基于重组质粒制备STR分型阳性参照物

目的基于重组质粒制备可用于校准法医STR分型的阳性参照物。方法以常用阳性参照物9948人类基因组DNA STR分型为依据,基于重组质粒构建包含CSF1PO、D7S820、TH01等40个常染色体位点,DYS391、DYS522、DYS385a/b等22个Y染色体位点以及性别判定基因座Amelogenin的STR分型阳性参照物。将重组质粒定量、稀释后等比例混合,分别应用于DNATyper~?19、DNATyper~?24、DNATyper~?Y、Amp F?STR~?Identifiler~?Plus以及Power Plex~?18D System五种扩增试剂盒。结果阳性参照物中各重组质粒浓度为0.01pg/μL~0.001pg/μL;应用于Amp F?STR~?Identifiler~?Plus PCR扩增试剂盒,基于重组质粒制备的阳性参照物与人类基因组DNA扩增检测结果差异较小;将此阳性参照物分别应用于不同公司、不同STR基因座的四种STR扩增试剂盒,电泳检测图谱显示各基因座基因型完整,分型正确,峰高相当,基因座间均衡性良好。结论基于重组质粒制备STR分型阳性参照物,是一种可以替代细胞系制备阳性参照物的方法,具有一定的参考价值。基于此方法制备的阳性参照物可适用于市面上常用的STR检验试剂盒,普适性较强,对法医DNA分型检测有一定的实用价值。     

TKM法提取血液DNA调查山西地区人群的HUMTPOX基因座多态性

采用TKM法提取DNA模板,进行PCR扩增,对山西地区汉族人群的HUMTPOX基因座[1]进行了群体遗传学调查,获得山西地区HUMTPOX基因座的群体遗传学数据。所用方法,结果显示较佳,现报告如下。1材料与方法1．1材料TKM1溶液：10mmol／L,Tris－HCI（pH7．4）;10mmoVLKCI;10mmol／LMgC12;Zmmol／LEDTAoTKMZ溶液：TKMI溶液中加0．4mol／LN。CI．10％SDS及NP－40。互．2DNAM取0．sml抗凝血加入0．smlTKMI溶液和12．splNP－40,混匀,室温下离心10min（30O0r／min）,奔上清,细胞沉淀中再加TKMI溶液,混匀后再离…     

太原地区汉族人群3个STR基因座的多态性分析

短串联重复序列 (ＳＴＲ)属微卫星ＤＮＡ ,在人类基因组中广泛分布。具有ＶＮＴＲ序列特征的ＳＴＲ基因座已成为一类重要的遗传标记。ＳＴＲ基因座多态片段长度小 ,ＰＣＲ扩增成功率高 ,尤其对ＳＴＲ基因座进行复合扩增使单次扩增获得多基因座的信息量 ,简单 ,快速得到分型结果 ,在法医鉴定中具有重要的意义[1] 。应用复合扩增方法调查了太原地区汉族人群 3个ＳＴＲ即Ｄ16Ｓ539、Ｄ7Ｓ82 0和Ｐ13Ｓ317基因座的基因频率分布 ,获得了 3个ＳＴＲ多态性基因座的遗传学数据。1　材料方法1 1　实验材料1 1 1　样本　 10 1例ＥＤＴＡ抗凝血来自无亲…     

山西汉族群体DXS6804和DXS6800遗传多态性

X染色体STR在一些缺失亲代的姐妹亲权鉴定案件中具有一些常染色体遗传标记所没有的优点。本文报道DXS6804和DXS6800两个X-STR基因座的遗传多态性,旨在为法医学应用提供基本数据。     

山西汉族人群DYS576和DYS641基因座遗传多态性

由于Y染色体遗传标记的遗传特点,需要更多的Y-STR基因座数据,以提高Y-STR个人识别率,本文调查山西汉族人群DYS576和DYS641基因座的遗传学多态性,为相关法医学工作提供基础数据。     

山西汉族人群DYS715和DYS717基因座遗传多态性

本文对山西汉族人群DYS715和DYS717基因座进行遗传学调查，以期为相关工作提供基础数据。 1材料与方法 1．1样品来源及DNA提取 144名山西汉族无血缘关系男性个体血样来自山西医科大学校医室，基因组DNA采用常规酚／氯仿有机溶剂法提取。     

山西地区汉族人群D8S1179和FGA基因座的频率调查

<正> 为获得本地区人群D8S1179和FGA基因座等位基因频率的分布数据,对山西地区132例汉族无关个体进行了遗传学调查。1 材料与方法 132名个体枸橼酸钠抗凝血样本来自日常检案及     

D11S4463基因座等位基因分型标准物制备及应用

目的制备D11S4463基因座等位基因分型标准物,并调查该基因座在中国汉族人群中的遗传多态性。方法设计引物,用荧光引物PCR扩增和ABI 3130XL遗传分析仪电泳的方法,对中国汉族520份无关个体血斑样本D11S4463基因座遗传多态性进行调查,用分子克隆的方法构建其等位基因分型标准物。结果 D11S4463基因座在中国汉族人群中共检测出9个等位基因,杂合度、匹配概率、个体识别能力、多态性信息含量及非父排除概率分别为0.735、0.089、0.911、0.73、0.485。应用分子克隆的方法成功构建其等位基因分型标准物,按国际法庭血液遗传学学会推荐的原则命名。结论 D11S4463基因座具有较高的遗传多态性,应用分子克隆的方法构建其等位基因分型标准物,在法医科学实践中具有较高的应用价值。     

山西汉族人群3个STR基因座多态性

<正> 应用PCR技术进行STR复合扩增对山西地区汉族个体进行群体调查,获得F13A01、FESFPS和vWA 3个基因座的群体遗传学数据,现报道如下。1 材料与方法 居住山西汉族人群的109份无关个体的枸橼酸钠抗凝血,用CheleX-100法提取DNA;PCR复合扩增按Gene Print TMSTR Multiplex System试剂盒(Promega)的方法进行;扩增产物采用4％聚丙烯酰     

2个miniSTR等位基因分型标准物的制备

目的采用分子克隆技术制备miniSTR D3S4529和D12ATA63基因座等位基因分型标准物,并评价其应用价值。方法用荧光引物对835份无关个体血卡样本进行扩增并分型检测,筛选2个基因座的等位基因片段,用分子克隆方法制备等位基因分型标准物,并对中国汉族群体进行遗传学调查。结果根据筛选出的等位基因片段制备出分型标准物,各等位基因峰形尖锐,无双肩峰,峰高基本一致,荧光值在4 000 RFU左右。中国汉族人群D3S4529、D12ATA63基因座分别检出7个、11个等位基因,杂合度分别为0.752、0.723,多态信息含量均为0.71。结论通过分子克隆法制备的miniSTR D3S4529和D12ATA63等位基因分型标准物,在法医学研究中具有较高的应用价值。