鸡新城疫－减蛋综合征蜂胶佐剂灭活二联苗的研究

首次用蜂胶作为佐剂，研制出鸡新城疫－减蛋综合征（ＮＤ－ＥＤＳ）二联灭活苗。在开产前１个月左右，用该苗按０．５ｍｌ／只的剂量皮下或肌肉注射免疫蛋鸡，接种后２０ｄ测ＮＤ抗体（ＨＩ法）效价为６．２５～７．０（ｌｏｇ２，下同），ＥＤＳ－７６抗体（ＨＩ法）效价为６．５～８．０。用ＮＤ－ＥＤＳ油乳剂灭活二联苗做对照，进行免疫持续期平行测定对比试验，免疫后１８０ｄ，蜂胶苗免疫组鸡的ＮＤ抗体滴度为８．５～８．７，ＥＤＳ－７６抗体滴度为８．３～８．５，与油苗免疫对照组鸡的ＮＤ抗体（８．６）和ＥＤＳ－７６抗体（８．１）效价相比，无明显差异（Ｐ＞０．０５，Ｐ＞０．０５）。用禽胚做中和试验揭示，该苗免疫半年后，其保护率仍可达９０％以上。田间试验表明该苗安全性理想；免疫４．５月ＮＤ抗体效价达９．０，ＥＤＳ－７６抗体效价为８．０     

鸡减蛋综合征蜂胶佐剂灭活苗免疫期的试验研究

用三批减蛋综合征（ＥＤＳ）蜂胶佐剂灭活苗（９４０９１２、９４１０２４、９４１１２１）分别免疫成年产蛋母鸡，定期采血，连续检测ＨＩ抗体动态变化，这三批苗６个月的平均ＨＩ抗体滴度分别为７．７、８和７．７（Ｌｏｇ＿２）；用鸭胚做ＥＤＳＶ血清中和试验，其保护率均为１００％（５／５，５／５，５／５）；用ＥＤＳ２０６油苗和ＥＤＳ白油苗同时分别免疫蛋鸡，做平行对比ＨＩ抗体检测，其６个月的平均ＨＩ抗体效价分别为７．７和７（Ｌｏｇ＿２）。说明ＥＤＳ蜂胶苗的免疫期不短于ＥＤＳ油苗的。     

中药免疫增强剂提高鸡免疫功能的研究

以鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）为模型研究自拟中药免疫增强剂（简称补益方１、补益方２）对ＩＢＤ弱毒苗和油乳剂灭活苗、ＮＤ油乳剂灭活苗的免疫增强效果；用间接ＥＬＩＳＡ法测定鸡血清ＩＢＤＶ抗体效价，以微量血细胞凝集抑制试验测定血清ＮＤ血细胞凝集抑制（ＨＩ）抗体效价。结果表明，补益方１与ＩＢＤ弱毒苗和油乳剂灭活苗配合使用，血清ＩＢＤＶ抗体Ｐ／Ｎ值在测定期内（４～３９ｄ）都高于免疫对照组；补益方１和补益方２对ＮＤ油乳剂灭活苗均有一定的免疫增强效果，其中补益方２的免疫增强效果（平均为１．０２０）明显优于补益方１（平均为０．４１０），从而认为补益方２与ＩＢＤ疫苗、ＮＤ疫苗配合使用具有免疫增强作用，可以提高机体体液免疫水平。     

四川省家禽及鸟类减蛋综合征血清流行病学调查

采集四川省农村散养的鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽和野外麻雀的血液，分离血清，应用微量血凝抑制（ＨＩ）试验检测减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒感染情况。阳性率为：鸡３．０１％（１３／４３２），鸭４４．８６％（４３６／９７２），鹅２８．８１％（１１９／４１３），鹌鹑３．５７％（２７／７５６），鸽１８．７５％（１８／９６），麻雀３０．５６％（１１／３６）；另外在１９８５年疫病普查时采集并保存的鸭、鹅血清中也查到了ＤＥＳ－７６抗体，阳性率分别为鸭４３．３０％（４２／９７），鹅２６．４０％（２９／１１０）。     

鸡减蛋综合征－新城疫－传染性支气管炎三联油乳剂灭活苗的研制与应用

鸡减蛋综合征－新城疫－传染性支气管炎三联油乳剂灭活苗的研制与应用朱国强周继宏庄国宏严维巍田惠芳江国托王永坤（扬州大学农学院２２５００９）鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）、新城疫（ＮＤ）和传染性支气管炎（ＩＢ，包括肾型和呼吸道型）是危害种鸡和商品蛋鸡的３种...     

