短串联重复DNA的多态性及其法医学应用

现代分子生物学两项重要进展不仅使应用于遗传作图和连锁分析工作的高信息标记得到迅速发展，而且也给法医学个人识别和亲子鉴定的方法带来一次飞跃。第一项是1980年Wvtnan［11首次报道了串联重复．DNA具有高度多态性，、使可变数目串联重复DNA（VariableNumbersofTandemRep。at。，VNTR）成为新的多态性标记；第二项是1983年Mitis发明了简便实效的多聚因链式反应（PCR），使体外特异性合成DNH片段成为可能。在此基础上发展起来的DNA指纹图、VNTR一RFLP分析及PCR—VNTR检测法，已经从对基因表达产物的检测上升到对DNA分子…     

中国人pMCT118位点扩增产物HinfⅠ限制性片段长度多态性

pMCT118（又称DIS80）是一个高度多态性的VNTR位点（重复单位16bp，核心序列为GNNGTGGG），位于1号染色体上。用PCR方法分析其多态性，国内外已有报道ti，2］K。s。i等人（‘］通过对pMCTlls位点碱基序列进行分析，发现该位点扩增物正链5’端第61个碱基由C转换成T，引入了Hinfl的酶切位点，使其产生了两种多态性Hinfl十和Hinfl－。本文对中国人pMCTlls位点扩增产物Hinfl限制性片段长度多态性进行了研究，现报告如下。材料与方法1．样品48例中国人无关个体血样由本实验室日常积累，DNA提取用Chelex快速提取法［’］。2．pMC…     

18例案件物证Amp—FLP检测分析

80年代中期建立的聚合酶链反应(PCR)技术,以基因组DNA为模板在DNA聚合酶催化作用下,由一对寡核苷酸引物引导,在体外扩增靶DNA片段。经过约30个循环反应,靶DNA片段可扩增100万个拷贝。PCR技术使法医物证检验的灵敏度大为提高,达到纳克级DNA的超微量水平。近10年来,PCR技术在法医界迅速得以推广与使用,被称为第二代DNA分型技术。人类基因组内可变数目串联重复序列(VNTR)位点具有极高多态性,VNTR位点和片段长度等位基因多达数十,甚至数百。运用PCR技术扩增VNTR位点并经片段长度多态     

单核苷酸多态性与DNA芯片技术在法医学中的应用

８０年代中期,Jeffreys建立的DNA指纹技术是法医学DNA分型的里程碑。针对人类基因组小卫星VNTR位点靶序列作RFLP分析,获得高度个体特异性DNA指纹图,使法医学第一次能够作出认定同一性,认定亲生关系的鉴定结论。此为第一代法医DNA分型技术。８０年代后期,Mullis建立PCR技术,以基因组内STR位点多态性位点为靶序列作PCR扩增,利用电泳分离,分析STR位点多态性。PCR－STR分型结合了PCR高效扩增和STR位点高度多态性的特点,成功地解决了检测灵敏度问题,采用复合扩增多STR位点的办法,鉴别能力达到或接近DNA指纹水平…     

法庭DNA技术与标准化

1 法庭DNA技术的发展与现状法庭DNA技术自1985年被首次应用以来,经过十多年的努力,已经由最初的限制性片段长度多态性检测(RFLP)发展到如今的扩增片段长度多态性检测(PCR-VNTR,PCR-STR)以及DNA序列变异测定等.人们充分利用DNA分子的序列多态性和长度多态性来进行个体识别,由此产生了DNA指纹技术,VN-TR-PCR扩增技术,STR-PCR技术,MVR-PCR技术,PCR测序技术等一系列新兴的法庭科学技术,促进了整个遗传科学和法庭科学的发展.     

线粒体DNA的PCR-RFLP分型法医学应用研究

目的建立PCR RFLP技术检测mtDNA序列多态性的方法,调查武汉汉族人群mtDNAHVⅠ区段限制性片段长度多态性,并对PCR RFLP技术在毛干、指甲等生物检材的个体识别案件中的应用进行评估。方法应用nest PCR技术和RFLP技术建立检测mtDNAHVⅠ区段限制性片段长度多态性的方法,调查150例武汉汉族人群无关个体,同时对实际案件中的毛干、陈旧骨骼、水浸血痕等不同种类、不同保存时间和条件的生物检材进行检测。结果RsaⅠ酶切检出4种表型,频率分别为0.760、0.167、0.066和0.007,遗传差异度(GD值)为0.393,随机匹配概率(P值)为0.607。应用PCR RFLP对毛干、20年陈旧骨骼、水浸血痕进行了检测以及在个体识别及母子关系亲子鉴定案例中应用。结论用PCR RFLP法检测mtDNA序列多态性在法医物证检验中具有应用价值。     

