罪相结合,已成为当今法庭科学工作者研究的热点问题。本文阐述了分子印迹技术的基本原理,并对其在固相萃取、吸附分析、化学发光、传感器、色谱分析等毒品检测技术中的应用情况进行了综合概括,并展望了分子印迹技术领域的发展趋势。     

分子印迹技术及其在司法鉴定领域的应用

分子印迹技术（MIT）是制备对特定目标分子具有分子识别功能聚合物（MIPs）的一门技术,由于MIPs具有的选择性,被广泛应用于各领域。对MIT和MIPs进行了介绍,并对其在司法鉴定领域的应用进行了综述。     

体液中微量士的宁的富集及同时检测

目的将分子印迹技术运用到法医毒物分析中,建立一种全新的测定体液中微量士的宁的方法。方法运用分子印迹原位聚合技术,在色谱柱中一步合成了对士的宁具有专属识别能力的分子印迹聚合物,以此聚合物为介质,装填一厘米的小柱,建立体液中微量士的宁的富集及同时检测方法。结果以士的宁分子印迹聚合物作为尿液和血浆中微量士的宁的富集和检测介质,方法的检出限为4.9ng,样品回收率均大于92%,相对标准偏差小于6.59%,工作曲线的线性相关系数分别为0.9991和0.9966。运用此方法对中毒家兔血浆和尿液中的士的宁进行了测定。结论建立的新方法可以实现对士的宁专属的、灵敏的检测,适合于法医学毒物分析运用。     

分子印迹固相萃取技术-液相色谱法测定鱼塘水中2甲4氯苯氧乙酸

目的建立分子印迹固相萃取技术对鱼塘水中2甲4氯苯氧乙酸进行提取和分析的方法。方法以2甲4氯分子印迹聚合物为固相萃取材料,对鱼塘水中2甲4氯进行分离提取,洗脱液直接进行液相色谱分析。结果鱼塘水中MCPA的提取率在80%以上,检出限0.040μg/mL,在0.2μg/mL～2.0μg/mL范围内线性关系良好。结论该方法的准确度和精密度较好,适合实际发生案件的检测分析。     

应用分子印迹固相萃取法提取血液中大隆和溴敌隆

目的采用分子印迹固相萃取,UPLC/MS分析,检验血液中大隆和溴敌隆。方法以大隆为模板分子,丙烯酰胺为单体,二甲基亚砜为有机溶剂,按照模板分子与单体摩尔配比关系为1∶4合成大隆分子印迹聚合物,作为固相萃取剂萃取血液中大隆和溴敌隆,以2×1mL去离子水、1mL 30%甲醇去离子水洗涤杂质,2×1mL 1%甲酸/甲醇洗脱,提取血中目标物后进行UPLC/MS分析检测。结果溴敌隆和大隆回收率均在90%以上,在50～500ng/mL浓度范围内线性关系良好r,2溴敌隆为0.998 4,大隆为0.991,检测限（S/N=5/1）低于10ng/mL。结论本方法回收率高,基质效应降低,杂质干扰少,可用于血液中低浓度大隆和溴敌隆的检验。     

分子印迹固相萃取法在血中苯丙胺类毒品分析中的应用

目的建立分子印迹固相萃取（MISPE）、GC/MS分析方法,用于血液中苯丙胺类毒品检测。方法 10mmol/L醋酸铵缓冲液（pH8.0）4倍稀释空白添加血液,1mL甲醇,1mL10mmol/L醋酸铵缓冲液（pH8.0）活化苯丙胺类分子印迹固相萃取柱;2×1mL去离子水、1mL60%的乙腈去离子水、1mL1%醋酸乙腈洗涤杂质;2×1mL1%甲酸/甲醇洗脱,洗脱液挥干定容,经GC/NPD、GC/MS分析检测。结果各种苯丙胺类毒品回收率均在90%以上,在20～5 000ng/mL浓度范围内线性关系良好,r2为0.995 7～0.998 9,LOQ在16～30ng/mL之间,LOD在8～15ng/mL之间。结论本方法回收率高,净化效果显著,稳定性好,杂质干扰少,可用于血液中低浓度苯丙胺类毒品的分析检测。     