应用酶联免疫吸附试验检测鸡毒霉形体卵黄抗体

应用酶联免疫吸附试验检测鸡毒霉形体卵黄抗体郭建华陈明勇陈德威（中国农业大学实验动物所北京１０００９４）血清平板凝集试验（ＳＰＡ）、血凝抑制试验（ＨＩ）及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）已用于鸡毒霉形体（ＭＧ）血清抗体的检测，但这些方法都需要采集血清，使...     

贵州省家禽减蛋综合征的调查

自贵州省的家禽中采集血清或卵黄样本７０５份，用微量血凝抑制试验检测减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）的抗体水平。结果表明，在６个健康鸡群中，阳性率为４．３％；在４个偏僻村寨农户散养的土种鸡群中，阳性率仅为０．９％；而在３个出现产蛋下降等症状的患病鸡群中，阳性率高达９１．８％，大多数阳性血清的效价为１∶３２～１∶５１２，最高达到１∶４０９６。同时，在健康鸭群中ＥＤＳ－７６的自然感染率较高，而这种隐性感染对鸭群的产蛋率并未发生任何影响。     

鸡胚接种新城疫疫苗的免疫效果

鸡胚接种新城疫疫苗的免疫效果１）许美解黎满香艾国良陈可毅唐连飞（湖南农业大学动物科技学院长沙４１０１２８鸡新城疫（ＮＤ）的预防免疫接种，目前以测定ＨＩ抗体效价为依据来确定首免日龄和制定免疫程序。许多鸡场，按此程序使用ＮＤ疫苗后爆发ＮＤ仍时有发生。免疫...     

斑点免疫金染色检测雏鹅新型病毒性肠炎抗体研究

应用提纯的雏鹅病毒性肠炎病毒（ＮＧＶＥＶ）抗原制备抗原诊断膜，建立了ＩｇＧ的金颗粒标记、抗原抗体反应同步试验的斑点免疫金染色（ＤｏｔＩＧＳ）检测雏鹅新型病毒性肠炎（ＮＧＶＥ，暂定）抗体的方法，只需３０～４０ｍｉｎ即可判断结果；与本动物抗ＧＰＶ，ＤＰＶ，ＮＤＶ，ＩＢＶ，ＩＬＴＶ，ＭＤＶ，ＩＢＤＶ，ＥＤＳＶ及多杀性巴氏杆菌血清不发生交叉反应；对兔抗ＮＧＶＥＶ的ＩｇＧ的最低检出量为１．０×１０－１０ｇ／ｍＬ。雏鹅感染ＮＧＶＥＶ强毒后第３ｄ、成年鹅接种ＮＧＶＥＶＣＮ４０弱毒疫苗后第３ｄ即可检测到相应抗体。对重庆市和四川省１０个县（市）的６１７份成年鹅血清进行检测，结果ＮＧＶＥ的血清阳性率为３０．４４％～３６．８４％。该法适用于雏鹅感染的早期诊断、成年鹅的血清流行病学调查和疫苗免疫效果评价等。     

间接ELISA对免疫鸡群中传染性喉气管炎抗体的检测

传染性喉气管炎（ＩＬＴ）的免疫是以细胞免疫为主。虽然鸡抵抗传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）强毒株攻击的能力与中和抗体效价无联系,但是检测鸡群中ＩＬＴ抗体的平均效价可以预测ＩＬＴ的免疫状态（Ｙｏｒｋ,１９８３）。ＩＬＴ抗体的检测以血清中和试验（ＳＮ）和琼...     

鸡传染性法氏囊病ELISA快速诊断盒的研制及应用

用ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ快速诊断盒对ＩＢＤＶ阳性法氏囊囊毒及ＩＢＤ阳性血清，ＩＢＤＶ阴性法氏囊及ＩＢＤ阴性血清和ＩＢ，ＩＬＴ，ＥＳＤ－７６，ＲＥＯ，ＮＤ，ＭＤ等６种鸡传染病的抗原及阳性血清检测，只有ＩＢＤＶ阳性法氏囊囊毒及阳性血清呈阳性反应，证明快速诊断盒对ＩＢＤＶ法氏囊囊毒抗原及其抗体的检测是特异的，与其它６种传染病的抗原和抗体无交叉反应。与ＡＧＰ对比试验结果表明，检测ＩＢＤＶ阳性法氏囊囊毒时，快速诊断盒的敏感性比ＡＧＰ的敏感性高３２倍；检测ＩＢＤ阳性血清及蛋黄抗体液时，前者的敏感性比后者高２～１０倍。快速诊断盒的保存期可达２４个月以上。通过在１２个省（市、区）有关单位试用，证明ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ快速诊断盒具有快速、简便、特异、灵敏等优点     

