DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

非同位素标记DNA探针初步研究

本文报导了将辣根过氧化物酶直接标记在单链 DNA 探针上,制备出非同位素的 DNA 探针,采用化学光增强法检测杂交结果,所得图谱清晰,容易判读。所制备出的 DNA 探针可用于人类性别鉴定和个体识别,为 DNA 检验技术推广应用开辟了新的领域。     

第三讲 法医DNA分型技术与方法

法医ＤＮＡ分型利用分子生物学技术检测、分析人类遗传标记 ,进行个体识别和亲子鉴定。 80年代以来 ,法医ＤＮＡ分型技术跨越了两大步 ,第一代分型是以ＤＮＡ分子杂交为核心的限制性片段长度多态性分析技术 ;第二代是以聚合酶链反应 (ＰＣＲ)为基础衍生出的各种ＤＮＡ标记分析技术。1　限制性片段长度多态性分析技术早年Ｊｅｆｆｒｅｙｓ建立的ＤＮＡ指纹技术本质是ＤＮＡ限制性片段长度多态性 (ＲＦＬＰ)分析 ,技术核心是ＤＮＡ分子杂交。ＤＮＡ指纹图谱的特异性取决于 2个因素 :一是限制性核酸内切酶特异性 ;二是探针特异性。ＲＦＬＰ分析…     

DNA纹印的初步研究——用pYNH24探针作个体识别和家系分析

<正> 应用pYNH24特异性DNA探针,分析了人体基因组DNA MspI酶的RFLPs,获得清晰易读的图谱。190名不相关个体中,多态性为95％;8个家系45名相关个体中,等位基因的遗传     

HinfⅠ和HaeⅢ酶解条件对DNA指纹图的影响

用辣根过氧化物酶标记α-珠蛋白-3’－HVR探针检测同一个体的DNA，其所产生的DNA指纹图谱带随着酶解条件的变化而发生改变。由于谱带的改变，给亲子关系的同一认定带来了困难，尤其是多位点探针的检测。为了了解Hinfl和Hae皿两种酶在不同酶解时间和不同酶量的条件下对DNA指纹图谱带的影响，本文作者利用多位点探针a一珠蛋白一3’－HVR和单位点探针MSS进行检测VNTR图谱的实验。材料与方法一、材料1．无关个体血液样品取自平时破案中所剩检材；2．琼服糖（美国signla公司产）；3．Hinfl和HaeI（美国premagem公司）4．非同位素标记…     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅱ)——应用‘Myo’小卫星探针进行血斑、精斑、个体组织的个体认定

应用‘Myo’小卫星 DNA 探针,Southern 印迹杂交技术,对血斑、精斑、同一个体不同组织进行 DNA 指纹图分析,均获得清晰的图谱。同一个体的血斑与血液、精斑与精液以及不同的组织其 DNA 指纹图谱完全相同。可以根据斑痕或组织与嫌疑个体的血液或某一组织 DNA 的指纹图谱比对以做出同一认定。50μl 血液量的血斑、5μl 精液量的精斑可以获得清晰易辨的指纹图谱。五年的精斑、两年的血斑亦可做出与同源个体新鲜精液、血液完全一致的 DNA 指纹图谱。对杀人、强奸杀人、碎尸等不同案件的血痕、精斑、不同组织碎块进行了 DNA 指纹图检验,均做出了正确的个体认定。本方法的应用为我国法医物证检验提供了新的分析手段,使个体认定得以实现。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅲ)——应用“Myo”DNA探针进行混合斑中精液的个体认定

本文利用蛋白酶K、SDS对精液和阴道液、精液和血液的混合斑进行前处理,除去女性阴道脱落上皮细胞和血液细胞成份获得精子。提取精子DNA,用“Myo”小卫星DNA探针杂交进行DNA指纹检验,获得了高度多态性的精子DNA指纹图谱,与同一个体血液DNA指纹图谱比较完全一致,实现了混合斑中精液来源的个体认定。在对20多起强奸案例混合斑的实际应用中,成功地认定了强奸罪犯。     