多聚酶链反应在法医物证鉴定中的应用

<正> 人体DNA限制性片段长度多态性的发现和应用,使遗传多态性的分析从原来的血型、血清蛋白型和酶型进入基因的分子水平。从人类有核细胞中将DNA分离出来,利用核酸限制性内切酶在DNA特定顺序的识别位点上进行酶切而得到不同长度的片段,通过电泳分离、Southern印迹转移,然后用一种特殊的放射性     

小卫星DNA探针MZ1.3:制备、法庭案例上的应用及DNA片断图型与常规父权检验结果的比较

<正> 小卫星DNA探针MZ1.3是从人类基因库中通过筛选随机选择克隆中的超可变重复序列而分离的。详细制备方法及该选择性DNA克隆序列的细节将另行发表。自外周血细胞及尸解材料组织标本抽提的人DNA用限制性内切酶HinfI酶解,再作Southern印迹法分析。在与经~(32)P-dCTP缺口翻译的探针MZ1.3杂交后,经放射性自显影,每一个体DNA样本平     

印油与印油印迹比对检验方法的影响因素研究

目的针对印油印迹形成过程中可能存在的影响因素,研究印油与印油印迹比对分析方法中可能存在的风险。方法采用溶剂提取,高速离心,过膜的简单的前处理方法,然后高效液相色谱分析,用色谱峰峰面积的相对含量来判定印油印迹与印油之间的差异。结论印泥印油、印油印迹与印油之间差异很小;而印台印油、渗透印油、翻转印油、印油与印油印迹比对时,存在一定影响。     

印油印迹中色料成分的UHPLC方法研究

目的对红色印油印迹色料成分进行分析,研究确定印油印迹的种类区分方法,为侦查破案提供依据。方法采用超高效液相色谱法分析,以保留时间为主进行定性,对35种不同品牌的印油产品中色料成分进行区分。结果将印油印迹分为普通印油（印泥、原子印油等）、水性印油及光敏印油三类,建立了统一的UHPLC分析方法,其种类区分率达85%以上。结论通过印油印迹成分研究,最终区分印油印迹种类,可满足实际案件中对不同类型印油的鉴别区分。     

印记基因5个SNP分型及亲代来源的检测

目的 采用复合PCR-Snapshot联合甲基化敏感酶切技术,检测印记基因中5个SNP的甲基化状态、印记亲代来源及分型.方法 选择15例亲子鉴定已证实为亲生关系的家系样本,采用单碱基延伸复合检测技术,检测家系样本IGF2AS rs1003483、SNURF rs220028、SNURF rs4906939、DLGAP2 rs6558478、SIM2 rs737380等5个SNP分型,同时选用核酸内切酶(McrBC)和甲基化敏感的限制酶(msRE) HhaⅠ、HpaⅡ消化子代DNA,验证印记基因的亲代来源.结果 经用本文方法检测,证实rs1003483为父源印记;rs220028、rs4906939为母源印记;rs6558478及rs737380未在差异甲基化区,不能确定其印记亲代来源.结论 复合PCR-Snapshot联合甲基化敏感酶切技术简单、高效,在检测多个SNP分型的同时可确定亲代来源,可在相关研究和实践中选用.     