多头绦虫抗原特性的研究——绵羊免疫后及感染后的抗体消长规律

用多头绦虫原头节、囊壁、囊液层析纯化抗原及原头节排泄分泌（ＥＳ）抗原对绵羊免疫及攻击感染多头绦虫虫卵后的血清进行ＥＬＩＳＡ检测，观察了血清抗体的消长规律。结果表明，绵羊在感染虫卵后第１周即可检测出血清抗体，感染后３～５周抗体效价达到峰值，一直持续到试验结束；免疫组绵羊在免疫３次后，血清抗体效价迅速升高，第３次免疫后１～２周达到峰值，且抗体水平明显高于虫卵感染组，在攻击虫卵后抗体效价开始下降，但直到试验结束时抗体效价仍维持在较高水平。原头节可溶性抗原免疫组和原头节ＥＳ抗原免疫组血清抗体总体水平要高于囊壁和囊液抗原免疫组，原头节ＥＳ抗原和原头节层析纯化抗原的敏感性、特异性要高于囊壁和囊液层析抗原。试验表明，以上４种抗原可用于ＥＬＩＳＡ检测绵羊免疫及感染后的抗体应答反应。     

检测减蛋综合征抗体间接ELISA法的建立及应用

用蔗糖不连续梯度纯化的减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒包被ＥＬＩＳＡ板，建立了检测ＥＤＳ－７６抗体的间接ＥＬＩＳＡ法。经测定，抗原最适包被浓度为１μｇ／ｍＬ，待检血清最佳稀释度为１２００，以ＯＤ４９０＞０．３，Ｐ／Ｎ＞２．１判为阳性结果。对４个鸡场的１２０份鸡血清进行检测，阳性率分别为０，４３．３３％，８０．００％和９３．３３％。     

提纯的马立克氏病肿瘤相关表面抗原在鸡体内的免疫应答

应用木瓜蛋白酶消化法，从马立克氏病病毒（ＭＤＶ）人工感染鸡的淋巴细胞瘤表面提取马立克氏病相关肿瘤表面抗原（ＭＡＴＳＡ）。所获得的抗原与从肿瘤细胞表面洗脱的抗ＭＡＴＳＡ抗体在ＥＬＩＳＡ中呈阳性反应。将这种抗原与白油佐剂乳化，给２０日龄鸡肌注免疫３次。应用间接ＥＬＩＳＡ对被免疫鸡的ＭＡＴＳＡ抗体进行了监测。结果表明：免疫前正常鸡的血清中无ＭＡＴＳＡ抗体存在，而用这种抗原免疫后１０天即可形成抗体应答，ＥＬＩＳＡ的ＯＤ值（Ｘ）为０．２３，至第３次免疫后１０天，ＯＤ值（Ｘ）为０．４４。这表明从鸡ＭＤ肿瘤细胞提取的ＭＡＴＳＡ，再好鸡免疫接种后可出现明显的抗体应答。木研究结果为ＭＤ肿瘤疫苗的研制提供了重要的参考依据。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

建立了辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记兔抗鸡ＩｇＧ检测鸡传染性支气管炎（ＩＢ）抗体的间接ＥＬＩＳＡ法，其抗原包被浓度为４ｍｇ／Ｌ，待检血清与酶结合物的最佳稀释度各为１８０，酶结合物、抗原抗体的作用时间分别为６０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，封闭液的浓度和作用时间分别为１％和６０ｍｉｎ，ＯＤ值大于０．２８７的判为阳性。用此法检测经ＩＢＶ灭活苗免疫鸡所产蛋孵出的雏鸡的母源抗体，ＯＤ值的Ｐ／Ｎ值为６．０，１５ｄ后降至２．０以下。检测１１日龄经ＩＢＶＨ１２０弱毒苗免疫雏鸡的抗体，其Ｐ／Ｎ值于免疫后第１８ｄ达峰值（３．７）。调查的５４群发病鸡，其抗体阳性率为１００％，Ｐ／Ｎ值为４．０～７．５     

抗鸡传染性法氏囊病高免牛奶的制备与应用

抗鸡传染性法氏囊病高免牛奶的制备与应用目前防治鸡传染性法氏囊法病（ＩＢＤ）主要用高免卵黄抗体和高免血清。我们研制的高免卵黄抗体及鸡、猪、羊、牛等动物的高免血清对ＩＢＤ的防治效果都很好，但产量低、成本高。根据同一原理，我们在珠江奶牛场，经免疫黑白花奶牛...     