用M13噬菌体作探针进行人的DNA限制性片段长度多态性分析

用M13噬菌体作为探针,可以检测人和动物基因组DNA中高度可变的小卫星区域,其有效顺序是该噬菌体基因Ⅲ中的两组15bp的串联重复。本文介绍的是采用随机引物与PCR过程相结合的方法标记M13噬菌体,得到高比活性的探针,与经HinfⅠ消化的人DNA杂交,产生具有高度多态性的DNA图谱,并与33.15探针杂交的DNA图谱进行了比较,证明M13噬菌体是进行DNA多态性分析的一种非常有用的探针。     

微型DNA指纹图的研究与应用

作者采用小板琼脂糖凝胶电泳,应用MYO探针,Southern印迹杂交技术制作微型DNA指纹图,能获得清晰图谱。实验结果表明,同一个体的血液与血斑,精液与精斑及不同部位的组织,其指纹图谱完全相同。不同个体的微型DNA指纹图谱有明显个体差异。用本法能使大板DNA指纹图的常规检出量重复15～20次,最小检出量为250ng,达到极微量的水平。     

用α-珠旦白-3’HVR探针研究DNA指纹

用α-珠蛋白-3’HVR探针,经Southern印迹法,对100名不相关个体及4个家系的32名相关个体的DNA指纹进行了检测,所产生的DNA图谱具有高度的个体特异性,在被测的所有个体中无一相同。经统计学计算表明,任意两个个体DNA指纹图重合率为10~(-11)。家系分析毒明,DNA片段严格按照孟德尔方式遗传。该探针的应用,将在法医学亲子鉴定和个人同一认定中发挥重要的作用。     

TPOX基因座遗传多态性及三等位基因研究

正常人常染色体单个STR基因座的分型图谱为纯合子个体只有1个峰,杂合子个体有2个峰,一般情况下不会出现3个或多个峰。本研究     

PMLJ14-HaeⅢ单位点DNA图谱技术在法医学中的应用

通过对269个无关个体DNA中PMLJ14探针的识别位点的HaeⅢ酶解多态性研究,经计算机系统统计处理,得出各片段的频率分布,计算出应用此方法在个人识别中的准确率为99～99.98％,在亲权鉴定中的准确率为91.4～98.6％。保存4年后条件较好的血斑和精斑仍能得到较为清晰的图谱。已将此方法应用于某些案件的鉴定之中。     

TPOX基因座遗传多态性及三等位基因研究

正常人常染色体单个STR基因座的分型图谱为纯合子个体只有1个峰,杂合子个体有2个峰,一般情况下不会出现3个或多个峰。本研究     

STR基因座中检出三带型等位基因7例

目前，国内外亲子鉴定主要采用短串联重复序列（STR）分型方法。常用STR分型试剂盒中的STR基因座多为四核苷酸或五核苷酸STR。正常人常染色体单个STR基因座的等位基因分型表现为纯合子或杂合子，纯合子个体图谱表现为只有1条带或者1个峰，杂合子个体图谱表现为2条带或者2个峰，由于人是二倍体，正常情况下不会出现3条带或3个峰。在极个别情况下，单个STR分型图谱会出现3条带或3个峰，此种情况通常被认为是三带型。本文在2000个（共5000名个体）亲子鉴定或个体识别案例中，共计检出7例三带型等位基因，现报道如下。     

STR基因座中检出三带型等位基因3例

<正>目前,国内外进行亲子鉴定主要采用短串联重复序列(STR)分型方法。常用STR分型试剂盒中的STR基因座多为四核苷酸或五核苷酸重复序列的基因座。正常情况下,常染色体上的单个STR基因座纯合子个体的分型图谱表现为只有1条带或1个峰,杂合子个体的分型图谱表现为2条带或2个     