DESI-HRMS-HDI在添改字迹鉴定中的应用研究

目的通过电喷雾解吸电离(DESI)—高分辨飞行时间质谱(HRMS-HDI)成像技术建立了一种新型添改字迹鉴别技术。方法对10支黑色签字笔书写的“11”被添改成“47”的90个样本用分子成像技术测试。结果该技术可将84个被添改的原始字迹“11”以二维成像方式显现。结论DESI-HRMS-HDI技术无需检材预处理,在大气压下即可进行操作,接近无损检验,操作简便,是一种有效的文件检验技术,适用于文件材料鉴别和篡改文件鉴定。     

Comparison of molecularly imprinted solid-phase extraction (MISPE) with classical solid-phase extraction (SPE) for the detection of benzodiazepines in post-mortem hair samples

This preliminary study compares the benzodiazepine results for 10 post-mortem scalp hair samples using a classical solid-phase extraction (SPE) and a molecularly imprinted solid-phase extraction (MISPE) system. The hair samples selected for testing were from drug-related deaths where a positive benzodiazepine blood result was obtained. Samples were decontaminated with 0.1% sodium dodecyl sulfate, distilled water and dichloromethane, incubated overnight in methanol/25% aqueous ammonium hydroxide (20:1), extracted by SPE or MISPE and subsequently analysed by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS-MS). Both extraction methods detected diazepam, nordiazepam, oxazepam, temazepam and nitrazepam in the samples. Diazepam was detected in a greater number of samples using MISPE due to both its lower limit of detection (LOD) and higher extraction recovery as a result of excellent molecular recognition of the template (diazepam) imparted by the imprinting process. The selective recognition of two diazepam analogues, nordiazepam and oxazepam, was demonstrated using MISPE since they were also detected in a greater number of samples. In contrast, another diazepam analogue, temazepam, was detected in a greater number of samples using SPE since the LOD using this extraction was lower than with MISPE. Nitrazepam was detected in one sample using both extraction methods. Overall the MISPE and SPE hair results were in good qualitative agreement. For the samples, where both extraction methods detected nordiazepam, temazepam and oxazepam, the concentrations were always higher for SPE. This is probably due to the MIP procedure producing extracts with fewer matrix interferences than the extracts produced using the classical SPE method. MISPE could be used as a complementary method to classical SPE for the analysis of benzodiazepine positive hair samples collected from chronic users.     

DNA分子标记技术在法医植物学中的应用

法医植物学是一门研究与法律事件相关的植物证据的科学。植物物证的DNA分子标记技术是近年来法医植物学研究的主要方向。本文系统地综述了目前应用于法医植物学中的各种DNA分子标记技术，对这些方法的实际应用案例以及可能应用方向进行列举，最后总结出这些分子生物学技术相较于传统植物形态分类方法的优点。     

足迹检验程序和方法的探讨

通过对足迹形成时的习惯动作特征的研究,提出了同一人穿不同种类鞋同一认定的检验程序和方法.     

考古样品中Amelogenin同源基因的提取和检测

目的利用人类性染色体Amelogenin同源基因在X、Y染色体上序列长度的差异,选择设计引物,对考古样本进行古DNA性别信息研究。方法采用苯酚/氯仿-二氧化硅-超滤离心方法提取东岭墓葬群殉人骨骼、牙齿古DNA,PCR扩增,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离和检测古DNA扩增片段。结果8个墓葬16个样品中有7个样品出现阳性扩增检测,目标基因片段清楚,男性为二条带(X、Y),女性为一条带(X),牙齿样品检测成功率优于骨骼样品。结论改进的苯酚/氯仿—二氧化硅—超滤分离法是较好的古DNA提取方法,具有降低PCR抑制剂、消耗成本低和提取成功率高等特点。基于人类X、Y染色体Amelogenin同源基因的古DNA性别分析方法可成为分子考古重要的技术方法。     

AFLP分子标记技术的新进展及其在法医植物学中的应用

扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)是一种用来检测基因组多态性的新一代分子标记,具有分辨率高、稳定性好、重复性好等特点.近年来,研究人员对该技术进行了不断的优化和完善,并由之衍生出多种相关技术.AFLP技术在动物、植物及微生物等许多研究领域已有广泛应用,在法医植物学中得到初步发展并成为研究热点.本文主要介绍了AFLP技术的新进展以及在法医植物学中的应用情况.