分析扩增DNA序列测定人发的性别

最常用的DNA分析方法是测DNA的限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism, RFLP).此法需要微克量的未降解大分子DNA,一般难以从案例检材中获得.聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)能使DNA的特异区域扩增,供序列分析,鉴定生物性检材的性别.酶促扩增法可使     

STR联合扩增鉴定碎尸案1例

聚合酶链反应（PCR）技术于1985年由美国Cetus公司的RandallSaiki、HenryErlich和KaryMullis等联合创建[1]。人类基因组DNA有3×109bp，其中10％是串联重复序列，被称为卫星DNA。卫星DNA按重复单位的长短分为大卫星、中卫星、小卫星和微卫星。其中微卫星重复单位仅由2～7hp组成，故又称为短串联重复序列（STR）。Saihi等人发现人类STR可用PCR方法扩增[2]，并且有高度多态性[3]。作者成功地利用PCR扩增PLA2A、VWA、CYP19、TH01、LPL、D6S366、D19S253、FESFPS八个STR位点对一例碎尸案中尸块做同一认定及尸源鉴定，现…     

西安汉人D1S80位点基因频率调查

利用PCR技术、小型聚丙烯酰胶凝胶电泳及银染法，检测D1S80位点的VNTR扩增片段长度多态性（Amp－FLP）。在175名无关的西安地区汉族人群中发现了22个等位基因，片段大小分布于320～750bp之间，频率分布为0．0057～03314，杂合度为82．3％，个人识别率（DP）为0.9588，非父排除率（EPP）为0．6704。对7个家系23名相关个体分析，证实DIS80位点的遗传符合孟德尔方式。已发现的64种基因型分布符合Hardg－Weinberg定律。     

STR系统HUMCSF1PO-HUMTPOX-HUMTH01三位点复合扩增在上海地区的频率分布

STR（ShortTandemRepeat）短串联重复序列多态性又称微卫星（Microsatellite）DNA多态性，通常由某个位点3～7个碱基对的重复数目差异构成，用PCR方法扩增STR位点的技术为个体识别提供了又一有效方法。由于STR片段相对较短（＜500bp），更适用于法医实践中已降解的DNA样品的需要；由于多个STR位点可以复合扩增，又较符合法医检案中DNA样品通常是很微量的实际，因此该技术已广泛地受到法医界的关注。国外已有对HUMTH01、HUMvWA、HUMF13A1、HUMFES等位点的研究报道，国内也已开始了一些工作。我们参照美国Promega公司的方…     

法庭DNA技术的发展及展望

1 法庭DNA技术的现状 DNA技术自1985年应用于法庭鉴定以来,发展极为迅速,得到了广泛应用。已经由最初的以长度(RFLP)为基础的DNA指纹分型技术(DNA Fingerprinting)发展到如今的扩增片段长度多态性检测(PCR-VNTR,PCR-STR)及DNA序列变异测定等。其中应用比较普遍的几项法庭DNA鉴定技术分别为DNA指纹图技术、PCR扩增技术、DNA测序技术。     

用PCR-SSCP法进行亲子鉴定及个体识别

HLA－DR位点是一个具有高度遗传多态性的基因位点。到目前为止已发现其具有68个等位基因，此外还有7个假性基因。从国内外DRll基因频率调查来看，各基因频率的分布比较均衡。因此通过检测HLA－DRB基因位点进行亲子鉴定能获得较高的父权排除率，进行个体识别时能达到较高的个体识别率。以往用RFI，P（限制性片段长度多态性）或SSO（序列特异性寡核着酸）方法进行HI，A－DRB基因的定型所需时间较多，而且不能同时对其假性基因进行分析。根据单链构象多态性（polymerasechainreaction－singlestrandconformatlonPoly－mornhism，PC…     

PCR技术在法医学鉴定中的应用

近年来国内法医研究人员已先后将DNA遗传指纹图技术、单位点VNTR以及PCR－VNTR、PCR－ASO、PCR－STR、MVR－PCR。PCR．SSCP’等技术应用于法医学鉴定，使法庭科学对犯罪生物物证的个人识别能力的研究有了突破性进展，取得了令人瞩目的成就。笔者根据现有实验室条件和实际办案工作的需要，对DIS80、ApOB、HUMACTBPZ、HUMTH01等位点进行分析研究，除进行必要的基因频率调查、家系遗传性分析外，通过对天津地区60余起案件的检验，重点研究实际检案中的问题。材料和方法一、实验主要仪器、试剂卫．DNA热循环仪：（PCT…     