鸡传染性法氏囊病中和抗体动态水平监测及其应用的研究

用鸡胚成纤维细胞的微量血清中和（ＳＮ）试验跟踪抽检了同群两种不同免疫程序的１２组次共１４２只鸡的传染性囊病（ＩＢＤ）中和抗体滴度。结果表明，该群１日龄雏鸡的母源抗体水平高达８．３ｌｏｇ＿２并且较整齐，雏鸡母源抗体半衰期约为４．３～５．０天，用ＳＮ免疫监测不同的免疫程序及其实际效果，说明在中和抗体滴度降１６．０～６．５ｌｏｇ＿２（１５～１８日龄）时首免效果最好。该方法准确且敏感性高，可用于鸡群免疫监测，指导合理的免疫程序。     

抗运动神经元抗体对离体培养的大鼠脊髓神经元NGF低亲和力受体mRNA表达的影响

为探明特异性抗体对神经元的损伤机制，分离提取猪脊髓前角运动神经元并作为抗原免疫动物，分离纯化ＩｇＧ，观察这种ＩｇＧ（ａｎｔｉ－ＳＭＮ）对无血清培养大鼠脊髓神经元的影响。结果表明，培养的脊髓细胞中确有部分神经元表达ＬＮＧＦＲｍＲＮＡ，这些阳性细胞呈多角形、三角形或椭圆形，胞浆呈蓝黑色，胞核未着色，即为运动神经元；培养神经元暴露于ａｎｔｉ－ＳＭＮ４８ｈ后，ａｎｔｉ－ＳＭＮ组ＬＮＧＦＲ阳性细胞明显减少，狭缝杂交定量检测ａｎｔｉ－ＳＭＮ组ＬＮＧＦＲｍＲＮＡ表达量较对照组降低６０％；培养细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放量在抗体组明显增加并且呈量效关系；ａｎｔｉ－ＳＭＮ组钙结合蛋白免疫阳性神经元在培养细胞暴露于抗体４８ｈ时明显增加，胆碱酯酶（（ＡＣｈＥ）阳性细胞则显著减少。提示ＬＮＧＦＲ参与抗体介导的神经元损伤，可作为观察脊髓运动神经元的一个特异指标，ａｎｔｉ－ＳＭＮ对培养脊髓神经元有明显的细胞毒性作用     

快速检测鸡新城疫病毒的聚乙二醇单抗夹心ELISA试验的建立和应用

以抗鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验为基础，在酶标抗体（ＨＲＰ－Ｆ＿（２３））稀释液中加入４％（ｗ／ｖ）聚乙二醇（ＰＥＧ）６０００，建立了ＰＥＧ－ＥＬ１５Ａ法，使用此法检测临诊样品，与单抗夹心ＥＬＩＳＡ相比，时间缩短７０分钟且提高了ＯＤ＿（４９０）值，易于识别。结果表明，ＰＥＧ－ＥＬＩＳＡ法具有实际应用价值。ＰＢＧ能加强抗原－抗体反应的速率和强度，这种效应在固相夹心ＥＬＩＳＡ第二步表现尤其明显。ＰＥＧ的这种非特异性效应对于检测其它抗原或抗体的ＥＬＩＳＡ试验可能具有普遍意义。     

分泌抗鸡病毒性关节炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用鸡病毒性关节炎病毒（ＲｅｏＶ）免疫８ＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ＿２／Ｏ细胞在聚乙二醇作用下融合，用ＥＬＩＳＡ法检测和筛选，以有限稀译法克隆３次，获得４株分泌抗ＲｅｏＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞，在传代期间能稳定地分泌ＭｃＡｂ。用杂交瘤细胞注射ＥＡＬＢ／Ｃ小鼠诱生腹水，其ＥＬＩＳＡ抗体效阶达４０００～８０００，在－７０℃条件下保存半年，其抗体效价不变。特异性分析结果表明，该ＭｃＡｂ只特异地与ＲｅｏＶ发生反应，而不与ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＢＤＶ发生反应。