DNA指纹的个体特异性和细胞稳定性研究

人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的"核心"顺序构成.采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带主体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性,而且安全具有个体特异性.本文用小卫星探针33.15,调查了北京地区的60名无关个体,     

SPME-GC-MS及相似度计算法对内衣中人体气味的分析鉴别

目的探讨内衣中人体气味的分析鉴别方法。方法采用顶空固相微萃取及气-质联用法（SIM）对不同人体内衣中的主要人体气味指标性成分：醇、醛、酮、酯四类物质同时进行测定,同时采用指纹图谱相似度计算法对不同个体的内衣样本的色谱图进行统计分析。结果不同个体的内衣样本中,其人体气味成分差别较为明显,因而是能够通过这四类物质的差别来达到区分鉴别不同个体内衣样本的目的。结论本方法灵敏度高、重现性好,可作为内衣中人体气味的分析鉴别方法。     

SSCP法mtDNA分型的法医学应用

目的探讨SSCP法mtDNA分型在法医鉴定实践中的意义。方法PCR扩增mtDNAHV-I和HV-II的序列多态性片段,直接用SSCP技术分型。对70个湖北汉族真三联家系和140例随机个体进行检测,比较家系中mtDNA的单倍型SSCP图谱。统计分析SSCP法用于两个高变区在母系确定、个人识别中的意义和鉴别能力。结果在70个家系中,母亲和孩子的HV-I、HV-IISSCP带型完全相同;家系中父亲与母子的HV-I图谱不同占98.57%;HV-IISSCP图谱不同占97.13%。140例随机个体的HVI、HVII区分别检出21、16种单倍型,GD值分别为0.9556、0.9356。结论mtDNA-SSCP分型在嫌疑人筛查和母系亲缘关系推断中有实际应用价值。     

STR图谱分析中的问题及对策

STR图谱分析是STR检验的最后一步,对STR图谱正确分析解读会影响并决定数据的有效性。在STR图谱分型中常见的影响因素有以下几种：出现OL峰,其常见原因有稀有等位基因、电泳漂移、pullup峰、染料峰、荧光污染峰等;出现微量DNA致等位基因丢失,需要多次扩增或浓缩后扩增来帮助判断等位基因的个数;出现引物结合区的变异致无效等位基因,可以通过不同试剂盒的扩增来纠正[1];出现三等位基因,常见的原因有疾病或体细胞突变,疾病会致染色体和基因的复制影响到个体的所有细胞,     

SMART:自主研发的混合STR图谱分析系统

目的混合STR图谱的分析是法医遗传学领域的一个难题。目前国内大多数法医DNA实验室依靠人工方法分析混合STR图谱,费时费力,且拆分效果也多有主观性,难以满足日益增长的混合STR图谱分析的需求。本文介绍一套自主研发的混合STR图谱分析系统——SMART(STR Mixture Analysis and Resolution Tools),其能够实现对混合STR图谱的自动化分析,包括拆分混合STR图谱和计算似然比。方法SMART使用的STR峰高的概率模型,考虑了影子峰、降解、基因座特异性扩增效率、峰高变异、插入峰、峰丢失等因素。模型通过比较各个基因型集合拟合当前混合STR图谱的似然值大小来推断最有可能的基因型集合,采用了马尔可夫链蒙特卡洛(MCMC)算法进行求解。结果SMART可应用于不同试剂盒和遗传分析仪产生的数据。经使用ABI-3500XL遗传分析仪和Global Filer试剂盒测试,SMART能够实现对2~5人的混合STR图谱的分析,输出包括混合比例、混合图谱质量、各个贡献者单人的STR基因分型、似然比等多项结果。结论SMART作为一款自主研发的混合STR图谱分析系统,其基本涵盖了国外同类分析系统所具有的功能,技术性能指标达到国际先进水平,能够满足一线法医工作者对于混合STR图谱分析的多样化需求,提高混合STR图谱结果的利用率。