太原地区汉族Hum TH01位点基因频率分布调查

短串联重复序列（STR），是由几个碱基对作为核心单位，串联重复形成的一类DNA序列。由于其核心重复单位数目的变化构成了STR基因座的遗传多态性。在人类基因组中，平均每15kb就存有1个STR基因座，为法医个人识别和亲子鉴定提供了高信息基因座的丰富来源。1991年，Edwards［1］等人报告了从基因库中发现的10个“核心序列”为3～4hp的STR位点；1993年，国内刘健［2］等采用PCR技术成功地对HumTH01、HumFABP、HulnARA三个STR位点进行了复合扩增。笔者参考了以上文献报道的方法，根据本实验室的条件，用PCR技术电泳分离和银染色…     

InDel遗传标记在法医学领域的研究进展

法医DNA分型的遗传标记经历了可变数目串联重复(variable number of tandem repeat,VNTR)序列和短串联重复(short tandem repeat,STR)序列。随着测序技术的产生,出现了第三代遗传标记,因其基因座通常只有两个等位基因,故又被称为二等位基因遗传标记,主要包括单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)和插入/缺失(insertion/deletion,In Del)。由DNA片段插入或缺失形成的DNA长度多态性In Del遗传标记分布于整个基因组中,数目众多,兼具STR和SNP遗传标记的优势,现已应用于遗传学、人类学等领域。本文主要对In Del遗传标记在法医学领域的研究进展进行综述,旨在回顾和总结近年来的主要研究成果并为后续研究提供参考。     

p33.4位点扩增片段长度多态性及其法医学应用的研究

以聚合酶链反应（PCR）、聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳和银染法对中国100名无关个体小卫星区域p33．4位点的扩增片段长度多态性（Amp－FLPs）进行了研究，检出了8个等位基因。通过BIOTRAC系统进行数据处理．各等位基因重复单位的数目分别为7、10到15，其中在13～14之间发现一差值不足一个重复单位长度的罕见等位基因。片段长度分布于603～1115bP之间，基因频率分布于0.5～33．5％间，杂合度为64％，DP值为84．5％。对5个家庭25名相关个体进行分析，符合孟德尔遗传定律；对同一个体不同组织的DNA进行P33.4位点的分型研究表明，该技术适宜于法医物证检验。此外，本研究以Chelex处理不同检材制备DNA模板用于扩增，率先建立了比常规方法更快、更简便、更为实用的检验方法。     

中国汉人线粒体DNA(CA)n重复子的多态性

线粒体DNA的控制区具有高度多态性,对个体识别有十分重要作用。mtDNA多态性分析广泛用于法医学、人类学和分子进化学。主要是对高变区HVRI和11直接全部测序来分析D－Loop区差异性。众所周知DNA直接测序费时,成本昂贵,周期长,因此不能广泛用于法庭科学日常检案中。另外也缺乏有效的群体遗传数据门］目前已知mtDNA的控制区如同染色体DNA一样,也存在着重复单位的多态性。（CA）n重复子是其中的一个多态性位《（‘,’］。它定位于D－Loop3’区域。参照Adesons拥有5个（CA）重复序列。定位于＂t00514＂t00524。本文在此报道中…     

D8S1179位点扩增不平衡

短串联重复（shorttandemrepeat，STR）是目前法医学上个体识别中应用最广泛的遗传标记。STR的分型多数采用扩增片段长度多态性（amplifiedfragmentlengthpolymorphism，Amp－FLP）分型技术。由于各种原因，不同的STR等位基因的PCR扩增效率并不总是相等，使杂合子个体的两个等位基因间可能出现扩增不平衡的现象。本文报道４例D８S１１７９位点扩增不平衡的现象。１材料与方法１．１标本来源４个血样本的DNA用酚／氯法提取。１．２D８S１１７９位点的分型１．２．１聚丙烯酰胺凝胶银染法检测引物按照STRBase（http：／／www．cstl…     

两例STR三带型的分析

人类短串联重复序列（short tandem repeat,STR）以核心序列重复单位数的变化构成遗传多态性,以串联重复数目的不同表现出高度多态性。正常人常染色体单个STR基因座的PCR分型图谱,纯合     

亲子鉴定DNA分型亲权指数的简化计算法

PCR扩增DNA片段长度多态性位点，如AmP－FLP、PCR－STR分型技术，在亲子鉴定中应用日益增加。由于被选择应用的DNA位点均具高杂合度、高非父排除率，以及PCR技术取材广泛、灵敏度高等特点，PCR－DNA分型有。逐步取代常规血型检测的趋势。PCR－DNA分型结果表明，杂合子个体呈2条片段，纯合于及条片段，等位基因为共显性遗传，位点均具有不连续基因频率分布。所以，亲权指数计算并不复杂。本文依据单位点DNA分型特发，根据Esse。M6ller计算理论，提出一套简明亲权指数计算公式。同时对父子单亲亲子鉴定的亲权指数计算公式也作…